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Lipoproteína de Staphylococcus aureus: expressão e participação na invasão de células MAC-T em condições encontradas na glândula mamária bovina
(Universidade Federal de Viçosa, 2024-08-27) Canizo, Yasmim do Nascimento; Ribon, Andréa de Oliveira Barros; http://lattes.cnpq.br/5065715346710729
Lipoproteínas são proteínas de membrana encontradas em S. aureus que exercem diversas funções celulares e estão relacionadas à patogenicidade bacteriana. Um grupo especial de lipoproteínas, denominadas lipoproteínas-like (lpls) vem sendo associado à invasão em células humanas. Essas proteínas são codificadas por genes que estão organizados em um cluster localizado em uma ilha de patogenicidade. Um estudo realizado por nosso grupo identificou no genoma de S. aureus 302, cepa isolada de mastite bovina subclínica, um cluster contendo 6 lpls que têm uma identidade superior a 80%, porém baixa homologia com as lpls de S. aureus RF122, cepa associada à mastite clínica severa. Para avaliar o papel da Lpl na invasão de células imortalizadas do epitélio mamário bovino (MAC-T), uma Lpl de SAU302 foi expressa em Escherichia coli C41 e purificada por cromatografia de afinidade. O sequenciamento do clone comprovou a clonagem do gene de interesse. A proteína recombinante de 31 kDa foi expressa nas frações solúvel e insolúvel. Para os ensaios de invasão, células MAC-T foram incubadas por uma hora com concentrações de 35 a 4.375 µg/mL de lipoproteína recombinante antes da adição da bactéria. Observou-se que apenas as concentrações de 35 e 17,5 µg/mL aumentaram significativamente a invasão em 87% e 53%, respectivamente. Células MAC-T foram incubadas com S. aureus 302 por 30 minutos, 1:30 h e 3 h em meio DMEM contendo 0,6 mM de bipiridina (quelante de ferro), 0,6 mM de bipiridina e concentrações subinibitórias (0,5xCIM) de ampicilina, ciprofloxacina e gentamicina. No tempo de 30 minutos, houve diminuição de até 62% na invasão em todas as condições, quando comparadas ao controle. No tempo de 1 hora e 30 minutos, apenas o acréscimo de bipiridina causou diminuição significativa na invasão. No tempo de 3 horas, a combinação de bipiridina e ciprofloxacina e bipiridina e gentamicina diminuiu a invasão em 77,61% e 81,96%, respectivamente. Para analisar a expressão dos genes lpls, a cepa S. aureus 302 foi cultivada em diferentes condições de estresse, em meio BHI. A extração do RNA total foi feita da cultura na fase de crescimento estacionária, seguida de síntese do cDNA com random primers e RT-qPCR com primer complementar a todos os genes lpls. Observou-se que o acréscimo de bipiridina 0,6 mM, de concentrações subinibitórias de ciprofloxacina e o cultivo da bactéria a 39 ºC com ou sem presença de bipiridina 0,6 mM diminuiu significativamente a expressão dos genes lpls. O acréscimo de bipiridina 0,6 mM e concentrações subinibitórias de ampicilina, ciprofloxacina e gentamicina juntos diminuiu drasticamente a expressão. Os resultados confirmam a expressão de uma Lpl de S. aureus e sugerem que ela promove a invasão bacteriana. Este trabalho foi o primeiro a avaliar a expressão de genes que codificam lpls em condições que simulam o ambiente encontrado pela bactéria e sugere que a lipoproteína auxilia na invasão de células mamárias do epitélio bovino. Palavras-chave: Lipoproteína; Invasão celular; Expressão gênica.
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Óleos essenciais como redutores da excreção de amônia em juvenis de Cyprinus carpio como estratégia para manter a qualidade de água
(Universidade Federal de Viçosa, 2024-06-30) Tótola, Pedro Segantini; Zuanon, Jener Alexandre Sampaio; http://lattes.cnpq.br/7557113825673228
A amônia é um dos principais fatores causadores de perdas, tanto em ambientes de cultivo, como durante o transporte de peixes, por causar danos em brânquias, fígado, rins e sistema nervoso, estresse oxidativo, alterações comportamentais, natação errática, convulsões e morte. Portanto, é necessária a busca por aditivos que reduzam a excreção de amônia e contribuam para a manutenção da qualidade da água. Deste modo, objetivamos avaliar a eficácia e segurança dos óleos de cravo, Syzygium aromaticum, orégano, Origanum vulgare, e melaleuca, Melaleuca alternifolia como redutores da excreção de amônia em juvenis de Cyprinus carpio, uma importante espécie ornamental comercializada no mundo todo. Foram realizados três experimentos independentes, em delineamento inteiramente casualisado com cinco tratamentos e quatro repetições. Foram avaliadas as concentrações 0; 3,75; 7,5; 11,25 e 15 mg/L de óleo de cravo; 0; 1,25; 2,5; 3,75 e 5 mg/L de óleo de orégano, e 0; 8,75; 17,5; 26,75 e 35 mg/L de óleo de melaleuca. Os peixes foram mantidos durante 24h em aquários de vidro de 20 L dotados de aeração e temperatura controlada (24,5 ± 0,46 ºC), contendo 30 peixes/aquário nos experimentos com os óleos de orégano e melaleuca, e 20 peixes/aquário no experimento com óleo de cravo. Cada aquário foi considerado uma unidade experimental. Foram avaliadas as seguintes variáveis: amônia total (AT), amônia não ionizada (ANI), taxa de excreção de amônia (TAN), oxigênio dissolvido e pH da água, bem como a glicose sanguínea dos peixes. Todas as concentrações dos óleos avaliados causaram redução de AT, ANI e TAN, contudo, as concentrações mais baixas (3,75 mg/L de óleo de cravo; 1,25 de óleo de orégano e 8,75 de óleo de melaleuca) apresentaram melhor custo/benefício por serem tão eficazes na redução da excreção de amônia quanto as concentrações mais altas, e serem menos onerosas. As concentrações mais altas de todos os óleos avaliados (11,25 e 15,0 mg/L de óleo de cravo; 2,5; 3,75 e 5,0 mg/L de óleo de orégano e 26,25 e 35,0 mg/L de óleo de melaleuca) causaram estresse nos peixes (aumento da glicemia) e, portanto, não são consideradas seguras. Dessa forma, considerando a eficácia na redução de excreção de amônia, a segurança e os custos do uso dos óleos, as concentrações recomendadas para juvenis de C. carpio são 3,75 mg/L de óleo de cravo; 1,25 de óleo de orégano e 8,75 de óleo de melaleuca. Palavras-chave: nitrogênio amoniacal; extratos vegetais; peixes ornamentais; sedação;
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Caracterização hidrológica da mata ciliar do Rio Huallaga, na zona de amortecimento do Parque Nacional Tingo Maria, Peru
(Universidade Federal de Viçosa, 2024-07-12) Bautista Valera, Maritza; Dias, Herly Carlos Teixeira
O objetivo deste trabalho foi realizar a caracterização hidrológica das matas ciliares do rio Huallaga, adjacentes ao Parque Nacional Tingo Maria, com base na investigação de processos hidrológicos, como o monitoramento da precipitação interna, inventário florestal, características edáficas dos solos, análise da qualidade da água adjacente à floresta e análise da umidade da serapilheira. A metodologia de pesquisa foi aplicada durante um período de oito meses, com a anuência do Serviço Nacional de Áreas Naturais Protegidas (SERNANP), responsável pelo Parque Nacio- nal Tingo Maria (PNTM) na região de Huánuco, Peru. A avaliação dos parâmetros hidrológicos supracitados teve os seguintes resultados: A precipitação externa (Pa) durante oito meses registrou um total de 2745 mm e a precipitação interna (Pi) durante o mesmo período foi de 2.234 mm com uma média mensal de 83,6 % da precipitação em aberto (Pa). No inventário florestal, foram identificados 88 indivíduos, 25 famílias e 42 espécies nas três parcelas. Da mesma forma, as famílias com maior número de espécies foram as Moraceae (20); Fabaceae (15) e Rubiaceae (15). A espécie Sterculia pruriens (Aubl) K Schum, impacta o ecossistema florestal devido às suas características de caule ou tronco (DAP 105,01 cm), a altura comercial (25 m), altura total (35 m) e grande cobertura de dossel, em comparação com as demais espécies identificadas, marcando sua grande importância na estrutura dobosque ciliar. Da mesma forma, uma espécie rara foi encontrada na região, descrita apenas na Colômbia, Venezuela e Brasil, que é a espécie Emmotum glabrum Benth.Em relação à análise de solo, observa-se que os resultados da análise física foram 6 amostras representativas de 1 kg cada uma, em duas profundidades (0-20 cm e 20-40 cm) em três parcelas, com 2 amostras por parcela, suas características são: Parcela 1, solos Franco Argilo Arenoso Parcela 2, solos Franco e Parcela 3, solos Areia franca; o que indica que os solos apresentam boa infiltração de água, o que é importante hidrologicamente. Em relação à análise química, os resultados são: pH: Faixa de 5,8 a 7,6, o que indica variações de levemente ácido a neutro; Matéria Orgânica (Mo): alta em geral, com valores entre 4,0% e 7,1%, o que é positivo para a fertilidade do solo; Nutrientes (N, P, K, Ca, Mg): com teores que variam entre as parcelas, mas em geral há uma boa disponibilidade de nutrientes essenciais e contribuem para a qualidade do solo. Na análise do molhamento da serapilheira, atingiu-se 63 % de umidade e a produção desta foi estimada em 28.489 t/há(vinte e oito toneladas + 489 Kg por hectare). Quanto à qualidade da água, de acordo com o Índice de Qualidade da Água, obteve um IQAde 69,15, considerado de boa qualidade. Embora os resultados geralmente indiquem uma boa conservação da área, por se tratar de uma região próxima às cidades, o monitoramento hidrológico é necessário para mitigar possíveis problemas ambientais. Palavras-chave: Mata ciliar; Caracterização hidrológica; Rio Huallaga.
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Supplementation of butyric and medium-chain fatty acids monoglycerides in diets without growth promoters: effects on performance and intestinal health status in nursery pigs
(Universidade Federal de Viçosa, 2024-07-25) Abranches, Fernanda Fialho; Rocha, Gabriel Cipriano; http://lattes.cnpq.br/2146150345413470
The use of short-chain and medium-chain fatty acids has demonstrated an important role in intestinal function and physiology during stressful periods such as post-weaning, promoting improvements in intestinal epithelial structure and differentiation, intestinal wall integrity, and immune response to support the performance of piglets fed diets without growth promoters. Therefore, the study aimed to evaluate the effects of supplementing butyric and medium-chain fatty acids in diets without growth promoters on zootechnical performance, diarrhea occurrence, blood profile, intestinal morphology and pH, mRNA expression of nutrient transporters, inflammatory markers, antioxidant enzymes, and junction proteins in weaned piglets. Forty piglets aged 21 days (6.70 ± 0.75 kg) were randomly allocated to one of five dietary treatments: (1) CON: control, basal diet; (2) powder acid (PA): CON + 0.75 g of a blend of fatty acids in powder form/kg diet; (3) high powder acid (HPA): CON + 3.00 g of a blend of fatty acids in powder form/kg diet; (4) liquid acid (LA): CON + 0.50 g of a blend of fatty acids in liquid form/kg diet; (5) high liquid acid (HLA): CON + 2.00 g of a blend of fatty acids in liquid form/kg diet. Results were described by comparing the mean of each tested diet vs. CON. Zootechnical performance variables were not affected (P > 0.05) by dietary treatments. The LA diet reduced (P < 0.05) the occurrence of diarrhea while the PA diet tended to reduce (0.05 > P < 0.1). The pH of intestinal contents was reduced (P < 0.05) in piglets receiving PA, HPA, and HLA diets. LA diet increased (P < 0.05) villus height in the duodenum, while others tended to increase (0.05 > P < 0.1). In the jejunum, supplementation of fatty acids in both forms and doses increased (P < 0.05) the proportion of goblet cells. In the ileum, PA diet reduced (P < 0.05) crypt depth and increased (P < 0.05) villus:crypt ratio, and PA, HPA, and HLA diets increased (P < 0.05) goblet cell proportion. Also in the ileum, HPA and LA diets showed a trend towards reduction (0.05 > P < 0.1) in crypt depth and Peyer's patch number. In the jejunum, LA and HLA diets increased (P < 0.05) expression of Occludin and HPA expression of Interleukin 10, respectively. The results suggest that supplementation with a blend of fatty acids in both forms improves intestinal health, modulates pH, intestinal morphology, and local immune response, as an alternative to conventional performance enhancers.Keywords: Butyric Acid; Capric Acid; Caprylic Acid; Short-chain Fatty Acids; Medium-chain Fatty Acids; Organic Acids; Performance; Piglets; Intestinal Health; Monoglyceride
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Gonalidade e índice de Clifford de curvas unirramificadas de gênero baixo
(Universidade Federal de Viçosa, 2024-08-16) Silva, Paula Cristina Basilio da; Abrantes, Lia Feital Fusaro; http://lattes.cnpq.br/0925934568881392
Em princípio, motivados pelo problema de Frobenius, atribuído ao matemático alemão Ferdinand Georg Frobenius (1849 − 1917), vimos o conceito de semigrupos numéricos, suas propriedades e relação com curvas algébricas. Em seguida, estudamos a definição de feixe e gonalidade de uma curva. Através de dois teoremas buscamos caracterizar tais curvas quanto à sua gonalidade. Por fim, trabalhamos com o Índice de Clifford de uma curva com o objetivo de caracterizar as curvas que possuem Índice de Clifford igual a zero. Palavras-chave: Semigrupos Numéricos; Curvas Algébricas; Feixe; Gonalidade e Índice de Clifford.SILVA, Paula Cristina Basilio da, M.Sc., Universidade Federal de Viçosa, August, 2024