Navegando por Autor "Davey, Michael Raymond"
Agora exibindo 1 - 4 de 4
- Resultados por Página
- Opções de Ordenação
Item Expressão transitória do gene gus em maracujazeiro (Passiflora giberti N.E. Brown) mediada pelo bombardeamento de partículas(Revista Ceres, 1996-05) Otoni, Wagner Campos; Casali, Vicente Wagner Dias; Power, John Brian; Davey, Michael RaymondO presente trabalho teve como objetivo avaliar a transformação transitória pela expressão do gene da B-glucuronidase (gus ), presente em ambos os plasmídios utilizados, a saber: pEA18 e pJMD67. Agregados globulares embriogênicos de Passiflora giberti N.E. Brown, provenientes do cultivo em meio líquido rico em aminoácidos (AA2), contendo 2,0mg l-1 de 2,4 D, foram utilizados como fontes de explantes no bombardeamento. Os tecidos foram bombardeados com partículas de ouro e de tungstênio, recobertas com DNA plasmidial. A avaliação da atividade para GUS foi baseada na reação histoquímica in situ, sendo quantificado o número de unidades de expressão. Foi observado que a elevada atividade fisiológica das células embriogênicas foi importante na obtenção da expressão do gene da B-glucuronidase. Foram observados níveis de expressão superiores a 45% em relação ao total de explantes "submetidos ao bombardeamento. A expressão do gene gus foi superior em calos bombardeados por microprojéteis constituídos de partículas de ouro,comparativamente às partículas de tungstênio; todavia, foram obtidos níveis de expressão semelhantes em calos bombardeados com os plasmídios pEA18 e pJMD67Item Influência do antibiótico cefotaxima na cultura de protoplastos derivados de mesófilo de Passiflora incarnata L.(Revista Ceres, 1995-09) Otoni, Wagner Campos; Casali, Vicente Wagner Dias; Cecon, Paulo Roberto; José Maria; Power, John Brian; Davey, Michael RaymondO objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do antibiótico cefotaxima na cultura de protoplastos derivados de mesófilo de Passiflora incarnata L. O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do antibiótico cefotaxima nas eficiências inicial (BIP) e final (EFP) de plaqueamento de protoplastos derivados de mesófilo de Passiflora incamata L. Folhas novas, recém-expandidas, de plantas obtidas a partir da germinação de sementes e anteriormente à emissão das gavinhas, foram utilizadas como fonte de explantes. Os protoplastos foram cultivados a uma densidade de plaqueamento de 1,5 x 105 protoplastos ml-1 em meio KM8p e gotas de agarose “SeaPlaque” (FMC, Rockland, USA) a 0,6% (p/v); as seguintes concentrações de cefotaxima foram adicionadas ao meio: 0, 50, 100, 250, 300 e 400 mg.l-1. A presença do antibiótico no meio foi essencial no incremento das eficiências de plaqueamento de protoplastos de P. incamata. Na análise de regressão foi adotado o modelo quadrático, e, em função dos níveis do antibiótico avaliados, observou-se crescente resposta para EIP e EFP, a partir do nível zero, culminando em valores de EIP, de 35,06%, e de EFP, 0,308%, nos pontos de máximo das equações de regressão, com as respectivas concentrações de cefotaxima de 232,76 e 235,41 mgI-1. Regenerantes foram obtidos pelo cultivo dos calos em meio MS suplementado de 0,001 mg.l-1 de NAA e 1,0 mg.l-1 de BAP. Os ramo regenerados foram alongados pela alternância, a cada 30 dias, entre os meios MS suplementado de 1,0 mg.l-l de zeatina e meio MS na ausência de reguladores de crescimento. O enraizamento dos ramos deu-se pela transferência dos ramos alongados para meio MS suplementado de sacarose a 2% (p/v), metade da concentração dos sais e 1,0 mg.l-1 de AIB. Os ramos permaneceram nesse meio durante 12 dias, quando foram transferidos para a fase final de alongamento das raízes, em meio de composição similar, porém na ausência de reguladores de crescimento. As plantas foram transferidas para casa de vegetação e aclimatizadas com sucesso.Item Isolamento de protoplastos de mesofilo de Passiflora suberosa L.: Influência da idade das plantas matrize(Revista Ceres, 1996-03) Otoni, Wagner Carnpos; Casali, Vicente Wagner Dias; Power, John Brian; Davey, Michael RaymondO objetivo deste trabalho foi avaliar a influência da idade da planta no isolamento de protoplastos de mesofilo de Passiflora suberosa L. Os protoplastos foram obtidos de plantas crescidas em condições de casa de vegetação mediante a utilização de uma mistura enzimática constituída dos sais do meio CPW, manitol a 13% ((p/v), Cellulase R-10 a 1,0% (p/v), Macerozyme R-10 a 0,2% (p/v), Driselase a 0,1% (p/v), 5,0 mM de tampão MES, Cefotaxima a 250 mgl-1e PVP-10 a 1% (p/v). A idade da planta teve influência marcante sobre o rendimento e a viabilidade dos protoplastos obtidos. Foi observado decréscimo significativo entre o rendimento e a viabilidade dos protoplastos com o aumento da idade das plantas doadoras de explantesItem Regeneração de plantas de maracujazeiro (Passiflora coccinea Aubl.) a partir de protoplastos derivados de mesófilo(Revista Ceres, 1995-09) Otoni, Wagner Campos; Casali, Vicente Wagner Dias; Cecon, Paulo Roberto; Davey, Michael Raymond; Power, John BrianFolhas novas, recém-expandidas, de plantas de Passiflora coccinea Aubl., obtidas a partir da germinação de sementes e anteriores à emissão das gavinhas, foram utilizadas. como fonte de, explantes para o isolamento de protoplastos. O rendimento e a viabilidade dos , protoplastos variaram em função da mistura enzimática empregada na digestão dos tecidos. Foi observada baixa frequência de organogênese (25 ± 15%) de ramos em calos derivados de protoplastos. Regenerantes foram obtidos, ao final de 90 dias, pelo cultivo dos calos em alternância, a cada 30 dias, entre os meios MS suplementado com 0,001 mg.l-1 de ANA e 1,0 mg.l-1 BAP e MS suplementado com 1,0 mg.l-1 de zeatina, ambos adicionados de sacarose a 3% (p/v) e ágar a 0,7% (p/v). Os ramos regenerados foram alongados pela alternância, a cada 25 dias, entre os meios MS suplementado com 1,0 mg.l-1 de zeatina e MS na ausência de reguladores de crescimento. O enraizamento dos ramos deu-se pela transferência dos ramos alongados para o . meio MS suplementado com sacarose a 2% (p/v), metade da concentração dos sais e 1,0 mg.l-1 de AIB. Os ramos permaneceram nesse meio durante 12 dias, quando foram transferidos para a fase final , de alongamento das raízes em meio de composição similar, porém na ausência de reguladores de crescimento.