Ciências Biológicas e da Saúde
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Item Leishmania infantum chagasi: estudo da atividade enzimática de uma Nucleotídeo Trifosfato Difosfohidrolase-2 (NTPDase-2) e clonagem de uma possível Serine/Arginine Protein Kinase (SRPK).(Universidade Federal de Viçosa, 2019-02-28) Abreu, Emílio Santana de; Vasconcellos, Raphael de Souza; http://lattes.cnpq.br/4408181234461761A leishmaniose é uma doença causada por protozoários do gênero leishmania sendo transmitidas por flebotomíneos. A doença pode se manifestar com lesões na pele e mucosas do indivíduo infectado ou pode atingir órgãos internos (leishmaniose visceral). A Leishmania infantum chagasi é um dos protozoários causadores de leishmaniose visceral com importante manifestação no Brasil. Neste contexto, o estudo de enzimas quinases como alvos de ação de medicamentos proporciona meios racionais para a pesquisa de novas drogas. Neste trabalho foram estudadas duas enzimas, uma apirase, NTPDase-2 e uma quinase SRPK de L. infantum chagasi. O objetivo deste estudo é padronizar a renaturação da LicNTPDase-2 e avaliar a atividade da enzima frente a diferentes nucleotídeos (ADP, UDP, GDP e ATP), verificar melhor atividade frente a diferentes pHs, temperaturas de 25ºC e 37ºC e verificar variações de sua estabilidade utilizando thermal shift. Também foi realizada a clonagem da SRPK de Leihsmania infantum chagasi para a realização de estudos bioquímicos e biológicos. Assim, neste estudo foi possível identificar que os tampões de 3, 4, 5 e 6 apresentaram melhora atividade enzimática, comparado com os tampões 1, 2 e 7, após 24 horas de renaturação de 2 ºC a 8 ºC. Dentre os tampões o tampão 4 apresentou o maior shift. Não ocorreu diferença significativa nos testes realizados a 25ºC e a 37ºC, assim como no teste para avalição de pH. Para as análises de nucleotídeos o UDP, GDP e ADP apresentaram melhora na atividade quando comparados com o ATP. Foi possível realizar a clonagem de LicSRPK predita nas análises de bioinformática em Leishmania infantum chagasi, sendo importante agora a realização de sequenciamento e ampliação de seus estudos.