Efeitos do carvacrol sobre o crescimento de Staphylococcus aureus em queijo Minas frescal

Abstract

O carvacrol, uma substância natural, extraída dos óleos essenciais de orégano (Oreganum vulgare) possui ação antimicrobiana comprovada. Estudos recente tem mostrado a presença de S. aureus em queijos frescos, quando em altas contagens estes microrganismos podem produzir toxinas que causam doenças. Diante disso este estudo buscou avaliar a aplicação do carvacrol no queijo Minas Frescal, tendo como objetivos: a determinação da concentração mínima inibitória (MIC) do carvacrol frente ao S. aureus; Avaliar o efeito do carvacrol sobre o crescimento de S. aureus em queijo Minas Frescal, a diferentes temperaturas e tempo de estocagem; e através da microbiologia preditiva prever a probabilidade de crescimento/não crescimento do microrganismo no produto. Obteve-se a MIC pela técnica da microdiluição em caldo, utilizando microplacas de poliestireno de 96 poços, sendo realizadas a leitura da densidade ótica por 24 h a 600 nm. Após a obtenção da MIC (0,125 uL g-¹) foram escolhidas 4 concentrações (0, MIC/2, MIC e MIC*2) para a aplicação no produto. O produto foi incubado a 7 °C temperatura recomendada para estocagem e a 10, 20 e 30 °C, simulando excesso de temperatura de estocagem. O queijo foi então analisado nos tempos 5, 10 15 e 20 dias, para avaliar a ação antimicrobiana do carvacrol. As análises microbiológicas foram realizadas utilizando plaqueamento em ágar Baird parker pela técnica de microgotas. Foram considerados crescimento quando a contagem foi superior a 0,5 log da quantidade inoculada, caso contrário não crescimento. Aos dados de crescimento foram atribuídos valores binários de O (não crescimento) e 1 (crescimento), estes dados foram usados para construção do modelo, que foi construído através do software Minitab versão1.2. O modelo foi validado através de parâmetros diferentes dos usados na construção do modelo. O carvacrol foi eficiente no controle do S. aureus, reduzindo em até 1,4 ciclos log a contagem bacteriana no queijo. A concentração de carvacrol e a temperatura influenciaram no crescimento de S. aureus no queijo. Combinações de baixas temperaturas e concentração de carvacrol acima da concentração mínima inibitória (0,25uL g-¹) foram eficazes para reduzir a probabilidade de crescimento do microrganismo. E o modelo testado foi capaz de predizer a resposta microbiana em 92,19 % dos ensaios realizados. O modelo probabilístico de regressão logística implementado é uma ferramenta importante na quantificação dos efeitos do carvacrol, tempo e temperatura de estocagem para controle microbiológico de S. aureus em queijos. Assim o carvacrol poderá ser uma alternativa no controle de S.aureus em queijos Mina s Frescal, necessitando de mais estudos

Carvacrol, a natural substance extracted from oregano (Oreganum vulgare) essential oils has a proven antimicrobial action. Recent studi es have shown the presence of S. aureus in fresh cheeses, when at high counts these microorganis ms can produce disease causing toxins. Therefore, this study aimed to evaluate the applicatio n of this compound in Minas Frescal cheese, with the following objectives: the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) ofcarvacrol against S. aureu s; To evaluate the effect of carvacrol on S. aureus growth in Minas Frescal cheese, at diffe rent temperatures and storage time; and through predictive microbiology predict the proba bility of growth / non-growth of the microorganism in the product. The MIC was obtained by the broth microdilution technique using 96-well polystyrene microplates and the optical density was read for 24 h at 600 nm. After obtaining MIC (0.125 uL g-1) 4 concentrat ions were chosen (0, MIC / 2, MIC and MIC * 2) for application to the product. The product was incubated at 7 ºC recommended storage temperature and at 10, 20 and 30 ºC, simulating excess storage temperature. The cheese was then analyzed at 5, 10 15 and 20 days to evaluate the antimicrobial action of carvacrol. Microbiological analyzes were performed using Baird parker agar plating by the microtrop technique. Growth was considered when the coun t was greater than 0.5 log ofthe inoculated amount, otherwise no growth. The growth data were assigned binary values of O (non-growth) and 1 (growth). These data were used to build the model, which was built using Minitab versionl.2 software. Themodel wasvalidated thro ugh different parameters from those used in the model construction. Carvacrol was effective in controlling S. aureus, reducing by up to 1.4 log cycles the bacterial count in cheese. Carvacro l concentration and temperature influenced S. aureus growth in cheese. Combinations of low temperatures and carvacrol concentration above the minimum inhibitory concentration (0.25 HL g-1) were effective in reducing the likelihood of microorganism growth. And the mode l tested was able to predict the microbial response in 92.19% of the assays performed. The probabilistic logistic regression model implemented is an important tool to quant ify the effects of carvacrol, storage time and temperature for microbiological control of S. aureus in cheese. Thus, carvacrol may be an alternative for controlling S.aureus in Minas Fres cal cheeses, requiring further studies