Ciências Biológicas e da Saúde
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Item A superexpressão de GmbZIPE2 em protoplastos de soja sugere um papel regulador da expressão de genes da fotossíntese e da via de biossíntese de fenilpropanóides(Universidade Federal de Viçosa, 2018-11-30) Gonçalves, Amanda Bonoto; Fietto, Luciano Gomes; http://lattes.cnpq.br/9080276580537208A modulação da transcrição gênica é fundamental para a formação de uma resposta de defesa eficaz em plantas sob estresses. Os mecanismos de modulação são regulados principalmente por fatores de transcrição. A família de fatores de transcrição com domínio básico de zíper de leucina (bZIP) é relacionada com vários processos na planta, dentre eles a fotossíntese e estresse abiótico e biótico, e são divididos em 12 grupos em soja. GmbZIPE2 (Glyma05g168100) é um membro do grupo E da família bZIP de Glycine max, e membros desse grupo ainda não foram caracterizados nesta espécie. O gene GmbZIPE2 de soja tem sua expressão alterada em resposta à infecção fúngica e ao tratamento com fitormônios de defesa. A proteína GmbZIPE2 é capaz de se ligar ao cis- elemento H-box in vitro e ativar a transcrição da chalcona sintase CHS8, importante enzima da via de biossíntese de fenilpropanoides. Além disso, GmbZIPE2 interage com duas proteínas relacionadas à fotossíntese e estresse oxidativo. Neste estudo foi realizado o transcriptoma de protoplastos de folhas de soja superexpressando GmbZIPE2 a fim de se obter mais informações sobre a função desse fator de transcrição. A maior porcentagem de genes ativados pela superexpressão de GmbZIPE2 estão relacionados com fotossíntese. Um número expressivo de genes ativados são fatores de transcrição, dentre eles dois WRKY33, gene que é relacionado a indução da produção de fitoalexinas na defesa contra patógenos. Nossos resultados sugerem que GmbZIPE2 possui um papel regulador na via de biossíntese de fitoalexinas e na fotossíntese, mais especificamente, no controle de estresse oxidativo.Item Activation of the NIK1/RPL10/LIMYB signaling circuit by biotic and abiotic signals and regulation of defense and growth parameters(Universidade Federal de Viçosa, 2022-01-28) Teixeira, Ruan Maloni; Fontes, Elizabeth Pacheco Batista; http://lattes.cnpq.br/6336658294674908Item Análise proteômica comparativa da saliva de Rhodnius prolixus, Triatoma lecticularia e Panstrongylus herreri(Universidade Federal de Viçosa, 2015-09-24) Montandon, Carlos Emmanuel; Siqueira, Cláudio Lísias Mafra de; http://lattes.cnpq.br/7022699709229549Triatomíneos são artrópodes hematófagos transmissores do Trypanosoma cruzi e Trypanosoma rangeli. É sabido que o comportamento alimentar e a transmissão de patógenos por estes vetores variam entre as diferentes espécies e são dependentes, direta ou indiretamente, de moléculas bioativas da saliva que auxiliam na interação vetor-parasito-hospedeiro. Neste sentido, caracterizamos e comparamos o repertório sialoproteômico de três importantes espécies dos principais gêneros de triatomíneos das Américas: Rhodnius prolixus, Triatoma lecticularia e Panstrongylus herreri, identificando 221 proteínas, sendo 69 de R. prolixus, 100 de T. lecticularia e 52 de P. herreri. Dentre os principais achados, encontramos a alta prevalência de nitroforinas em R. prolixus (68%) e de lipocalinas em T. lecticularia (79%) e P. herreri (49%). Neste contexto, as proteínas mais significativas por spot de R. prolixus, T. lecticularia e P. herreri mais abundantes, apresentando expressiva diferença entre as outras, foram Nitrophorin-4 (28,7%), Salivary lipocalin 5 (65,2%) e Putative triabin (20,5%), respectivamente. Outro achado significativo foi a única molécula presenta nas três espécies estudadas, a proteína não categorizada T1HT34, a qual atuaria como elo proteico entre elas, identificando-se como paráloga da Putative fry-like conserved. Os dados encontrados pela caracterização pelo Gene Ontology, vieram a corroborar achados anteriores, evidenciando-se todas as funções identificadas como beneficiadas pelo repasto sanguíneo dos triatomíneos.Item Análise proteômica comparativa do intestino de Anticarsia gemmatalis em resposta a inibidores de proteases(Universidade Federal de Viçosa, 2017-02-24) Coura, Roberta Ribeiro; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; http://lattes.cnpq.br/0182455179210454A lagarta-da-soja, Anticarsia gemmatalis, é considerada uma das principais pragas da cultura da soja. Os danos causados pelo ataque deste inseto associado à relevância econômica do cultivo da soja para o Brasil e para o mundo fomentam a busca por alternativas no controle deste inseto. Estratégias de controle de insetos-pragas baseadas no uso de inibidores de proteases têm sido estudadas, o conhecimento das enzimas digestivas e metabolismo do inseto tem se mostrado fundamental. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo identificar proteínas com abundância diferencial no intestino de A. gemmatalis em resposta a inibidor de protease, visando obter dados que poderão contribuir para esclarecer o mecanismo adaptativo de A. gemmatalis em resposta a inibidores de proteases na interação planta-inseto. Foram dissecados intestinos de lagartas alimentadas com os inibidores de proteases berenil e o Kunitz, nas horas 6 h, 12 h, 24 h e 48 h e as proteínas extraídas por maceração. Os spots com abundância diferencial foram digeridos e os peptídeos analisados no espectrômetro de massa MALDI/TOF-TOF. Os espectros (MS/MS) foram pesquisados em bancos de dados usando a ferramenta MASCOT e as proteínas identificadas foram validadas usando o software Scaffold. Foram 44 spots de proteínas identificados, nos tratamentos com os inibidores berenil e Kunitz, nas diferentes horas, que correspondeu a 33 proteínas distintas. As proteínas identificadas pertenciam a diferentes categorias funcionais envolvidas no metabolismo energético, do carbono, de aminoácido, de carboidratos, de lipídeos, no estresse oxidativo e no turnover proteico e chaperonas moleculares. Algumas isoformas da proteína ATPase apresentaram menor abundância em relação ao controle, em ambos tratamentos. Enquanto a maioria das proteínas de choque térmico 70 apresentaram maior abundância que o controle. As proteínas piruvato desidrogenase, fosfoglicerato mutase e a ATP sintase aumentaram abundância e as proteínas aldeído desidrogenase e carbonil redutase diminuíram abundância no tratamento com berenil. No tratamento com Kunitz as proteínas arginina quinase e a choque térmico Hsp 90 aumentaram a abundância enquanto as proteínas enoil-CoA hidratase, ATP sintase e a aspartato aminotransferase diminuíram a abundância. A presença dos inibidores berenil e Kunitz na lagarta A. gemmatalis alterou o perfil de proteínas no intestino em ambos tratamentos.Item Análise proteômica de glândulas salivares do carrapato Amblyomma sculptum(Universidade Federal de Viçosa, 2016-06-23) Barros, Edvaldo; Siqueira, Cláudio Lísias Mafra de; http://lattes.cnpq.br/9351943615435543Os carrapatos são artrópodes hematófagos obrigatórios de grande importância médica e veterinária. Estes artrópodes tem desenvolvido adaptações evolutivas que permitem aos mesmos a sobrevivência por longos períodos de tempo sem se alimentarem ou que, após se alimentarem até a ingurgitação, vivam com a presença de altos níveis de substâncias que estimulam o estresse oxidativo. Além disso, apresentam uma anatomia bem conciliada ao seu modo de vida e aquisição de alimentos. Dentre os principais órgãos do carrapato, as glândulas salivares apresentam grande repertório de proteínas, que desempenham papéis essenciais para o seu desenvolvimento e para a manutenção de sua relação com os hospedeiros vertebrados. Essas proteínas também podem facilitar a transmissão de agentes patogênicos aos hospedeiros. Nesse projeto, o sialome do carrapato Amblyomma sculptum foi analisado utilizando cromatografia líquida acoplada com a espectrometria de massas. Essa abordagem combinada permitiu a identificação de 501 proteínas, das quais, aproximadamente, 15% foram classificadas como proteínas secretadas putativas. As classes do grupo de proteínas secretadas putativas que mais se destacaram foram: a) família das proteínas ricas em glicina; b) família das enzimas secretadas e c) ferritinas. As proteínas ricas em glicina podem desenvolver várias funções, dentre elas, a formação do cone de cemento e a resposta a estresse. Proteínas vinculadas com o citoesqueleto, com a maquinaria de modificação proteica e com o transporte intracelular também foram identificadas, as quais foram reunidas no grupo “putative housekeeping proteins”. A diferença na abundância das proteínas entre os gêneros macho e fêmea, encontradas nas glândulas salivares dos carrapatos A. sculptum, foi indicada pela identificação de proteínas em apenas um dos sexos. As proteínas ricas em glicina, do citoesqueleto e chaperonas foram identificadas em maior número em machos do que em fêmeas, sugerindo que esse gênero esteja melhor preparado para a produção de cemento, resposta ao estresse, modificação proteica e transporte intracelular do que as fêmeas. A caracterização funcional das proteínas permitiu uma correlação dentro de um contexto biológico e facilitou um melhor entendimento sobre o sialome de carrapatos A. sculptum. Essa informação pode auxiliar na identificação de novos candidatos a alvos para o controle de carrapatos, no entanto, estudos adicionais devem ser realizados com o objetivo de melhorar o conhecimento das vias de controle das diferentes funções celulares.Item Análises bioquímica, microbiológica e proteômica de pacientes com sepse(Universidade Federal de Viçosa, 2021-05-27) Leal, Dalila Teixeira; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; http://lattes.cnpq.br/9063675498055119A Sepse é caracterizada, de acordo com o The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock, como a disfunção orgânica com risco de vida, causada por resposta desregulada à infecção. Na presente investigação, realizou-se estudo retrospectivo observacional com objetivo de analisar os parâmetros bioquímicos, microbiológicos e proteômicos de pacientes com Sepse internados em uma Unidade de Terapia Intensiva (UTI) de hospital da Zona da Mata de Minas Gerais, Brasil. Essa tese apresenta a seguinte estrutura: Introdução, apresentando revisão dos principais conceitos relativos à Sepse; três Capítulos correspondentes a três artigos; Discussão e Conclusão Geral; mais as Referências. O primeiro Capítulo descreveu os principais microrganismos encontrados nas amostras clínicas dos pacientes internados com Sepse e a resistência antimicrobiana apresentada por esses patógenos. Demonstrou-se que os dispositivos invasivos mais utilizados pelos pacientes com Sepse (n=19) foram o cateter venoso central, o ventilador mecânico e o cateter urinário. As axilas e a secreção traqueal foram os locais mais colonizados. Os microrganismos isolados, relacionados com a colonização, foram a Psudomonas aeruginosa, Enterobacter spp. e Acinetobacter spp. Em relação a infecção, o trato urinário foi o mais acometido e o principal microrganismo relacionado a esta infecção foi a Pseudomonas aeruginosa. Nas culturas investigadas, relacionadas tanto com a colonização, quanto infecção, Ciprofloxacino foi o antimicrobiano ao qual as bactérias apresentaram maior resistência. O segundo Capítulo teve por escopo a análise dos parâmetros bioquímicos e as relações entre neutrófilo/linfócitos (RNL), plaquetas/linfócitos (RPL) e linfócitos/monócitos (RLM) de pacientes com Sepse, internados na UTI (n=7). As principais fontes de infecção foram o sistema respiratório e o abdômen. O microrganismo mais frequente, isolado nas culturas, foi a Escherichia coli. Os valores de creatinina, ureia e FiO 2 apresentaram-se elevados desde o início da internação para os enfermos com Sepse que evoluíram para o óbito. Nos pacientes que faleceram, a Relação Neutrófilo/Linfócito (RNL) aumentou ao longo do tempo, ao contrário dos doentes que sobreviveram, os quais apresentaram queda nesses valores ao longo do tempo. A RNL mostra-se como marcador prognóstico importante para Sepse. O terceiro capítulo orientou-se à descrição dos spots de proteínas, encontrados ao longo do tempo (T1xT2 e T2xT3), obtidos por análise de detecção e quantificação diferencial sobre os géis 2DE, com diferenças estatísticas nas comparações entre enfermos com Sepse (n=7) que receberam alta e aqueles que evoluíram para a óbito. A análise longitudinal mostrou que houve diferenças entre os dois grupos quanto ao tempo e desfecho da doença. Os pacientes que evoluíram para o óbito tiveram número maior de spots proteínas alteradas ao longo do tempo, principalmente entre os tempos T2 e T3. Novos estudos são necessários à caracterização microbiológica e bioquímica dos pacientes com Sepse, especialmente no que concerne a correlação entre esses dados, que provavelmente contribuirá à melhor compreensão desta importante condição mórbida. Palavras-chave: Prognóstico. Proteômica. Sepse. Spots de Proteína.Item Anotação e montagem de transcriptomas de intestino médio e ovários do carrapato Amblyomma sculptum, antes e após a infecção por Rickettsia amblyommii(Universidade Federal de Viçosa, 2016-02-29) Moreira, Higo Nasser Sant’anna; Siqueira, Cláudio Lísias Mafra de; http://lattes.cnpq.br/3049631592691033O objetivo deste trabalho foi construir um catálogo de genes para o genoma funcional dos órgãos internos do carrapato A. sculptum, bem como, avaliar os padrões de expressão gênica no intestino médio (MDG) e ovários (OVA) frente à condições de não-infecção (MNI e ONI) e infecção por Rickettsia amblyommii (MI e OI). Como primeiro passo, foi realizada a construção de um transcriptome de referência à partir da montagem de 9 transcriptomas (200 milhões de reads) derivados do intestino médio (3), dos ovários (2) e das glândulas salivares (4). O De novo assembly gerou um total de 460,445 contigs, a partir dos quais foram preditas 27.308 CDS expressas em no transcriptome total do A. sculptum. O mapeamento das reads derivadas de cada órgão contra o transcriptoma de referencia permitiu a identificação de 25,569 CDS expressas nos intestinos (MDG), 21,230 CDS expressas em ovários (OVA), enquanto que 10.697 CDS foram derivados dos transcriptomas de glândula salivar (SG). A anotação do transcriptoma de referência (27.308 CDS) permitiu a identificação de 23,228 CDS relacionados a processos housekeeping, enquanto que 2.177 CDS apresentaram sequência de peptídeos (SignalP) e foram anotadas como proteínas secretads.Um total de 261 CDS foram anotadas como elementos transponíveis, 20 CDS foram relacionadas à transcritos virais, enquanto que 1,622 permaneceram sem anotação, sendo anotadas com Unknown. Entre as 29 classes de genes housekeeping, destacam-se aqueles relacionados com Sinal de transdução (3.158 CDS), seguido de 1887 CDS anotadas com os transportadores e 1.523 CDS relacionados maquinaria de transcrição. A avaliação individualizada dos transcriptomas MDG e OVA no tocante a infecção e não infecção por R. amblyommii (infectados vs não infectado) revelou um padrão oposto entre os dois órgãos, com quase todos os processos celulares am MDG superexpressos em resposta à infecção por riquétsia, enquanto a maioria dos processos celular em ovário (OVA) foram down regulados em resposta à infecção por R. amblyommii. Essa down regulação de processes em ovários de carrapatos infectados por rickettsiae corrobora estudos in vitro com outras especíceis de carraátos infectados com Rickettsia spp. o que concorda com outros estudos in vivo com foco ovipostue de carrapatos infectados. com queda das funções fisiológicas da femeas ingurgitada e queda no rendimento da oviposição. Também foi observado up-regulação de proteínas no intestino, em resposta à infecção, sendo essas relacionadas com processes de infecção rickettsial em ́celulas de mamíferos bem como outros invertebrados, tais como actina, complexo Arp 2/3, domínio WASP, proteína tirosina quinase, clatrinas, intergrinas e ontre outras. Estes resultados sugerem que, de forma semelhante à verificada em células de mamíferos e em outras 17 espécies de carrapatos, estas proteínas estar envolvidas durante o processo de infecção do trato intestinal de A. sculptum. No entanto, a down regulação das principais vias metabólicas, maquinaria de replicação e de síntese proteica em ovários em resposta à infecção por Rickettsia (OI contra ONI) indica que esta batéria se constiui uma carga metabólica e fisiológica para os ovários. Alpem de sugerir possível alvos a sere avaliados na interação rickettsia-carrapato, estes resultados também dão suporte à outros estudos e estratégicas para uma melhor compreensão da biologia deste vetor, bem como para o desenvolvimento de estratégias de combate e controle biológico, como vacinas e acaricidas.Item As Serine/Arginine Protein Kinases de Leishmania braziliensis (LbSRPK’s) como novo alvo terapêutico para tratamento da leishmaniose tegumentar(Universidade Federal de Viçosa, 2022-08-30) Leopoldo, Juliana Rodrigues; Vasconcellos, Raphael de Souza; http://lattes.cnpq.br/7807197607284460A Leishmaniose é uma doença infecto-parasitária causada por protozoários da espécie Leishmania. Segundo a Organização Mundial da Saúde, as leishmanioses são endêmicas em 98 países ao redor do mundo, que atinge principalmente países emergentes e em desenvolvimento localizada entre os trópicos. As leishmanioses são classificadas de acordo com os sintomas apresentados e podem se dividir em dois grandes grupos: as Leishmanioses Cutâneas e a Leishmaniose Visceral, a depender da espécie de leishmania que infecta o hospedeiro. No Brasil, os tratamentos de primeira escolha são os antimoniais pentavalentes e os de segunda escolha a anfotericina B em sua formulação lipossomal e quando esses medicamentos não podem ser prescritos, são usadas as pentamidinas. Todos esses medicamentos são disponibilizados pelos Sistema Único de Saúde (SUS) no Brasil. O tratamento muitas vezes necessita de vigilância hospitalar para monitoramento do paciente enquanto o recebe por ser muito tóxico e poder causar danos ao paciente. Isso gera efeitos citotóxicos muito graves e podem fazer com que o tratamento seja abandonado por parte do paciente que, na maioria das vezes, ou reside em local distante do estabelecimento de saúde, ou apresenta quadros de toxicidade aguda devido ao tratamento. Devido a isso, novas terapias leishmanicidas são necessárias de modo urgente, tanto no Brasil quanto no mundo. Já foi descrito por muitos estudos que as Serine Arginine Protein Kinases, as SRPKs, estão desreguladas em processos infecciosos como o HPV, HIV e doenças crônicas como o Alzheimer e o câncer. Além disso, um grupo de pesquisadores desenvolveu um inibidor de SRPK em humanos, o SRPIN340, que quando testado para leishmanioses, não apresentou nenhuma eficácia. Assim, com o presente trabalho, testamos compostos análogos sintéticos do SRPIN340 para o tratamento da Leishmaniose Tegumentar Americana, causada por Leishmania braziliensis. No total 91 compostos, de três séries foram testados e no ensaio de infecção observamos que todas as séries tiveram resultados promissores quanto a potencial atividade leishmanicida. Novos estudos devem ser realizados a fim de que se obtenham maiores informações quanto ao potencial leishmanicida desses compostos. Palavras-chave: Leishmaniose Tegumentar Americana. Alvo farmacológico. Serine Arginine Protein Kinases (SRPK’s).Item Atividade antioxidante e anti-inflamatória da castanha de sapucaia (Lecythis pisonis Cambess) em ratos Wistar(Universidade Federal de Viçosa, 2016-06-14) Martins, Marcos Vidal; Queiroz, José Humberto de; http://lattes.cnpq.br/4685920093225964A Lecythis pisonis Cambess conhecida popularmente como castanha de sapucaia, tem origem brasileira e é proveniente da Floresta Pluvial Atlântica. Estudos prévios realizados com a sapucaia em nosso laboratório demonstraram a presença de importantes compostos quimicos da sapucaia e revelaram que o uso contínuo na dieta poderá contribuir para efeitos benéficos à saúde. Os principais resultados mostraram que a sapucaia é fonte expressiva de ácidos graxos insaturados, proteínas e minerais como manganês, magnésio zinco e que, em conjunto, podem configurar como potenciais agentes protetores em diferentes desordens metabólicas. Tem-se verificado na literatura que o consumo de castanhas pode trazer importantes benefícios a saúde humana. Alguns trabalhos atribuem às castanhas e nozes efeitos na prevenção de doenças crônicas não transmissiveis ligadas ao estresse oxidativo. Diante de tais informações objetivamos avaliar a capacidade antioxidante e anti-inflamatória da castanha de sapucaia inserida em diferentes tipos de dieta, a AIN93G e a Dieta de Cafeteria em tecidos hepático e cerebral de 48 ratos da linhagem Wistar. Os animais foram divididos em quatro grupos e o estudo foi conduzido por 28 dias e realizada eutanásia no 14o e no 28o de todos od grupos para que fosse avaliado o impacto em relação ao tempo no metabolismo animal. A Expressão gênica dos marcadores inflamatórios TNF-α e NFkB, bem como dos marcadores antioxidantes ZnSOD e HSP-72 foi determinada pela reação em cadeia da polimerase quantitativa pós-transcrição reversa (qPCR). A atividade antioxidante também foi verificada pela determinação das espécies reativas do ácido tiobarbitúrico (TBARS) e por mensuração da atividade da enzima superóxido dismutase. A expressão gênica dos marcadores inflamatórios NFkB (p65) e TNF-α foi menor para os grupos de ratos que consumiram as dietas enriquecidas com sapucaia com diferença significativa pelo teste de Tukey (p<0,05). A proteína de choque térmico HSP- 72 e a enzima ZnSOD apresentaram aumento da expressão gênica com diferença estatística significativa (p<0,05) para ambos os grupos que consumiram sapucaia em suas dietas. As propriedades nutricionais da castanha de sapucaia exerceram importante atividade protetora por modular a atividade antioxidante e o processo inflamatório nos tecidos hepático e cerebral dos animais avaliados.Item Atividade nematicida in vitro de micélios e extratos de Fusarium verticillioides e Pleurotus djamor(Universidade Federal de Viçosa, 2020-09-30) Tavares, Gabriella Peterlini; Queiroz, José Humberto de; http://lattes.cnpq.br/9080290215531607Os nematoides do gênero Meloidogyne são responsáveis por enormes prejuízos na agricultura, sendo considerados os principais fitopatógenos devido ao seu modo de vida endoparasitário. Ao infectar as raízes provocam sérios danos que culminam na perda de produtividade no campo. Como alternativa para controlar essa praga agrícola sem prejudicar a saúde humana e o meio ambiente, fungos nematófagos são muito utilizados, sendo considerados inimigos naturais dos nematoides. Este trabalho tem por objetivo investigar os fungos Fusarium verticillioides e Pleurotus djamor como agentes de biocontrole. Foram testadas as atividades do micélio, do extrato bruto e da protease parcialmente purificada provenientes de um isolado de F. verticillioides sobre juvenis de Meloidogyne javanica. A punficação enzimática ocorreu por meio de ultrafiltração seguida de cromatografia de troca iônica. Obteve-se um pool enzimático com um fator de purificação de 19,79 vezes e um rendimento de 1,58% que apresentou maior atividade proteolítica a 50ºC em pH 9. A protease parcialmente purificada se mostrou termoestável a 50ºC, mantendo atividade relativa superior a 50% durante 60 horas nessa temperatura. A atividade enzimática foi inibida em presença de SDS e PMSF, características associadas a serino proteases. A atividade nematicida de F verticillioides foi observada após 24h de tratamento com micélio, extrato bruto e protease parcialmente purificada, os quais promoveram redução (p < 0,01) de 71,26 %, 61,48 e 84,81% na quantidade de juvenis J2 de M. javanica vivos, respectivamente. Os resultados obtidos demonstram F. verticillioides é um organismo promissor no controle biológico de fitonematóides e seu mecanismo de ação se dá pela produção de proteases degradadoras de cutícula. Também foi avaliada a atividade nematicida do micélio de P. djamor. Na presença dos micélios houve redução (p <0,01) das formas ativas de P. redivivus em 44,61% e 86,79% após tratamento de 24 e 48 horas. Sobre M. incognita houve a redução (p < 0,01) das formas ativas de J2 em 47,42% e 50,23% nos mesmos intervalos de tempo, no entanto não se observou atividade dos micélios sobre a integridade da estrutura dos ovos. O extrato aquoso e o extrato hidroalcoólico também se mostraram eficazes sobre P. redivivus. Durante os ensaios in vitro observou-se a formação de vesículas tóxicas com atividade nematicida. Também foi possível evidenciar a penetração dos micélios fúngicos na cutícula dos nematoides após a imobilização, fato que sustenta a inclusão de P. djamor como um fungo nematófago. Palavras-chave: Biocontrole. Fungos. Nematicida.Item Avaliação da atividade antibacteriana e antibiofilme de óleos essenciais, de suas formulações tópicas e de compostos orgânicos sintéticos em Staphylococcus aureus USA300(Universidade Federal de Viçosa, 2022-01-31) Rodrigues, Fábio Assad Féres; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/1914326080387819A utilização de antibióticos de maneira indiscriminada está diretamente relacionada com a seleção de bactérias resistentes. Como alternativa no combate a infecções bacterianas, tem-se prospectado novas moléculas provenientes de produtos naturais, como aquelas presentes nos óleos essenciais. Estes são compostos do metabolismo secundário de plantas, com algumas funções antibacterianas confirmadas. Adicionalmente, desempenham funções na atração de polinizadores, alelopatia e proteção contra mudanças drásticas na temperatura. O presente estudo analisou o efeito antibacteriano de óleos essenciais em Meticilina-resistente Staphylococcus aureus USA300 (MRSA-USA300). Esta bactéria é responsável por diversos casos de infecções na pele, no pulmão e podendo causar sepse. Estudos anteriores relataram a multirresistência desta bactéria a diversas classes de antibióticos, elevando a importância na prospecção de novas moléculas para o combate deste microrganismo. Neste contexto, o objetivo do trabalho foi avaliar a atividade antibacteriana e antibiofilme de dezenove óleos essenciais e de suas formulações tópicas em MRSA-USA300. Inicialmente, dezenove óleos essenciais foram analisados quanto a possível atividade antibacteriana e antibiofilme em MRSA-USA300. Quatro óleos essenciais apresentaram atividade antibacteriana na triagem inicial, sendo eles: canela, coentro, cravo e tangerina. Os resultados de cromatografia gasosa desses óleos revelou os principais componentes, sendo predominantes os terpenos e fenilpropanoides. As análises de concentração inibitória mínima (CIM) e de concentração bactericida mínima (CBM) foram realizadas com os quatro óleos essenciais ativos. Os valores de CIM e CBM foram idênticos para todos os óleos essenciais, com valores entre 10 mg/mL a 1,25 mg/mL. O óleo essencial de coentro (1,25 mg/mL) e o de canela (2,5 mg/mL) apresentaram os menores valores de CIM e CBM sendo considerados os mais efetivos. Adicionalmente, foram realizadas análises de citotoxicidade em eritrócitos humanos. O óleo essencial de tangerina foi o único que causou hemólise em todas as concentrações analisadas. Os demais óleos essenciais não causaram hemólise na concentração de 1xCIM e nas sub-CIM. Nas análises do biofilme pré-formado, todos os óleos analisados foram capazes de romper o biofilme nas concentrações CIM e supra-CIM, sendo o óleo de coentro o único capaz de romper em uma concentração sub-CIM (1/2x). Para o biofilme em formação, o óleo essencial de canela apresentou uma maior inibição na concentração 1/2xCIM. Os óleos de canela e coentro foram selecionados para serem incorporados em formulações tópicas na consistência de gel. A CIM e a CBM das formulações contendo os óleos foram idênticas comparadas quando se utilizou os óleos isolados. Ademais, os experimentos de hemólise, biofilme pré-formado e biofilme em formação apresentaram resultados semelhantes quando as formulações tópicas foram analisadas, evidenciando a capacidade das formulações no rompimento e inibição do biofilme e a não toxicidade em eritrócitos humanos. As formulações contendo óleos essenciais de canela e coentro apresentaram características bactericidas a partir da análise da curva de crescimento, sendo a que continha o óleo essencial de coentro apresentando uma maior taxa de morte. Nas análises in vivo com Galleria mellonella, as formulações foram consideradas seguras por não acarretar a morte dos indivíduos na concentração CIM. Esses resultados evidenciam a possibilidade do uso dos óleos essenciais analisados e suas formulações tópicas como agentes no tratamento a infecções causadas por bactérias resistentes, a exemplo do MRSA-USA300. Palavras-chave: Antibióticos. Óleos essenciais. Formulações tópicas. Multirresistência.Item Avaliação da atividade antimelanoma de formulação transdérmica de um derivado sintético de dibenzoilmetano(Universidade Federal de Viçosa, 2017-06-29) Oliveira, Marcos Rodrigo de; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/3817932589238006O câncer (neoplasia maligna ou tumor maligno) pode ser conceituado como uma massa de tecido cujo crescimento excede ao crescimento dos tecidos saudáveis e que persiste mesmo depois da interrupção dos estímulos que o desencadeou. O melanoma se destaca entre os tipos de câncer mais agressivos, com cerca de 1.500 mortes ao ano no Brasil. O estresse oxidativo pode ter um papel importante no melanoma. Células de melanoma revelam um elevado nível de ácidos graxos poli-insaturados, os quais são alvos sensíveis à peroxidação lipídica, a qual leva a formação de aldeídos α,β-insaturados, como o malondialdeido (MDA). Na constante busca por novas terapias eficazes para o tratamento do melanoma, os derivados de dibenzoilmetano se tornaram foco do estudo devido à suas propriedades fotoprotetoras, antitumorais e antimicrobiana. O dibenzoilmetano (DBM) (1,3- Difenilpropano-1,3-propanodiona) e seus derivados são substâncias pertencentes à classe dos flavonoides, raramente encontrados na natureza e têm sido isolados de algumas espécies de Lonchocarpus, além de poderem ser obtidos através de síntese orgânica. Dessa forma, com o objetivo de sintetizar, caracterizar e avaliar a atividade antimelanoma do composto inédito na literatura, 1,3-difenil-2-benzil-3- hidroxi-1-propanona (DBPOH), foi realizada a síntese, purificação por HPLC e caracterização através de RMN H 1 e RMN C 13 do composto. Foram realizados testes in vitro, in vivo, de uma formulação transdérmica em células B16F10 e camundongos C57BL, respectivamente. A síntese realizada em duas etapas teve o rendimento de 78% na primeira e de 48% na segunda etapa. O composto foi detectado no plasma de camundongos após a aplicação de uma formulação transdérmica, através de LC-MS. Após o teste de citotoxicidade realizado com MTT, a IC 50 foi 10,5 μg/mL para as células da linhagem melan-A, de 3,8 μg/mL para a B16F10, respectivamente, com índice de seletividade (IS) de 2,7. O tratamento em células B16F10 por 16 horas com o composto DBPOH induziu a morte majoritariamente por apoptose na concentração 13,903 μg/mL (44 μM) (Anexina V- FITC + /PI - e Anexina V FITC + /PI + ). Nessa concentração, o composto induziu em torno de 94% de apoptose nessas células. Não houve alteração nos valores de ambas as transaminases ALT e AST. Os valores de creatinina sérica também não foram diferentes significativamente (p>0,05) entre os tratamentos. Foi verificado que na dosagem do ácido úrico sérico, houve uma diminuição de 48%, 50%, 50% e 76%, nos tratamentos com as concentrações: 0,25 mg/g, 0,50 mg/g, 1,00 mg/g e 2,00 mg/g, respectivamente (p<0,05). O composto DBPOH reduziu a atividade da Glutationa S Transferase em 27% e 16% nas concentrações 0,50mg/g e 1,00 mg/g, respectivamente, nos tumores. Com relação ao tecido hepático, foram observadas alterações nas concentrações de malondialdeido em todos os tratamentos, com diminuições de 72%, 65%, 79% e 88%, nas concentrações 0,25 mg/g, 0,50 mg/g, 1,00mg/g e 2,00 mg/g, respectivamente. Com relação à catalase, somente o tratamento com 2,00mg/g, reduziu sua atividade, cerca de 40%. Os dados obtidos indicam que o composto DBPOH pode ser um candidato a medicamento para o tratamento do melanoma, mais estudos complementares são necessários para garantir a segurança com relação à toxicidade e para verificar o mecanismo de ação e a farmacocinética do composto.Item Avaliação da inibição da nucleosidio trifosfato difosfohidrolase de Trypanosoma cruzi (TcNTPDase1) por compostos sintéticos não naturais derivados da ent-isoquercetina(Universidade Federal de Viçosa, 2023-01-12) Ribeiro, Isadora Cunha; Fietto, Juliana Lopes Rangel; http://lattes.cnpq.br/6527501000089483A Doença de Chagas é uma doença tropical negligenciada causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. O arsenal terapêutico para tratamento é muito restrito, com efeitos colaterais importantes e ação limitada dependendo da fase da doença e de variações das cepas do parasito. Sendo é importante o desenvolvimento de novos fármacos. T. cruzi possui em sua superfce uma Ecto-Nucleosídio Trifosfato Difosfohidrolase (E-NTPDase) denominada TcNTPDase1. Já foi demonstrado que a TcNTPDase1 possui papeis importantes para a virulência, infecciosidade e adesão do parasito à célula do hospedeiro mamífero, sendo um potencial alvo para o desenvolvimento de novos medicamentos para tratamento da Doença de Chagas. A quercetina é um flavonóide conhecido por seu papel antioxidante e anti- inflamatório e seu potencial como inibidor de E-NTPDases já foi demonstrado. Este trabalho teve como objetivo a busca de inibidores da TcNTPDase1 recombinante expressa em bactéria. Foram avaliados seis compostos sintéticos (denominados 2, 4, 14, 15, 16 e 17) derivados não naturais da ent-isoquercetina, bem como a quercetina e a miquelianina (derivado natural da quercetina). No capítulo I, apresentamos o artigo que reúne os dados de síntese e de avalição como inibidores desses compostos. A quercetina e miquelianina inibiram a enzima em cerca de 50%. Já 16 apresentou a maior capacidade de inibição (96%) e por cinética enzimática determinou-se inibição do tipo competitiva com Ki de 8,385 µM. Por fim, analisamos a interação do composto 16, o melhor inibidor, com a enzima por docking molecular, verificando o composto 16 interagiu no sitio ativo da enzima e apresentou interações com resíduos considerados importantes para a atividade catalítica da TcNTPDase1. No capítulo II apresentamos a patente “Compostos derivados da ent-isoquercetina, processos de produção e uso como inibidor de NTPDases e em medicamentos para o tratamento da doença de Chagas e Leishmanioses” depositada em maio de 2022. Este trabalho demonstra pela primeira vez que derivados da ent-isoquercetina possuem ação inibitória de ENTPDases podendo ser aplicados no desenvolvimento de fármacos ou de inibidores específicos para uso em terapêutica E- NTPDase alvo dependente.Palavras-chave: Doença de Chagas. E-NTPDases. TcNTPDase1. Inibidores. Quercetina.Item Avaliação do alendronato de sódio, atorvastatina cálcica, ipriflavona e óleo de linhaça no tratamento da osteoporose induzida com dexametasona(Universidade Federal de Viçosa, 2016-11-07) Ferreira Junior, Davilson Bragine; Queiroz, José Humberto de; http://lattes.cnpq.br/6304133380469978O objetivo desse trabalho foi estudar os efeitos do alendronato de sódio, da atorvastatina cálcica, da ipriflavona e do óleo de linhaça no tratamento da osteoporose induzida com dexametasona. A indução da osteoporose consistiu na administração de dexametasona na dose de 7,5mg/kg de peso corporal, por via IM, uma vez por semana durante quatro semanas, à exceção dos animais do grupo controle (G1). Os animais submetidos à indução da osteoporose foram então distribuídos aleatoriamente, recebendo os seguintes denominações e tratamentos: G2 (controle com osteoporose), G3 (Alendronato de Sódio 0,2mg/kg), G4 (Atorvastatina Cálcica 1,2mg/kg), G5 (Ipriflavona 100mg/kg) e G6 (Óleo de Linhaça 2,0ml). Após o período de 30 e 60 dias do início do tratamento os animais foram eutanasiados e então coletadas amostras de sangue para as dosagens dos níveis séricos de cálcio, fósforo, fosfatase alcalina (FAL), fosfatase alcalina óssea (FAO), paratormônio (PTH), glicose e insulina. Além disso, foram coletados os fêmures esquerdos para avaliação biométrica e histomorfométrica. O ensaio biológico foi realizado segundo delineamento inteiramente casualizado com 6 tratamentos e 6 repetições. A princípio foi verificada a existência de distribuição normal com o teste de Shapiro-Wilk (p<0,05). Os grupos foram comparados entre si pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Através das avaliações biométrica e histomorfométrica foi possível verificar a perda estrutural óssea induzida pela dexametasona, assim como a influência positiva na manutenção tecidual de todos os tratamentos, apesar de somente os grupos tratados com alendronato de sódio obterem valores equiparáveis ao grupo normal. Os valores séricos de cálcio, fósforo e PTH demonstraram alterações decorrentes do uso da dexametasona, não apresentando nenhuma alteração significativa relativa aos tratamentos. Os níveis séricos de FAO apresentaram alterações positivas nos grupos tratados com atorvastatina cálcica, ipriflavona e óleo de linhaça. Os níveis séricos de FAL, afetados pelas variantes intestinal, renal e hepática, não apresentaram correspondência à FAO. Os valores dos níveis séricos da glicose e insulina puderam demonstrar o quadro de hiperglicemia consequente do aumento da resistência à insulina, presentes no processo de indução da osteoporose pela dexametasona. A atorvastatina cálcica ocasionou agravamento da hiperglicemia e hiperinsulinemia potencializando o quadro de resistência a insulina levando à instalação do diabetes melittus tipo 2. Tanto a ipriflavona como óleo de linhaça foram capazes de ocasionar queda significativa da hiperglicemia com resultados bioquímicos que caracterizam, principalmente, diminuição do quadro de resistência à insulina.Item Avaliação do efeito cicatrizante da pomada obtida do extrato hexânico de folhas de vanillosmopsis erythropappa schultz – Bip(Universidade Federal de Viçosa, 2019-08-09) Soares Júnior, Duilio Teixeira; Pizziolo, Virginia Ramos; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/7154004679156975Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial cicatrizante das folhas de do extrato hexânico das folhas de Vanillosmopsis erythropappa schultz – bip. e identificar os principais constituintes por CG/EM. Os extratos das folhas Vanillosmopsis erythropappa schultz – bip de foram testados frente teste de estimulação da proliferação celular in vitro, sendo que o extrato em hexânico apresentou resultado mais significativo comparado ao extrato etanólico. Pela análise do extrato ativo cromatografia gasosa-espectroscopia de massa (CG/EM) foi detectado a presença de compostos importantes para o processo de cicatrização celular, como Lupenona; Lupeol e Friedelan-3-one. A expressão do VEGF nos cinco grupos estudados e verificou que aqueles tratados com a pomada contendo o extrato de V. erythropappa Schultz – Bip apresentaram expressão aumentada em grupos tratados com as pomadas nas concentrações 1% e 3%, acelerando assim o processo de cicatrização. Pela análise do extrato ativo por cromatografia líquida acoplada a espectrômetro de massas (CG – MS) permitiu detectar a presença de dois flavonóides: Apigenina e Luteolina importantes no processo de síntese de colágeno tipo I e III. Ao final do tratamento os grupos controle (G4) e Fitoscar® (G5) tiveram maior quantidade de fibras do tipo III, consideradas imaturas, e os grupos tratados com as pomadas contendo extrato 1% e 5% (G1 e G3, respectivamente) tiveram maior quantidade de fibras do tipo I, consideradas maduras, indicando que tais formulações foram efetivas para a cicatrização das feridas, com G3 apresentando o melhor resultado.Item Avaliação do efeito cicatrizante de Inga subnuda e Pseudopiptadenia contorta em feridas cirúrgicas em coelhos(Universidade Federal de Viçosa, 2015-07-10) Vieira, Geisla Teles; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/6343243219299412Cicatrização de ferida é um processo sistêmico e dinâmico que envolve as etapas de inflamação, proliferação e remodelação e, tem por objetivo restaurar a continuidade do tecido. Embora a reparação tecidual seja um processo sistêmico, é necessário favorecer condições locais por meio de terapia tópica adequada para viabilizar o processo fisiológico. Na medicina popular, tinturas das cascas das espécies arbóreas de Inga subnuda (ingá) e Pseudopiptadenia contorta (angico) são utilizadas no tratamento de feridas cutâneas. Tendo em vista esse uso popular, este trabalho tem como objetivo avaliar o efeito destas plantas na cicatrização de feridas cirúrgicas induzidas em coelhos. Foram preparados extratos hidroalcoólicos das cascas de ingá e angico por maceração, e realizadas análises de prospecção fitoquímica e atividade antioxidante pelo método de DPPH. Preparados, os extratos de ingá e angico foram adicionados a Creme Lanette 24% até atingir as concentrações de 1% e 5%. Foram utilizados 36 coelhos machos, da raça Albino Nova Zelândia, 60 dias de vida e peso médio de 2,8 Kg (CEUA/UFV, no064/2012). Duas feridas cirúrgicas de dimensão 1,5 x 1,5 cm foram produzidas na região dorsal-torácica dos animais e tratadas durante 14 dias. A primeira foi confeccionada com lâmina de bisturi e denominada Ferida e a segunda com bisturi elétrico, denominada Queimadura. Os animais, divididos em grupos de seis animais, foram tratados com solução salina; extrato de ingá 1%; extrato de ingá 5%, extrato de angico 1%; extrato de angico 5% e pomada Fitoscar®. Índice de contração da ferida (IC) foi medido no 7o, 10 e 14o dia pós-operatório. Após o 14o dia de tratamento os animais foram eutanasiados e amostras de sangue coletadas para análise bioquímica e hematológica. Em seguida, amostras das feridas e queimaduras foram extraídas cirurgicamente, processadas rotineiramente e coradas com hematoxilina-eosina e picrosirrius. O parâmetro estereológico de densidade volumétrica foi calculado para contagem de fibroblasto, vaso sanguíneo, células inflamatórias, e índice de maturação do colágeno (IMaC). Os resultados foram analisados pela ANOVA, seguido pelo teste de Tukey. Resultados da prospecção fitoquímica e de DPPH mostram presença de flavonoides, taninos e saponinas, e, atividade antioxidante dos extratos de ingá e angico. Os resultados hematológicos e bioquímicos mostram que os animais tratados com os extratos vegetais não apresentaram infecção sistêmica e nem alterações hepáticas e renais. Os parâmetros estereológicos indicam que os extratos de ingá e angico contribuíram para a promoção da fibroplasia, angiogênese e maturação do colágeno nas feridas cirúrgicas. Pelo índice de contração, conclui-se que os extratos de ingá e angico apresentaram efeito cicatrizante tanto na ferida quanto na queimadura, sendo mais efetivos na fase proliferativa. Este estudo forneceu evidências do efeito cicatrizante dos extratos de ingá e angico e do potencial uso como medicamento fitoterápico. Porém, mais estudos são necessários para elucidar o mecanismo de ação destes extratos no processo terapêutico.Item Avaliação do potencial de uma proteína quimérica no diagnóstico de brucelose bovina e modelagem metabólica em escala-genômica de Brucella abortus(Universidade Federal de Viçosa, 2023-08-18) Pinto, Bruno Ribeiro; Mendes, Tiago Antônio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/0154397320558404A brucelose bovina é uma antropozoonose, causada pela bactéria Brucella abortus. Esta bactéria afeta principalmente bovinos e bubalinos. Também pode infectar outros hospedeiros mamíferos como os humanos. Está antropozoonose é uma preocupação significativa na pecuária, devido aos prejuízos causados por esta bactéria. Causando aborto, infertilidade, perdas significativas na produção de leite, na produção de rebanho e no comércio de animas e seus produtos. A transmissão da brucelose bovina para humanos é uma preocupação da saúde pública. A doença pode ser adquirida através do consumo de produtos lácteos não pasteurizados e ou de carne contaminada. O estudo dessa doença é importante para o desenvolvimento de estratégias de prevenção, controle e erradicação visando minimizar os prejuízos econômicos na indústria pecuária. Além disso, ajudar a entender os mecanismos patogênicos, visando desenvolver novas estratégias terapêuticas no tratamento mais eficiente da brucelose humana. Uma das principais formas de controle desta doença é o diagnóstico preciso e precoce de animais infectados, para que possam ser isolados protegendo o rebanho e impedindo a disseminação desta doença. Abordagens de bioinformática como a imuno- informática, pode ajudar na descoberta de peptídeos antigênicos, que podem ser usados para construir proteínas quiméricas. Estas proteínas são ferramentas capazes de identificar de forma específica, e com alta sensibilidade anticorpos, sendo uma estratégia para o desenvolvimento de novos métodos de diagnósticos para brucelose bovina. Entender o metabolismo deste patógeno, pode nos ajudar a esclarecer mecanismo e adaptações da patogênese, permitindo desenvolver novas estratégias terapêuticas. A modelagem metabólica em escala-genômica é uma abordagem que reconstrói in silico redes metabólicas de um organismo. Permitindo realizar simulações em diferentes condições, predizendo fenótipos, genes essenciais, reprogramações metabólicas que podem ajudar a elucidar processos biológicos da patogênese. Neste trabalho foi avaliado o potencial de diagnóstico de uma proteína quimérica desenvolvida para o diagnóstico de brucelose. Apesar de ser capaz de identificar anticorpos contra Brucella, os parâmetros sensibilidade e especificidade devem ser reavaliados em novos experimentos. Também foi desenvolvido o primeiro modelo metabólico em escala-genômica de B. abortus composto por 932 genes, 1140 reações e 999 metabólitos, capaz de predizer in silico, genes essenciais com acurácia de 79% na condição meio rico 2YT assim como a predição de crescimento em diferentes fontes de carbono e nitrogênio. A partir deste modelo, foi possível identificar através de uma análise dos genes essenciais com base nos critérios: Não homologia com proteínas humanas, drogabilidade, fator de virulência e amplo espectro, quatro potenciais Drug Targets que podem ser validados como alvos antimicrobianos. Palavras-chave: Brucella abortus. Diagnóstico Sorológico. Modelo Metabólico em Escala-genômica. Biologia de Sistemas, Brucelose.Item Avaliação do silenciamento de SRPK por CRISPR/Cas9 e da interação com EFHD2 em melanoma metastático murino(Universidade Federal de Viçosa, 2020-02-28) Caetano, Mônica Maria Magalhães; Bressan, Gustavo Costa; http://lattes.cnpq.br/6186407627893168As proteínas cinases serina/arginina (SRPK) são classicamente relacionadas à regulação do splicing do pré-mRNA pela fosforilação de fatores de splicing ricos em dipeptídeos serina e arginina, as proteínas SR. É evidente a importância de estudos que visem elucidar os mecanismos moleculares da atuação das SRPK em diversas vias de sinalização, splicing do pré-mRNA e outros processos celulares, sobretudo relacionados ao desenvolvimento do câncer e formação de metástase, nos quais essas cinases já foram identificadas superexpressas. Neste trabalho, avaliamos o impacto do silenciamento de SRPK em melanoma metastático murino. O silenciamento de SRPK2 na linhagem celular de melanoma, B16F10, prejudicou o desenvolvimento do tumor subcutâneo e a formação de nódulos pulmonares in vivo e diminuiu a proliferação e a invasão celular in vitro. A supressão da expressão de SRPK1 e SRPK2, simultaneamente, diminuiu a capacidade de formação de colônias de B16F10. O mecanismo de ação de SRPK2 no desenvolvimento do melanoma parece estar relacionado à sua atuação na dinâmica de polimerização do citoesqueleto de Actina, pois o silenciamento de SRPK2 diminuiu a formação de F-actina nas células B16F10. Um ensaio de duplo-híbrido em leveduras, realizado anteriormente pelo nosso grupo de pesquisa, mostrou a possível interação entre a região espaçadora de SRPK2 e proteínas relacionadas à regulação do citoesqueleto de Actina. Dentre elas, EFhd2 está envolvida na regulação da dinâmica de polimerização do citoesqueleto de actina e formação de metástase em melanoma. Neste trabalho a interação entre SRPK2 e EFhd2 foi confirmada pelos ensaios de co-imunoprecipitação e GST-pulldown. Ensaios de fosforilação in vitro mostraram que EFhd2 pode ser fosforilada por SRPK2. Portanto, com os resultados obtidos até o momento, é possível sugerir que a diminuição da capacidade metastática de B16F10 em decorrência da supressão da expressão de SRPK2 pode envolver, pelo menos parcialmente, alterações na dinâmica do citoesqueleto de Actina via EFhd2. Esses dados criam novas perspectivas sobre o entendimento da relação funcional entre SRPK2 e a dinâmica do citoesqueleto de Actina no contexto do melanoma metastático e potencialmente em outros tipos de tumores. Palavras-chave: Serine/arginine protein kinase. Melanoma. Metástase.Item Avaliação dos extratos e da pomada de folhas de Heteropterys brasiliensis para a atividade cicatrizante: um estudo in vitro e in vivo(Universidade Federal de Viçosa, 2023-02-28) Purgato, Gislaine Aparecida; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/5192450654023095O território brasileiro apresenta a maior biodiversidade do planeta, porém pouco desse arsenal de plantas é devidamente estudado quanto as suas propriedades farmacológicas. Nativa da Mata Atlântica e com risco de extinção, Heteropterys brasiliensis é uma planta utilizada pela medicina tradicional e que não apresenta relatos científicos que comprove seu potencial farmacológico. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial cicatrizante de extratos vegetais de H. brasiliensis, in vitro e in vivo, assim como atividades farmacológicas relacionadas a uma melhor cicatrização: atividade antibacteriana, anti-inflamatória e antioxidante. Os extratos hexânico e etanólico tiveram sua atividade antibacteriana avaliada pelo teste de concentração inibitória mínima (CIM) contra bactérias gram-positivas e gram- negativas. A atividade anti-inflamatória foi avaliada in vitro pela capacidade de inibir a desnaturação de proteínas e pela produção de óxido nítrico induzido por lipopolissacarídeo (LPS) em macrófagos. O potencial cicatrizante foi avaliado in vitro, pela proliferação, citoproteção e migração de fibroblastos NIH/3T3 e macrófago RAW 264.7. Pomadas foram formuladas com o extrato etanólico nas concentrações de 5 e 10% (m/m). Seu potencial cicatrizante foi então, avaliados in vivo quanto ao índice de contração da ferida, avaliação histológica e parâmetros bioquímicos e hematológicos. Além disso, foi determinado a atividade antioxidante tecidual através das enzimas superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa S-transferase (GST) e marcadores como, óxido nítrico (NO) e malondialdeído (MDA). Os resultados demostraram que os extratos de H. brasiliensis apresentaram atividade antibacteriana, principalmente para bactérias gram-positivas. O extrato hexânico demonstrou um maior potencial anti-inflamatório, in vitro. Os extratos foram eficazes de promover a proliferação celular e migração celular, tendo o extrato etanólico apresentado os melhores resultados nos testes in vitro. No experimento in vivo, as pomadas foram eficientes em promover a contração da ferida, aumentar a proliferação celular e neovascularização, bem como reduzir a resposta inflamatória e o estresse oxidativo. Em conclusão, as pomadas formuladas com o extrato de H. brasiliensis foi eficiente no controle do processo inflamatório, oxidativo e atuou na promoção do fechamento rápido e eficaz das feridas induzidas em camundongos. Palavras-chave: Malpighiaceae. Antioxidante. Ferida. Proliferação. Fibroblasto.Item Bioatividade dos extratos das folhas de Xanthosoma sagittifolium e da pomada cicatrizante obtida do extrato etanólico(Universidade Federal de Viçosa, 2023-08-25) Píccolo, Mayra Soares; Pizziolo, Virgínia Ramos; http://lattes.cnpq.br/0134959424347986