Prospecção fitoquímica, avaliação in vitro de atividades cicatrizante e antibacteriana e desenvolvimento de método bioanalítico para extratos de Strychnos pseudoquina A.St.-Hil. (Loganiaceae)

Abstract

Nativa do Brasil, a espécie Strychnos pseudoquina, conhecida popularmente como quina do campo ou quina cruzeiro, tem sido utilizada na medicina tradicional brasileira como antimalárica, febrífuga, digestiva e cicatrizante. O presente trabalho teve como objetivo esclarecer a composição química dos extratos das cascas e folhas de S. pseudoquina A.St.-Hil., utilizando técnicas de prospecção fitoquímica (CCD e HPLC-PDA), biomonitorar sua capacidade estimulatória de fibroblastos (in vitro), sua atividade antibacteriana e a interação da associação entre o extrato em acetato de etila (EAEC) e a ampicilina contra Pseudomonas fluorescens ATCC 13525 e Staphylococcus aureus ATCC 33591. O extrato seco ativo EAEC apresentou 181,58 mg/g de flavonóides totais, sendo constiutído majoritariamente pelos flavonóides estrichnobiflavona e quercetina-3-O-metil-éter. Foram verificadas atividades proliferativas superiores ao controle positivo (10% Soro Fetal Bovino) para o EAEC (500, 250, 125 e 62,5 mg/mL) e para a quercetina-3-O-metil-éter (10 e 5 mg/mL) no teste de proliferação de fibroblastos. Não foram detectadas atividades proliferativas para os extratos das folhas. A atividade antibacteriana dos extratos das cascas e folhas também demosntrou que o fitocomplexo (flavonoides) encontra-se nas cascas. As bactérias sensíveis (S. aureus e P. fluorescens) foram testadas quanto a concentração inibitória mínima (MIC) (1000 μg/mL do EAEC para ambas) e a utilização simultânea deste extrato com a ampicilina demonstrou ação sinérgica para as duas bactérias (EAEC, 500 μg/mL + ampicilina a 3,6 μg/mL para P. fluorescens e EAEC 125 μg/mL + ampicilina a 7,2 μg/mL para S. aureus). Devido à sensibilidade da bactéria P. fluorescens ao fitocoplexo, foi estabelecida uma metodologia de controle biológico para os extratos das cascas de S. pseudoquina.

Brazilian native, Strychnus pseudoquina, popularly known as quina do campo, quina cruzeiro or quina do sertão, has been used in folk medicine as antimalarical, febrifuge, gastric diseases and wound healing. The present work aimed to clarify the chemical composition and the biological activity of the bark and leaf extracts using a phytochemical prospection (CCD and HPLC-PDA) and a bioguided assay for fibroblast proliferation (in vitro), antibacterial effect and the interaction between the flavonoid enriched fraction (EAEC) and ampicilina against Pseudomonas fluorescens ATCC 13525 and Staphylococcus aureus ATCC 33591. The dryed active extrat EAEC showed 181,58 mg/g of total flavonoids, being majoritly constituted of the flavonoids strychnobiflavone and quercetin-3-O-methyl ether. The in vitro fibroblast proliferation test showed stimulant capacity below the positive control (10% Fetal Bovine Serum) for the EAEC extract (500, 250, 125 and 62,5 mg/mL) and the isolated compound quercetin-3-O-methileter (10 and 5 mg/mL). The antibacterial screening of the bark and leaf extracts also showed that the phytocomplex (flavonoids) are present only in the bark (EAEC, EEDC and EEBC). The minimmum inhibitory concentration (MIC) was obtained for sensible bacteria (S. aureus and P. fluorescens) (1000 μg/mL for both) and the interaction (EAEC and ampicilin) was also observed for both bacteria (EAEC, 500 μg/mL + ampicilin, 3,6 μg/mL for P. fluorescens and EAEC 125 μg/mL + ampicilin, 7,2 μg/mL for S. aureus). Due to the special sensibility of P. fluorescens to the phytocomplex, a biological control technique was established to the S. pseudoquina bark extracts.