Avaliação in vitro de atividades citotóxica, antioxidante e antileishmanial do extrato de Bixa orellana (Bixaceae) contra Leishmania braziliensis

Abstract

As propriedades farmacológicas de Bixa orellana, comumente conhecida como urucum, são investigadas e descritas na literatura e seu potencial terapêutico como cicatrizante, anti- inflamatório, antioxidante, antibacteriano, antifúngico, antiparasitário, dentre outros, é explorado. O presente trabalho avaliou, in vitro, as atividades citotóxica, antioxidante e antileishmanial do extrato de B. orellana, como perspectiva de potencial uso terapêutico contra lesões de Leishmaniose Cutânea (LC), uma enfermidade dermatológica de grande ocorrência no mundo e associada a estigma social. O extrato de B. orellana foi avaliado em ensaios de citotoxicidade de macrófagos RAW 264.7, ensaio de atividade sequestradora do radical livre DPPH∙ e atividade antileishmanial contra formas promastigotas e amastigotas intracelulares de Leishmania braziliensis. Foi avaliada, ainda, a produção de NO, TNF-α e IL- 10 em sobrenadante de cultura de macrófagos infectados e tratados com o extrato. O extrato na concentração de 0,25% e usado em tratamento por 24 horas apresentou baixa citotoxicidade em macrófagos e foi capaz de reduzir em aproximadamente 60% a carga parasitária nessas células, no entanto não apresentou atividade antileishmanial contra formas promastigotas do parasito. Na concentração de 0,25%, o extrato também apresentou atividade antioxidante capaz de inibir em torno de 60% o radical livre DPPH∙. Os resultados sugerem que a redução da infecção in vitro por L. braziliensis possa estar relacionada a um efeito citotóxico do extrato sobre macrófagos e, ou ação direta sobre as formas amastigotas intracelulares e não pela ativação de vias microbicidas dos macrófagos. Essa hipótese é suportada uma vez que não foi detectada produção de NO no sobrenadante de cultura de macrófagos infectados e de ter ocorrido produção não significante da citocina TNF-α por estas células. O extrato de B. orellana avaliado demonstrou potencial terapêutico in vitro que nos leva propor avaliar em modelo de infecção in vivo por L. braziliensis como terapia única ou associada com o tratamento padrão contra LC. Palavras-chave: Bixa orellana, Leishmaniose Cutânea, DPPH, AntileishmanialThe pharmacological properties of Bixa orellana, commonly known as annatto, have been investigated and its therapeutic potential as wound healing, anti-inflammatory, antioxidant, antibacterial, antifungal, and antiparasitic, among others, has been explored. The present work evaluated, in vitro, the cytotoxic, antioxidant, and antileishmanial activity of the extract of B. orellana as a perspective of potential therapeutic use against lesions of Cutaneous Leishmaniasis (CL), a dermatological disease of great occurrence in the world and associated with a social stigma. B. orellana extract was evaluated in RAW 264.7 macrophage cytotoxicity assay, DPPH∙ free radical scavenging activity assay, and antileishmanial activity against promastigotes and amastigotes intracellular strains of Leishmania braziliensis. In addition, the production of NO, TNF-α, and IL-10 in the culture supernatant of infected macrophages treated with the extract was also evaluated. The extract at a concentration of 0.25% used in treatment for 24 hours showed low cytotoxicity in macrophages and was able to reduce the parasite load in these cells by approximately 60%. However, it did not show antileishmanial activity against promastigote forms of the parasite. At a concentration of 0.25%, the extract also showed antioxidant activity capable of inhibiting around 60% of the DPPH∙ free radical. The results suggest that the reduction in vitro infection by L. braziliensis may be related to a cytotoxic effect of the extract on macrophages and, or direct action on intracellular amastigotes. This hypothesis is supported since NO production was not detected in the culture supernatant of infected macrophages and there was a non-significant production of the cytokine TNF-α by these cells. Thus, the evaluated extract of B. orellana demonstrated in vitro therapeutic potential, which leads us to propose evaluating it in a model of in vivo infection by L. braziliensis as therapy alone or associated with the standard treatment against CL. Keywords: Bixa orellana, Cutaneous Leishmaniasis, DPPH, Antileishmanial