Fraction L17 of Lachesis muta muta venom promotes the cellular proliferation in vitro and accelerates the wound healing in mice

Abstract

Lachesis muta muta is a Viperid snake distributed throughout South America and its bite has been reported to cause hypotension, bradycardia, vomiting, diarrhea and affects the coagulation cascade. Studies have shown that proteins isolated from the L. m. muta venom have pharmacological activity against carcinogenic cell lines, coagulation disorders and hypertension control. The present work reported the proliferating activity in vitro and in vivo of the fraction 17 of L. m. muta (L17) on the wound healing. We tested the activity of L 17 at different concentrations in 3T3 fibroblasts and HaCaT Keratinocytes, as well as their activity on the healing process in Swiss-Webster mice. L17 did not affect the survival of fibroblasts and keratinocytes in cell culture and further with 10 μg/ml promoted the proliferation of keratinocytes after 72 h of treatment. In vivo experiment, L17 accelerated the healing process, increasing the cellularity at day 8, and the blood vessel production at day 4 and 8. Likewise, it stimulated the deposition of type I and type III collagen and favored the activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) as well as the reduction of the markers of oxidative stress malondialdehyde (MDA) and carbonyl protein (CP). The results suggest that L 17 could be effective in the healing treatment, since it favors the cellularity and the angiogenesis; in addition, it promotes the deposition of collagen for the formation of Extra Cellular Matrix (ECM). L17 possibly has a proliferative and protective effect against oxidative stress in the wound healing, been a prospective treatment.Lachesis muta muta é uma serpente da família v i peridae distribuída por América do Sul e tem sido reportado que sua mordedura causa hipotensão, bradicardia, vomito, diarreia e efeitos na cascada de coagulação. Vários estudos têm mostrado que proteínas isoladas do veneno de L. m. muta tem apresentados atividades farmacológicas contra linhas celulares de câncer, distúrbios da coagulação e controle sobre a hipertensão. O presente trabalho reporta a atividade proliferativa in vitro e in vivo da fração L17 isolada do veneno de L. m. muta (L17) sobre o processo cicatricial. Nos testamos a atividade de L17 a diferentes concentrações em fibroblastos 3T3 e em queratinócitos HaCaT, assim como sua atividade sobre o processo de cicatrização em camundongos suíços. L17 não afeito a sobrevivência de fibroblastos e queratinócitos em cultura celular e além de isso com 10 μg / ml promoveu a proliferação de queratinócitos HaCaT depois de 72 horas de tratamento. O experimente in vivo mostro que L17 acelerou significativamente o processo cicatricial com um incremente na celularidade ao dia 8 e na produção de vasos sanguíneos nos dias 4 e 8. Além disso, L17 estimulou deposição de colágeno tipo I e colágeno tipo III e favoreceu a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), assim como a redução dos marcadores de estresse oxidativo malondialdeido (MDA) e proteínas carboniladas (PC). Estes resultados sugerem que L17 poderia ser efetivo nos tratamentos de cicatrização, pelo favorecimento na celularidade e a angiogenêse, importantes para a nutrição do tecido, assim como promovendo a deposição de colágeno para a formação da Matriz Extracelular (MEC). L17 provavelmente tem um efeito proliferativo e protetivo sobre o estresse oxidativo no processo cicatricial, sendo um tratamento prospetivo na aceleração da cicatrização.