Criopreservação de sêmen canino, utilizando associações de crioprotetores e dois protocolos de descongelamento

Abstract

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da associação de crioprotetores permeáveis e impermeáveis em um mesmo meio diluidor e comparar dois protocolos de descongelamento de sêmen canino. Foram utilizados três machos adultos da raça Labrador do Retrievier, os quais foram submetidos a uma coleta de sêmen semanal durante o período de cinco semanas, totalizando quinze amostras em cada delineamento experimental. Os testes in vitro aplicados às amostras de sêmen foram a avaliação da motilidade progressiva, o vigor espermático, a avaliação de integridade da membrana plasmática e do acrossoma e avaliação da longevidade espermática. O meio diluente base utilizado para as associações de crioprotetores foi o Tris-citrato: (G1) (Tris-citrato modificado/ = 3% Dimetil-formamida + 3% Glicerol); (G2) (Tris-citrato modificado/ = 3% Dimetil-formamida + 3% Trealose) e (G3) (Tris-citrato/ = 4% Glicerol). Quanto ao método de descongelamento do sêmen, foi avaliado um protocolo de descongelamento rápido (75ºC/ 7 e 37ºC/ 1 minuto) e um protocolo de descongelamento lento (37ºC/ 1 minuto). Foi verificada diferença (P<0,01) entre as associações crioprotetoras testadas, de forma que foi apresentada superioridade aos grupos G1 e G3, quando comparado aos resultados inferiores demonstrados pelo G2. Porém, avaliando separadamente cada associação crioprotetora, não houve diferença (P>0,01) ao utilizar distintos protocolos de descongelamento, sendo um rápido e outro lento. Esses resultados indicam que a célula espermática criopreservada pela associação glicerol apresentou os melhores resultados, caracterizando maior eficácia na preservação dos espermatozóides da espécie canina comparado às demais associações testadas.The objective of this work was to evaluate the effect of permeable and unpermeable protocols in the same dilution media and to compare two unfrozen canine semen protocols. Three adults males from Labrador Retrievier breed, were submitted to weekly collection of semen for five weeks, in a total of 15 samples in each experimental design. The in vitro testes applied to the semen samples were evaluation of: the progressive motility, the spermatic vigor, the integrity of plasma and acrosome membrane and the sperm longevity. The base mean diluent utilized for the crioprotectors associations was tris-citrate: (G1) (modified tris-citrate = 3% dimetil-formamide + 3% glycerol); (G2) (modified tris-citrate = 3% dimetilformamide + threalose) and (G3) (tris-citrate = 4% glycerol). For the unfrozen semen, was used a fast unfrozen protocol (75 ºC/ 7 ) and the slow unfrozen protocol (37 ºC/ 1 ). A difference was detected (P<0.01) among the tested associations, and the G1 and G3 associations were superior to the G2 one. But, evaluating each protector association separately, there was no difference (P>0.01) when utilizing the fast and slow unfrozen protocols. These results showed that the glycerol cryopreserved sperm cell showed better results as compared to the others associations used in preserving the canine sperm cells.