Utilização da quimioluminescência na determinação das concentrações séricas de progesterona, hormônios luteinizante e folículo estimulante em novilhas holandesas

Abstract

O conhecimento das condições reprodutivas dos bovinos é fundamental para a manutenção da eficiência reprodutiva dos rebanhos. O estudo do perfil hormonal reprodutivo é essencial na avaliação de cada matriz. Os métodos de dosagens atuais, ensaios enzimáticos (ELISA) e radioimunoensaio (RIA) são de alto custo e pouco viáveis para a utilização diagnóstica em larga escala em rebanhos comerciais. O objetivo foi utilizar a quimioluminescência como método analítico para avaliar as concentrações séricas de progesterona (P4 ), hormônios luteinizante (LH) e folículo estimulante (FSH) durante um período aleatório (18 a 45 dias) em novilhas holandesas (n= 9) cíclicas e estabelecer ligaçoẽs com funções reprodutivas. Amostras diárias de sangue, foram coletadas e armazenadas para determinação hormonal por quimioluminescência. O diâmetro do corpo lúteo (CL) foi mensurado por ultrassonografia transretal. Os dados de concentrações hormonais foram avaliados como medidas repetidas, sendo considerado o efeito fixo de dia de coleta pelo procedimento GLIMMIX do SAS®. As concentrações de P4 foram correlacionadas com o diâmetro do CL utilizando o procedimento REG do SAS®. Houve correlação positiva entre o diâmetro do CL e a concentração de P4 (r2=0,22P<0,0001). Os padrões das concentrações de P4, LH e FSH ao longo do período avaliado retrataram o perfil do ciclo estral de forma semelhante aqueles reportados na literatura com o uso de RIA e ELISA. No teste de imprecisão foram observados coeficientes de variação de intra-ensaio de 4,5%,4,6% e 5,4% para P4, LH e FSH, respectivamente. Os resultados obtidos com a quimioluminescência foram condizentes com aqueles de RIE e de ELISA e foram capazes de determinar a ocorrência de ciclos estrais, assim como de avaliar a funcionalidade ovariana. Mais estudos utilizando essa metodologia deverão ser realizados para a utilização dessa metodologia como alternativa em laboratórios de dosagens hormonais de bovinos.

The know ledge of the reproductive conditions of cattle is fundamental for the maintenance of the herd reproductive efficiency . The dosage of reproductive hormones is essential in assessing the real situation of each matrix. However, the current dosage methods of enzyme-linked immunosorbent assay or ELISA and radioimmunoassay (RIA) are expensive and unviable for large-scale diagnostic use in commercial herds. The objective was to use chemiluminescence as an analytical method to characterize the serum concentrations of progesterone (P4), luteinizing hormone (LH) and follicle stimulating hormone (FSH) during a random period (18 to 45 days) in cy clic Holstein heifers (n = 9) and establish links with reproductive functions. Daily blood samples from the caudal vein were collected and the serum stored for analy sis using chemiluminescence. The diameter of the corpus luteum (CL) was measured by transrectal ultrasonography on the days of blood sample collection. The hormone concentration data were evaluated as repeated measures, considering the fixed effect of day of collection by the SAS® GLIMMIX procedure. P4 concentrations were correlated with CL diameter using the SAS® REG procedure. There was a positive correlation between the CL diameter and the P4 concentration (r2=0,22P<0,0001). The patterns of P4 , LH and FSH concentrations throughout the assessed period similarly portray ed those reported in the literature with the use of RIE and ELISA. In the imprecision test, intra-assay coefficients of 4.5%, 4.6% and 5.4% were observed for P4 , LH and FSH, respectively . The results obtained with chemiluminescence were consistent with those of RIE and ELISA and were able to determine the occurrence of estrous cycles, as well as, assess ovarian functionality. Further studies using this methodology should be performed to use it as an alternative in laboratories of bovine hormonal dosages.