Genética e Melhoramento
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Item Estudos citogenéticos em vespas dos gêneros Microstigmus e Spilomena (Hymenoptera, Sphecidae, Pemphredoninae)(Universidade Federal de Viçosa, 1993-12-21) Costa, Marco Antônio; Campos, Lúcio Antonio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/8721647772738636Microstigmus e Spilomena são pequenas vespas com tamanho variando de 3 a 5 mm de comprimento. Microstigmus tem distribuição restrita à região neotropical e Spilomena é cosmopolita. O presente trabalho teve como objetivo determinar o número e a morfologia dos cromossomos em diferentes espécies de Microstigmus e Spilomena bem como estabelecer as relações filogenéticas entre elas com base na variação cariotípica encontrada. Foram analisadas 36 espécies de Microstigmus e 6 espécies de Spilomena, tendo sido evidenciada uma grande variação no número cromossômico nestes dois gêneros. A distribuição destes números foi bimodal, com moda em n=3 e 5. Setenta e quatro porcento das espécies apresentaram n>5. Estas observações levaram à sugestão de que um número cromossômico baixo seja ancestral para o grupo em estudo. 0s números maiores ou próximos teriam derivado dele, principalmente por rearranjos do tipo Robertsoniano. Com base na variação numérica encontrada, foi possível dividir as espécies em três grupos cariotípicos. O grupo I foi mais heterogêneo, com n variando de 3 a 8 e contendo as espécies mais primitivas de Microstigmus e Spilomena. O grupo II foi mais homogêneo em torno de números elevados (n= 7 a 11), porém com dois valores menores (n=4 e 5) e contendo espécies intermediárias de Microstigmus. O grupo III foi mais homogêneo em torno de números baixos (n=3 a 5) e contendo as espécies mais derivadas de Microstigmus. A abordagem sobre a evolução do cariótipo foi mais difícil nos grupos I e II do que no grupo III, onde as mudanças númericas e morfológicas foram menores e menos frequentes. O número de espécies estudadas ainda é pequeno para se discutir com mais segurança a evolução cariotípica nestas vespas. Um maior acúmulo de dados citogenéticos, incluindo novas espécies de Microstigmus e Spilomena poderá fornecer uma melhor definição para o esquema filogenético existente e também para o melhor entendimento da evolução do cariótipo no material em estudo.Item Estudos citogenéticos em vespas do gênero Trypoxylon (Hymenoptera, Sphecidae, Larrinae,Trypoxylonini)(Universidade Federal de Viçosa, 1994-04-13) Gomes, Luiz Fernando; Campos, Lúcio Antônio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/8523494492373933Com o objetivo de fornecer mais dados para o melhor entendimento dos mecanismos envolvidos na evolução do cariótipo dos Hymenoptera e dos Trypoxylon em particular, foram realizados estudos citogenéticos em algumas espécies de vespas do referido gênero. As vespas do gênero Trypoxylon estão biologicamente divididas em dois tipos, quanto ao modo de nidificação: as que fazem ninhos externos, de barro, e as que nidificam em cavidades preexistentes. As coletas das espécies que constroem ninhos externos foram feitas mediante a procura direta nos locais de nidificação, como paredes e portas. As coletas das espécies que nidificam em cavidades preexistentes foram realizadas por meio da técnica de ninhos-armadilhas. Estes eram constituídos por blocos de madeira perfurada ou bambu, de comprimento e diâmetro variáveis, nos quais as vespas construíam seus ninhos. Esses blocos foram colocados em vários locais da região de Viçosa-MG, e eram periodicamente inspecionados e coletados sempre que estavam nidificados. No laboratório, os indivíduos na fase de prepupa ou pupa de olho branco foram submetidos às preparações citogenéticas, sendo que pelo menos um indivíduo de cada ninho foi deixado emergir, os quais foram montados em alfinetes entomológicos, identificados e depositados no Museu de Entomologia da UFV. Foram estudados citogeneticamente 256 exemplares, pertencentes a nove espécies. A variação de distribuição do complemento cromossômico haplóide (n) foi de 15 a 17 e a do número diplóide de braços (2AN), de 34 a 60. As técnicas citogenéticas empregadas, coloração convencional e de banda-C, proporcionaram uma excelente caracterização numérica, morfológica e dos padrões de distribuição da heterocromatina constitutiva, além de fornecer subsídios para inferências dos mecanismos cromossômicos envolvidos na evolução do cariótipo das diferentes espécies. Rearranjos dos tipos fissões e fusões cêntricas, inversões pericêntricas e paracêntricas, mudança do centrômero funcional, adição e deleção de heterocromatina constitutiva foram os prováveis mecanismos responsáveis pela constituição cariotípica das espécies estudadas neste trabalho. A evolução do cariótipo do gênero Trypoxylon, diante das espécies aqui analisadas, é completamente consistente com a hipótese da interação mínima, sendo os principais mecanismos moldadores da evolução atribuídos às fissões cêntricas, ao crescimento em 'tandem' da heterocromatina constitutiva e às inversões pericêntricas.Item Aspectos da reprodução de Melipona quadrifasciata (Hymenoptera, apidae)(Universidade Federal de Viçosa, 1994-12-16) Bezerra, José Maurício Dias; Campos, Lúcio Antonio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/4373437861146232Este trabalho teve o objetivo de estudar os aspectos da reprodução de Melipona quadrifasciata, enfatizando o investimento sexual e suas conseqüências genéticas para fêmeas, machos filhos da rainha e machos filhos das operárias. Foram feitos seis cruzamentos, entre os meses de abril e maio de 1992, dos quais somente três tiveram sucesso. Estes consistiram na cópula de rainhas que geneticamente possuíam um padrão de faixas abdominais interrompidas com machos com padrão de faixas abdominais contínuas. Dessa forma, saber-se-ia a procedência dos machos. Foram feitas transferências de larvas no laboratório, para se conhecer a quantidade de investimento em machos, rainhas e operárias. A seguir, tomou-se a distância intertegular, adotada como a melhor medida que reflete o investimento parental. Durante o período de um ano junho/93 a junho/94 foram analisadas 5.755 indivíduos prestes a emergir de 15 diferentes colméias do Apiário Central da UFV. Foi calculada a freqüência das diferentes castas e sexo e nos adultos resultantes foi medida a distância intertegular. Observou-se que o volume médio de alimento por célula é de 114 ul e que na região central do favo as células possuem menos alimento que na periferia. Rainhas nasceram preferencialmente na periferia, enquanto que os machos são mais freqüentes no centro dos favos. Os meses em que ocorreu o maior nascimento de machos foram junho a agosto e outubro. Estes resultados indicam que o investimento sexual, quando se considera apenas rainhas e machos, é de aproximadamente 1:1. A maior parte dos recursos é alocado nas operárias.Item Herdabilidades, correlações e análise de trilha em abelhas africanizadas (Apis mellifera)(Universidade Federal de Viçosa, 1988-10-11) Souza, Darcet Costa; Campos, Lúcio Antônio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/7106334844689216Foram estudadas, em abelhas africanizadas, as correlações entre os caracteres produção de mel, peso pupal, largura e comprimento da tíbia do terceiro par de patas, área corbicular e comprimento da glossa. Todas as correlações foram significativas (P < 0,01 e/ou P < 0,05), exceto a entre o peso pupal e a produção. A partição destas correlações em efeitos diretos e indiretos, através da análise de trilha, mostrou que, dos caracteres estudados, a largura e o comprimento da tíbia e a área corbicular foram os que apresentaram os maiores efeitos diretos e indiretos sobre a produção. As herdabilidades para os caracteres peso pupal, largura e comprimento da tíbia do terceiro par de patas, área corbicular e comprimento da glossa foram estimadas para cada unidade de seleção, através dos componentes de variância. Todas as estimativas foram relativamente altas, mostrando boas perspectivas de ganhos em trabalhos futuros de melhoramento. Os ganhos previstos com base nas herdabilidades estimadas apresentaram-se maiores para o caso em que se efetuaram a seleção massal entre as rainhas-filhas e a seleção conjunta entre e dentro de rainha-mãe.Item Variabilidade aenetica nos milhos braquíticos 'Piranão' e 'CIMMYT' e avaliação de seus bibridos cripticos(Universidade Federal de Viçosa, 1989-09-15) Assunção, Maurício da Silva; Silva, José Carlos; http://lattes.cnpq.br/8746367253999620No presente trabalho, avaliaram-se os híbridos, planta a Planta (So X So! obtidos de cruzamentos entre as var iedades braquiticas Piranão e CIMMYT, e estudou-se a variabilidade genética em ambas as variedades, por meio de avaliação de suas respectivas progênies S, sem “lattice“ simples. Um ensaio com hibridos (So x So) teve 81 entradas no total, incluindo as testemunhas (Piranão!, 'CIMMYT'e O híbrido comercial 'AG-305 B'produzido pela Companhia de Sementes Agroceres S/A). Outros dois ensaios tiveram, respectivamente, 169 e 144 progênies S,'s das variedades Piranão e CIMMYT. Os caracteres estudados foram: altura de planta, altura de espiga, número de plantas acamadas, número de plantas quebradas, “stand” final, número de espigas, xii Peso de 50 grãos, peso de espigas, peso de grãos, número de folhas acima da espiga, número de folhas abaixo da espiga e umidade. No experimento dos híbridos (So X So!» onde o efeito de tratamentos foi considerado como fixo, decidiu-se selecionar 24 híbridos (So X So) superiores em relação à Produção. Estes híbridos tiveram 10% da produção maior que a média geral do experimento e, também, 14, 18e 51% de Produção maior que as testemunhas 'Piranão, 'AG-305 B' e CIMMyT' respectivamente. Para os outros dois exper imentos das progênies S, S, onde se considerou o efeito de progênies como aleatório, encontrou-se significância em quase todos os caracteres estudados, evidenciando considerável variabilidade genética em ambas as variedades, passível de ser explorada num programa de melhoramento. Tais evidências também puderam ser verificadas pelos altos coeficientes de herdabilidade obtidos para a maioria dos caracteres estudados nos dois experimentos. Somente para os caracteres número de Plantas acamadas, número de plantas quebradas e “stand” final, no experimento das progênies S, Ss do CIMMYT, a análise de variância não apresentou diferenças significativas. Obser vou-se, nos dois experimentos (S,'s da variedade Piranão e S,'s da variedade CIMMYT), que, de maneira geral, as correlações genéticas foram maiores que as ambientais e as fenotipicas, evidenciando a presença marcante de efeitos genéticos. Em ambos os experimentos das progênies S,'s. encontrou-se correlação genética positiva entre altura de planta e altura de espiga, altura de planta e peso de grãos e altura de espiga e peso de grãos.Item Estratificação de ambientes na seleção de genótipos de soja (Glycine max (L.) Merrill) no Mato Grosso do Sul(Universidade Federal de Viçosa, 1987-07-22) Zuffo, Nilsso Luiz; Sediyama, TuneoForam conduzidos 18 ensaios em diferentes localidades e épocas, no ano agrícola I984/85, no Mato Grosso do Sul, com o objetivo de avaliar a representatividade de locais e/ou épocas de semeadura, a inclusão de épocas de semeadura para melhorar a eficiência da seleção de cultivares e linhagens para diferentes regiões e estimar a adaptabilidade e estabilidade fenotípica de II genótipos de soja. Os ensaios conduzidos em diferentes localidades e/ou épocas de semeadura apresentaram uma tendência a alterar significativamente a ordem de classificação dos cultivares e linhagens, sendo maior para o carater produção de grãos do que para outros caracteres. Verificou-se maior possibilidade de substituir um ensaio por outro com relação aos caracteres altura de planta e número de dias para maturação do que para produção de grãos. A seleção de genótipos pode ser feita de maneira mais eficiente por meio da escolha de ambientes a serem agrupados, envolvendo localidades e épocas de semeadura. A combinação de IO localidades na época em que tradicionalmente são conduzidos os ensaios finais, não se mostrou eficiente para a seleção de cultivares e linhagens para todo o Estado do Mato Grosso do Sul. O agrupamento das cinco localidades da regiao Centro-Norte do Estado e o plantio na época tradicional não representaram bem esta região. Apenas o agrupamento região Sul (Grande Dourados) parece estar sendo eficiente com respeito à seleção de cultivares mais bem adaptados as condições desta região.Item Identificação e caracterização parcial de genes diferencialmente expressos na interação tomateiro-Meloidogyne incognita(Universidade Federal de Viçosa, 2005-04-26) Lau, Elene Yamazaki; Brommonschenkel, Sérgio Hermínio; http://lattes.cnpq.br/7802468325148637Meloidogyne incognita é um nematóide endoparasita sedentário que induz a formação de galhas nas raízes das plantas suscetíveis. Em tomateiros com o gene Mi-1, as células próximas ao estilete dos juvenis de segundo estágio exibem reação de hipersensibilidade (HR) a partir de oito a doze horas após a inoculação. Esse trabalho objetivou identificar e caracterizar parcialmente genes envolvidos nas vias de transdução de sinais e nas respostas de defesa do tomateiro a Meloidogyne incógnita mediadas pelo gene Mi-1 utilizando a técnica de hibridização subtrativa seguida de amplificação por PCR (suppressive subtractive hybridization, SSH). A partir dos cultivares quase isogênicas de tomateiros Moneymaker (suscetível) e Motelle (resistente) inoculados com M. incognita foram construídas duas bibliotecas subtrativas enriquecidas para genes diferencialmente expressos na interação incompatível (MoI 24h e MoI 72h) e uma biblioteca para a interação compatível (MMI 24h). Foram seqüenciados 81 clones da biblioteca MoI 72h, 26 da MMI 24h e 620 da MoI 24h. As análises subseqüentes se concentraram nesta última porque as outras duas apresentaram elevada redundância ou muitos ESTs (Expressed Sequence Tags) com similaridade a genes não caracterizados. Na análise de expressão por macroarranjo, 126 (41%) entre os 307 clones não redundantes de cDNAs apresentaram expressão diferencial. A análise de Northern blot não apresentou sensibilidade suficiente para evidenciar diferenças nos níveis de expressão. Vinte e um genes foram submetidos à análise de expressão por PCR quantitativa e, entre estes, oito apresentaram indução duas horas após a inoculação. A classificação dos ESTs em categorias funcionais em potencial mostrou que 31% deles têm relação com resposta de resistência, resposta a patógenos, proteção à célula, sinalização celular ou a estresse abiótico. Os ESTs classificados como não caracterizados corresponderam a 26%. Entre os ESTs com similaridade a genes induzidos nessa interação relatados previamente, estão inibidores de proteases, quitinase, aquaporina, fenilalanina amônia liase, Ki1 e peroxidase. Entre os ESTs relacionados com defesa relatados em outros patossistemas estão os similares a genes que codificam para MAPK4, defensinas, proteínas de transferência de lipídios, PR10 e proteína 14-3-3. Os genes semelhantes a MtN19, D13F MYB ST1 e cinase dependente de cálcio parecem apresentar mais de uma cópia no genoma e os genes semelhantes a Myb1, gene relacionado à resposta de resistência, gene envolvido com a resistência sistêmica adquirida, Ki1 e a defensina parecem estar presentes em cópia única no genoma. Os transcritos dos genes correspondentes aos clones SSH08D08 (MtN19), SSH09A10 (peroxidase 10), SSH10H09 (semelhante a Ki1) e SSH09D04 (defensina) possuem cerca de 2,5 kb, 1,2 kb, 1,8 kb e 0,5 kb, respectivamente. A presença de muitos genes relacionados com defesa e a ausência de genes do patógeno na biblioteca demonstra que a subtração foi eficiente para enriquecer para genes diferencialmente expressos. A grande quantidade de genes identificados e parcialmente caracterizados fornece subsídios para o estudo funcional visando caracterizar as vias de respostas de defesa mediadas pelo gene Mi-1.Item Caracterização de sondas hipervariáveis e de uma sequência genômica de soja homóloga a genes de resistência a doenças(Universidade Federal de Viçosa, 1999-10-25) Martins, Marta Fonseca; Barros, Everaldo Gonçalves de; http://lattes.cnpq.br/4589576265840182Durante a construção de um mapa de RFLP de soja, na DuPont (EUA), as sondas analisadas foram, em sua maioria, monomórflcas, porém algumas se mostraram altamente polimórticas (A1-10, A2-08, A45-10, ASS-09 e A75-10). A fim de melhor caracterizar esse padrão hipervariável, essas sondas foram seqúenciadas. Duas delas (Al-10 e A2-08) não apresentaram similaridade relevante com nenhuma sequência do “GenBank”; entretanto, uma característica marcante dessas sondas foi a sua riqueza em sequências A:T. As outras três sondas continham sequências homólogas a genes que codificam proteínas de resistência a doenças. Devido ao padrão de hibridização extremamente polimorflco revelado pela sonda A45-10, foram desenhados “primers” flanqueando essa sonda para amplincar regiões homólogas em diversos genótipos de soja, para que esse perfil de amplificação pudesse ser utilizado como “tingerprint”. Os produtos de amplificação obtidos, na faixa de 1,5 a 2,0 kb, foram capazes de identificar os diferentes genótipos analisados. A partir de uma biblioteca genômica da variedade de soja FT-Cristalina, foram isolados quatro clones, usando-se a sonda ASB-09. Um deles, o clone CR44, continha um inserto de aproximadamente 16 kb. Dois fragmentos de EcoRl e Pstl do clone CR44, que hibridizaram com a sonda A53-09, foram subclonados e seqúenciados. Esses dois fragmentos formaram um contíguo, denominado GR, de 4.198 pb. A comparação da sequência de aminoácidos predita com outras existentes no “GenBank” indicou uma homologia entre GR e a proteína “Cf-2.1-Iike” de Arabidopsis tha/iana, proteína de resistência a doenças homóloga à Cf-2/Cf-5 de Hordeum vulgare e outras proteínas de resistência de Lycopersicon. Além disso, foi identificada uma ORF de 789 nucleotídios, que codiôca uma proteína de 262 aminoácidos com domínios LRRs, uma das características estruturais da maioria das proteínas de resistência. Um RT-PCR foi feito para detectar transcritos homólogos a A53-09, A75-1O e A45-10, usando-se “primers” que flanqueavam a região de maior similaridade com genes de resistência. Em amostras de RNA extraídas de folhas, raízes e haste foi detectada a presença de transcritos, usando-se os “primers” derivados de ASB-09, o que indicou que A53-09 não é expresso de modo órgão-específico. Os produtos de amplificação presentes nos três órgãos foram seqúenciados e alinhados perfeitamente com a ORF de 789 nucleotídios. Para A75-10, foi detectada a presença de várias bandas, nos três órgãos examinados, indicando que, possivelmente, os “primers” estariam pareando com mais de um transcrito. Para A45-10, não foi detectada a presença de nenhum transcrito nos três órgãos analisados.Item Integração de mapas, mapeamento de QTLS e análise da diversidade genética em soja utilizando marcadores AFLP(Universidade Federal de Viçosa, 1999-05-28) Machado, Marco Antonio; Moreira, Maurílio Alves; http://lattes.cnpq.br/8973702690350658Marcadores moleculares auxiliam no monitoramento de genes e possibilitam avaliar a variabilidade genética em programas de melhoramento. Marcadores AFLP são bastante polimórticos e apropriados para uso em culturas de base genética estreita como a soja. O primeiro objetivo deste trabalho foi a integração de um mapa de AFLP interespecifico de soja do Monsanto Company, EUA, com um mapa de domínio público desenvolvido pela Universidade de Utah, EUA. Este mapa foi gerado com uma população de 223 RILs (linhas recombinantes de autofecundação) do cruzamento de Minsoy X Noir. Esse mesmo mapa possui 468 marcadores (279 RFLP, ióó SSR e 23 clássicos), que cobrem 2.330 cM e contêm QTLs (loci de características quantitativas) identificados. DNA de 88 RILs foram amplificados, utilizando-se a técnica de AFLP, com 41 pares de primers, usados também no mapa da Monsanto. Dos 354 marcadores obtidos, 54 foram polimórticos para o mapa da Monsanto e seviram como pontos de ancoramento para a integração dos dois mapas. Essa integração vai permitir a transferência de QTLs do mapa Minsoy X Noir para o mapa da Monsanto. O segundo objetivo foi a identificação de QTLs para teores de ácidos graxos em soja, utilizando-se marcadores AFLP. Sementes de soja de 357 indivíduos F2 do cruzamento da linhagem de baixo teor de ácido linolênico, BARC-lZ, e a variedade CAC-l foram analisadas quanto ao teor de ácidos graxos (palmítico, estearico, oléico, linolênico e linoléico), por meio de cromatografia gasosa, usando-se um método não-destrutivo. Foram selecionados 89 indivíduos para análise pela técnica de AFLP. Trinta e cinco combinações de primers foram utilizadas, gerando 158 marcadores dominantes e 18 co-dominantes. Foram identificados QTLs para todos os ácidos graxos, sendo que um marcador co-dominante explicou 50% da variação do teor de ácido Iinolênico. Linhas recombinantes de autofecundaçõo (RILs) estao sendo desenvolvidas para esse cruzamento, o que vai permitir realizar estudos mais detalhadas sobre a herança do teor desses acidos. O terceiro, e último, objetivo do presente trabalho foi estudar a variabilidade genética de 263 acessos de soja, sendo 31 Glycine soja, lO Glycine max adaptados e 222 Glycine max nao-adaptados, utilizando-se a técnica de AFLP. Os padrões de AFLP foram utilizados para gerar uma matriz de distâncias genéticas de Nei, que foi empregada na realização de uma analise multivariada. Os resultados confirmaram que a soja cultivada apresenta base genética muito estreita e que existe grande diversidade genética em materiais exóticos, que podem ser aproveitados em programas de melhoramento.Item Capacidade produtiva, adaptabilidade e estabilidade de híbridos de famílias endogâmicas de milho (Zea mays L.), obtidos pelo método dos híbridos crípticos(Universidade Federal de Viçosa, 1999-02-01) Lopes, Maria Teresa Gomes; Viana, José Marcelo Soriano; http://lattes.cnpq.br/9307727443790246Neste trabalho, avaliou-se o comportamento de híbridos de famílias endogâmicas de milho obtidos pelo método dos híbridos crípticos, pelo programa de melhoramento de milho do Setor de Genética do Departamento de Biologia Geral da Universidade Federal de Viçosa (DBG-UFV). Estudou-se o potencial do referido método a partir da análise da capacidade produtiva dos híbridos, avaliada em 26 ensaios. Estes foram ainda caracterizados quanto a seus padrões de adaptabilidade e estabilidade. Nos ensaios conduzidos, nenhum dos cinco híbridos de famílias endogâmicas mais produtivos apresentou produção estatisticamente inferior à das testemunhas comerciais, o que revelou que o método dos híbridos crípticos e potencialmente capaz de permitir a obtenção de híbridos superiores. Depois de obtidos os pares de linhagens superiores, derivadas de famílias endogâmicas selecionadas uma ou mais vezes para capacidade específica de combinação, deve ser adequado afirmar que a continuidade do processo permitirá obter híbridos simples, duplos e triplos com elevada capacidade produtiva. Em relação aos números de híbridos S1 x S1, S2 x S2 e S3 x S3 avaliados, de modo geral, a proporção de híbridos S3 x S3 superiores foi maior que a de híbridos S2 x S2, que foi maior que a de híbridos S1 x S1. Portanto, apesar da redução do índice de prolificidade ao valor 1 impossibilitar a continuidade do processo, em trabalhos que utilizem esse método é aconselhável ao melhorista avaliar híbridos de famílias com grau mais elevado de endogamia. Na análise de adaptabilidade e estabilidade, considerando o método proposto por Eberhart e Russell, foram identificados 15 híbridos com produção acima da média geral, considerados os de maior interesse para dar continuidade ao programa de melhoramento. Entre eles, 53,3% apresentaram adaptabilidade geral e alta estabilidade (84-6, 86-1, 86-19, 86-11, 86-15, 86-21, 86-27 e 86-10). Vinte porcento deles apresentaram adaptação específica a ambientes favoráveis e alta estabilidade (86-22, 85-2 e 84-5). Os hibridos 85-1, 85-3 e 86-2, que apresentaram adaptabilidade geral associada à baixa estabilidade, correspondem também a 20% dos mais produtivos. O último (86-8), correspondendo a 6,7%, apresentou adaptação específica a ambientes favoráveis e baixa estabilidade. Com base na análise e considerando uma modificação do método proposto por Lin e Binns, foram identificados os híbridos 86-22, 86-8, 84-5, 85-2 e 86-19 como os mais adaptados a ambientes favoráveis e os híbridos 86-11, 85-3, 86-27 e 86-2, como os mais adaptados a ambientes desfavoráveis. As etapas seguintes deste programa de melhoramento são extrair linhagens dos pares de famílias selecionadas, obter e avaliar os híbridos.