Growth regulators, culture media and antibiotics in the in vitro shoot regeneration from mature tissue of citrus cultivars

Abstract

The objective of this study was to evaluate the effects of 6-benzylaminopurine (BAP) and α-naphthaleneacetic acid (NAA) combinations, basal media and beta-lactam antibiotics on in vitro organogenesis from mature stem segments of 'Pêra', 'Valência' and 'Bahia' sweet oranges and 'Cravo' rangpur lime. For induction of shoot regeneration, the segments of the four cultivars were placed on Murashige and Skoog (MS) medium containing the following BAP/NAA concentrations: 0.0/0.0; 0.25/0.0; 0.25/0.25; 0.5/0.0; 0.5/0.5; 1.0/0.0; 2.0/0.0; 2.0/0.25; 2.0/0.5; and 2.0/1.0 mg L-1. In order to test the influence of the culture media on shoot-bud induction, (MS), Murashige and Tucker (MT), and woody plant medium (WPM) formulations were evaluated, associated with the best combination of plant growth regulators obtained in the previous experiment. The influence of four beta-lactam antibiotics (timentin, cefotaxime sodium salt, meropenem trihydrate and augmentin) on shoot regeneration was determined. Better regeneration responses were achieved when internodal segments were cultured onto MS-based medium with 500 mg L-1 cefotaxime with the following BAP/NAA concentrations: 0.5 + 0.25 mg L-1 for 'Cravo', 1.0 + 0.25 mg L-1 for 'Valência' and 'Bahia', and 1.0 + 0.5 mg L-1 for 'Pêra'. Genotype, growth regulators, basal media and beta-lactam antibiotics affect the morphogenetic response in mature tissues of citrus.O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de combinações de 6-benzilaminopurina (BAP) e ácido α-naftalenoacético (NAA), meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos sobre a regeneração in vitro de segmentos internodais de laranja doce ('Pêra', 'Valência' e 'Bahia') e limão 'Cravo'. Para a indução de brotações, os explantes internodais foram cultivados em meio Murashige e Skoog (MS) contendo as seguintes combinações de BAP/ANA: 0,0/0,0; 0,25/0,0; 0,25/0,25; 0,5/0,0; 0,5/0,5; 1,0/0,0; 2,0/0,0; 2,0/0,25; 2,0/0,5; e 1,0/2,0 mg L-1. A fim de testar a influência dos meios de cultura na organogênese, as formulações (MS), Murashige e Tucker (MT) e "woody plant medium" (WPM) foram avaliadas, associadas à melhor combinação de reguladores de crescimento obtida no experimento anterior. Foram utilizados quatro antibióticos beta-lactâmicos (timentin, cefotaxima, trihidrato de meropenem e augmentin), em diferentes concentrações, para avaliar sua influência na regeneração in vitro. As melhores respostas foram obtidas quando os explantes foram cultivados em meio MS com 500 mg L-1 de cefotaxima com as seguintes combinações BAP/ANA: 0,5 + 0,25 mg L-1; para 'Cravo'; 1,0 + 0,25 mg L-1; para 'Valência' e 'Bahia'; e 1,0 + 0,5 mg L-1; para 'Pêra'. Genótipos, meios de cultura e antibióticos beta-lactâmicos afetam a resposta morfogenética de tecidos maduros de citros.