Ciências Exatas e Tecnológicas
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Item Identificação de produtos da fermentação por fungos (Monascus ruber e Aspergillus versicolor) e seus efeitos no metabolismo lipídico(Universidade Federal de Viçosa, 2001-02-15) Carvalho, Márcia Rodrigues; Queiroz, José Humberto de; http://lattes.cnpq.br/0568726713111558Os fungos do gênero Monascus são tradicionalmente conhecidos por produzirem corantes utilizados na indústria alimentícia e pela produção da mevinolina, uma substância utilizada na redução do colesterol sérico. Esta substância possui ação competitiva com a enzima hidroximetilglutaril-Coenzima A redutase (HMG-CoA redutase), a qual regula a biossíntese do colesterol. Foram realizados testes in vivo para determinar a atividade biológica do arroz fermentado pelo Monascus ruber. Aliado a este estudo, foi testada outra cepa de fungo identificada freqüentemente como como Aspergillus versicolor, a qual se apresenta contaminante de alimentos. Nesse sentido, foram realizados dois testes biológicos para se determinar a ação hipolipidêmica destes fungos em ratos machos da raça Wistar, com hiperlipidemia induzida por Triton ou por 1% de colesterol mais 0,1% de ácido cólico. Os resultados obtidos nos ensaios biológicos demonstram que o arroz fermentado por M.ruber tende a reduzir os níveis de colesterol total nos animais testados. O estudo dos extratos de Monascus ruber Aspergillus e versicolor por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) não detectou a presença de mevinolina nestes extratos. O fracionamento do extrato de Aspergillus versicolor, em coluna de sílica-gel, permitiu o isolamento de duas novas lactonas, cujas estruturas foram estabelecidas ressonância magnética nuclear (RMN) de H e de por 13 espectroscopia de C, espectroscopia no infravermelho (IV) e espectrometria de massas (EM). Uma das lactonas apresentou potencial como inseticida, com mortalidade de 75% em relação ao controle. Ainda deste extrato foi isolado o peróxido de ergosterol, o qual foi identificado composto pelas tenha mesmas sido técnicas isolado citadas anteriormente anteriormente. em outros Embora meios, não este foi encontrado na literatura relato associado à produção de peróxido de ergosterol por cepas de Aspergillus versicolor.Item Avaliação da técnica de ATP-bioluminescência no controle do procedimento de higienização na indústria de laticínios(Universidade Federal de Viçosa, 2001-10-04) Costa, Patrícia Dolabela; Andrade, Nélio José de; http://lattes.cnpq.br/1726542827143211Foram avaliadas pela técnica de ATP-bioluminescência i) a qualidade microbiológica da água do manancial de captação para tratamento na ETA/UFV, da água de resfriamento de amônia e da água industrial de uso em um laticínio, ii) a adesão de Escherichia coli K12 e de esporos de Bacillus sporothermodurans, em suspensões, contendo cerca de 10 4 e 10 6 UFC/mL, em aço inoxidável e em polietileno de baixa densidade a 37°C e tempo de adesão de 24h. e, iii) o procedimento de higienização em superfícies de caminhão tanque, tanque de resfriamento de leite cru, tanque de equilíbrio do pasteurizador, desnatadeira, tanque de armazenamento de leite pasteurizado e tanque de equilíbrio para empacotamento de leite pasteurizado. Nas águas foram efetuadas, também, as contagens de mesófilos aeróbios, expressos em UFC/mL e coliformes totais, expressos em NMP/100mL. Nas superfícies foram determinados os números de mesófilos aeróbios aderidos, expressos em UFC/cm 2 . Foi utilizado o luminômetro UNILITEX-cel (BIOTRACE), para os testes de determinação de ATP, expressos em Unidades Relativas de Luz (URL), incluindo ATP total e livre. Em relação à água industrial, houve a concordância entre os métodos de bioluminescência e de contagem de mesófilos aeróbios e coliformes totais. As amostras de água de manancial e de resfriamento não apresentaram diferença (p<0,05), pelo teste de Tukey, para as quantidades de ATP total, livre e também para as contagens microbianas. Constataram-se concentrações de ATP microbiano diferentes para essas amostras de água. Os resultados indicam que teste de ATP total é mais recomendado e sugerem que qualidade físico-química da água diminui a medida de luz. A bioluminescência não foi apropriada para avaliar a presença de esporos de B. sporothermodurans e de E. coli nas superfícies avaliadas. A determinação das URL foi afetada pelas condições de adesão da E. coli. Os resultados mostram que tanto a concentração de ATP total e a contagem de mesófilos aeróbios foram diferentes (p<0,05) quando se comparou antes - 9772 URL e 1,20 X10 3 UFC/cm 2 - e após - 2511 URL e 1,10x10 1 UFC/cm 2 - o procedimento de higienização. A bioluminescência considerou 100% das superfícies em condições higiênicas insatisfatórias e contagem em placas apenas detectou 50%, considerando a recomendação da APHA e 28% a recomendação da OMS. Não houve concordância entre bioluminescência e a contagem microbiana na classificação quanto às condições higiênicas das diferentes superfícies. Observou-se grande variação na leitura de URL, sugerindo a necessidade de se efetuar mais de uma análise na superfície avaliada. A técnica de ATP-bioluminescência pode ser usada como indicadora das boas condições de limpeza, não apresentando relação com a contagem microbiana, indicando também a possibilidade de adesão microbiana e formação de biofilmes.Item Efeitos de própolis, antocianina e naringenina em coelhos normais e diabéticos(Universidade Federal de Viçosa, 2001-02-05) Ribeiro, Joselito Nardy; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/5838666226554149A diabete é uma doença crônica que se caracteriza por eliminação freqüente de urina, sede incontrolável, emagrecimento e níveis elevados de triacilgliceróis e glicose no sangue. Neste trabalho, verificaram-se os efeitos da própolis e de flavonóides em coelhos normais e com diabete induzida pela droga aloxano. O experimento foi dividido em três ensaios biológicos. No primeiro, os animais foram submetidos ao tratamento com a própolis em forma de comprimido de 150 mg e com a mistura de flavonóides, em forma de cápsulas, contendo 10 mg de antocianina e 10 mg de naringenina. No segundo ensaio, outros coelhos foram submetidos ao tratamento com própolis em forma de cápsulas de 150 mg e com antocianina também em cápsulas de 20 mg. No terceiro ensaio, verificou-se a possibilidade de efeitos adversos que as substâncias testadas nos dois ensaios anteriores pudessem ocasionar nos metabolismos mineral, protéico, lipídico e de carboidratos de animais sadios. Os resultados do primeiro ensaio indicaram que a aplicação da droga aloxano ocasionou perda de peso corporal e aumento dos níveis de triacilgliceróis e glicose no plasma sangüíneo dos animais. Verificou-se, também, que tanto a própolis quanto a mistura de flavonóides provocaram ganho considerável de peso corporal nos grupos de animais tratados com essas substâncias. Além disso, mesmo que estatisticamente não-significativo, essas substâncias ocasionaram queda visível nos níveis de glicose e triacilgliceróis no sangue dos coelhos. No segundo ensaio, verificou-se que, após a aplicação da droga aloxano, ocorreu aumento dos níveis de triacilgliceróis e glicose no sangue dos animais, bem como perda de peso corporal. Observou-se, também, tendência de tanto a própolis quanto a antocianina proporcionarem certo ganho de peso aos animais. Com relação aos níveis de triacilgliceróis e glicose, constatou-se tendência de queda desses constituintes no sangue dos animais tratados com as referidas substâncias, embora os resultados não fossem significativos do ponto de vista estatístico. Por fim, no terceiro ensaio, verificou-se que, de modo geral, as substâncias testadas nos dois ensaios anteriores não provocaram efeitos adversos consideráveis no metabolismo de coelhos saudáveis.Item Efeito da naringenina, bixina, leites de vaca e cabra e extrato hidrossolúvel de soja sobre o metabolismo lipídico de coelhos(Universidade Federal de Viçosa, 2003-03-10) Rodrigues, Fabiana Carvalho; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/9637419452822220Com o objetivo de avaliar o efeito do flavonóide naringenina e do carotenóide bixina e suas associações com o leite em pó de vaca, cabra e o extrato hidrossolúvel de soja sobre o metabolismo lipídico de coelhos, foram realizados três experimentos com coelhos da raça Nova Zelândia por um período de 31 dias . A hipercolesterolemia foi induzida utilizando-se 0,5% de colesterol e as substâncias testadas e os leites foram misturados na ração. O leite bovino foi fornecido na dose de 20g/dia e o leite caprino e o extrato hidrossolúvel de soja foram fornecidos nas doses de 10g/dia. A naringenina e a bixina foram fornecidas nas doses de 30 e 125 mg/kg de peso corporal, respectivamente. As amostras de sangue foram coletadas pelo plexo venoso retro-orbital utilizando-se capilar e centrifugadas a 7.100 x g. O soro obtido foi utilizado para a determinação de colesterol total, colesterol-HDL, triacilgliceróis e glicose, utilizando-se kits da marca BioMérieux. No experimento utilizando leite de vaca, ao se comparar com o grupo hiperlipidêmico, o grupo tratado com bixina apresentou uma porcentagem de redução nas concentrações de colesterol de 24,52% e 22,53% com 16 e 31 dias, respectivamente. Em relação às concentrações de triacilgliceróis, o melhor resultado foi obtido com o grupo que recebeu leite de vaca + naringenina, onde houve uma redução de 35,08% com 31 dias. Para o colesterol-HDL, os grupos tratados com leite de vaca e leite de vaca + naringenina apresentaram bons resultados, tendo um aumento de 9,59% e 8,37%, respectivamente. Já no experimento utilizando leite de cabra, as duas substâncias (naringenina e bixina) associadas com o leite de cabra reduziram as concentrações de colesterol, sendo o melhor resultado obtido com o grupo leite de cabra + naringenina (20,62% com 16 dias e 16,06% com 31 dias). Em relação às concentrações de triacilgliceróis, o grupo leite de cabra + naringenina apresentou o melhor resultado, tendo uma redução de 10,28% com 16 dias e 23,53% com 31 dias. Para o colesterol-HDL, todos os grupos apresentaram bons resultados, aumentando as concentrações desse parâmetro, tendo destaque o grupo leite de cabra + bixina (56,79% com 16 dias e 40,39% com 31 dias). No experimento realizado utilizando extrato hidrossolúvel de soja, os melhores resultados na redução das concentrações de colesterol e triacilgliceróis foram obtidos com o grupo tratado com extrato hidrossolúvel de soja + bixina, sendo esta redução de 16,04% para colesterol e 15,59% para triacilgliceróis, ambos aos 16 dias. Em relação às concentrações de colesterol–HDL, todos os tratamentos apresentaram bons resultados, sendo que o grupo extrato hidrossolúvel de soja + naringenina teve um aumento de 32,04% com 16 dias, e, o grupo extrato hidrossolúvel de soja + bixina teve um aumento de 58,18% com 31 dias.Item Efeitos hipolipidêmicos e toxicológicos de complexos de rutina com organoestânicos(Universidade Federal de Viçosa, 2001-08-28) Mello, Vanessa Jóia de; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/9437589201689717Dois ensaios biológicos foram realizados com o objetivo de avaliar os efeitos hipolipidêmicos e toxicológicos de complexos do flavonóide rutina com organoestânicos [SnCl2Ph2], [SnClPh3], [SnCl3Ph] e [SnCl4]. Inicialmente promoveu- se a síntese dos complexos obtendo-se os produtos: [SnCl2Ph2(Rut)].H2O, [SnClPh3(Rut)].6H2O, [SnClPh(Rut)].H2O, [SnCl(Rut)].H2O, (SN1, SN2, SN3, SN4, respectivamente). Estes produtos foram caracterizados a partir de análise elementar (CHN), ponto de fusão, espectroscopia no infravermelho, ressonância magnética nuclear de 119 Sn. Em posse dos resultados, realizou-se o primeiro ensaio biológico, com complexos sintetizados. Para fins de comparação e avaliação do efeito hipolipidêmico destas substâncias utilizou-se no mesmo ensaio, o flavonóide rutina isoladamente e a atorvastatina cálcica (presente no medicamento liptor). Estas substancias foram testadas no metabolismo de coelhos da raça Nova Zelândia Branco, com hiperlipidemia induzida por colesterol (0,5%) + ácido cólico (0,1%) administrados na ração dos animais, que receberam as substâncias em estudo encapsuladas, na dose de 5mg/dia. As dosagens foram efetuadas no 1°, 16° e 31° dias de realização do experimento. Todos os complexos foram eficazes na redução do colesterol total, sendo o mais eficiente o complexo do flavonóide rutina com o [SnCl4] ([SnCl(Rut)].H2O), apresentando um resultado bem similar ao expressado pela atorvastatina cálcica. Dentre os compostos o que promoveu maior elevação da lipoproteína colesterol-HDL foi o complexo do flavonóide rutina com o composto [SnClPh3] ([SnClPh3(Rut)].6H2O) aos 15 dias, e o principio ativo atorvastatina cálcica aos 30 dias. A redução da lipoproteína colesterol-LDL foi mais pronunciada também pelo complexo do flavonóide rutina com o composto [SnClPh3] ([SnClPh3(Rut)].6H2O). Os complexos não apresentaram taxas satisfatórias de redução da concentração de triacilgliceróis. Os complexos do flavonóide rutina com os organoestânicos [SnClPh3], ([SnClPh3(Rut)].6H2O) e [SnCl4] ([SnCl(Rut)].H2O) que apresentaram os melhores resultados no primeiro experimento, foram utilizados na dose de 100 mg/dia, no segundo experimento. Este ensaio biológico foi realizado com a finalidade de obter- se a toxicologia aguda destas substâncias. Efetuaram-se dosagens do colesterol total, triacilgliceróis, colesterol-HDL, glicose, proteínas totais, albumina, bilirrubina total, uréia, ácido úrico, fósforo, cálcio, gama glutamil transferase (Gama-GT) e as transaminase glutâmico-piruvica (TGP) e transaminase glutâmico oxaloacética (TGO) no 1°, 16° e 31° dias de realização do experimento. Nesta dosagem estas substâncias não apresentaram efeitos hiperlipidêmicos. As concentrações lipídica sanguínea apresentaram uma elevação considerável. Foram observadas elevações nas concentrações das transaminases glutâmico-piruvica (TGP) e glutâmico oxaloacética (TGO) bem como na concentração de ácido úrico aos 30 dias. Para os outros constituintes não se observou efeito tóxico destas substâncias.Item Efeitos (hipolipidêmicos) de naringenina e chitosan e toxicologia de monascus e rutina sobre o metabolismo em coelhos(Universidade Federal de Viçosa, 2001-02-20) Lopes, Renato Matos; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/5919753308278896O presente trabalho avaliou a ação do chitosan e naringenina em coelhos, por via intraperitoneal, com hiperlipidemia induzida por Triton. No segundo experimento, a hiperlipidemia foi induzida por colesterol e ácido cólico misturados à ração. Neste experimento, as substâncias chitosan, a 0,03%, e naringenina, a 0,006%, foram fornecidas aos coelhos hiperlipidêmicos durante 15 dias. Ao sétimo e décimo quinto dias foram dosados colesterol, colesterol-HDL e triacilgliceróis no soro dos animais. Para o primeiro experimento, os resultados mostraram que o chitosan associado à naringenina mostrou maior percentagem de redução para colesterol e triacilgliceróis, enquanto para colesterol-HDL, o chitosan foi mais efetivo, pois causou menor redução nos níveis deste parâmetro, permitindo que se encontrasse na circulação maior concentração deste. Este resultado é importante, levando em consideração que esta lipoproteína é responsável pelo transporte de colesterol da circulação para o fígado. Para o segundo experimento, os resultados indicaram que a associação chitosan + naringenina reduziu os níveis de colesterol em 15,24% durante os primeiros sete dias e 61,19% no décimo quinto dia. Para colesterol-HDL as variações foram menores, mas para triacilglicerois a redução foi de 45,91% para os primeiros sete dias e de 55,62% para o décimo quinto dia, o que evidencia o efeito sinérgico destas duas substâncias. Também foram testados, em coelhos, rutina nas doses de 20, 40 e 60 mg/animal e monascus nas doses de 40, 80 e 100 mg/animal durante 28 dias ininterruptos em cápsulas via oral para se verificar o potencial toxicológico sobre o metabolismo de proteínas, minerais, lipídeos e glicose. Foram dosados vários constituintes sangüíneos. Os resultados obtidos mostraram pequenas variações nestes parâmetros.Item Efeitos farmacológico, toxicológico e mecanismo de ação dos flavonóides e corantes naturais extraídos do urucum (Bixa orellana L.) no metabolismo lipídico de coelhos(Universidade Federal de Viçosa, 2000-04-19) Lima, Leonardo Ramos Paes de; Oliveira, Tânia Toledo de; http://lattes.cnpq.br/0384513283728541Realizaram-se 2 ensaios biológicos para avaliar a ação farmacológica de flavonóides e corantes naturais, extraídos do urucum (Bixa orellana L.). Inicialmente, avaliaram-se algumas características químicas de sementes dos híbridosm, fruto verde piloso e fruto vermelho, por análises químicas. Foram determinados os teores de proteínas, carboidratos, ácidos digeríveis e gorduras. A bixina foi identificada e quantificada e os flavonóides luteolina e apigenina glicosidados foram identificados por UV, IV, RMN e cromatografia. Em posse dos resultados, montou-se o primeiro ensaio biológico, utilizando-se os flavonóides luteolina e apigenina e o corante bixina a 30 e 95% de pureza. Testaram-se estas substâncias no metabolismo lipídico de coelhos da raça Nova Zelândia, com hiperlipidemia induzida por Triton, que receberam as substâncias em estudo na dose de 0,01mol/kg de peso corporal, por via intraperitoneal, utilizando o propilenoglicol como veículo. Vinte e quatro horas após a aplicação destas substâncias, o sangue foi coletado e analisaram-se os teores de colesterol, colesterol-HDL e triacilgliceróis no soros. Todas as substâncias testadas foram eficazes na redução do colesterol total, sendo a mais eficiente a bixina a 30%. Em relação ao colesterol-HDL, a apigenina foi a substância que mais elevou os seus níveis. Quanto à redução dos triacilgliceróis, o melhor resultado foi obtido com a bixina a 30%, sendo esta a única substância a reduzir os níveis de triacilglicerol. No segundo ensaio biológico foram testadas as substâncias quercetina, rutina, bixina a 95% e norbixina, sendo testadas separadamente e em associações. A hiperlipidemia foi induzida administrando ácido cólico e colesterol na ração diária dos animais. As substâncias foram fornecidas na dose de 0,01 mol/Kg de peso corporal, por via oral, em cápsula, utilizando o talco como veículo. Após 28 dias com o tratamento, foram dosados o colesterol, colesterol-HDL, triacilgliceróis, creatinina, proteínas totais, cálcio, uréia, ácido úrico e as enzimas transaminase glutâmico pirúvico e transaminase glutâmico oxalacético. Todos os tratamentos reduziram o nível de colesterol, sendo que o melhor resultado foi obtido com a bixina. A quercetina foi a que melhor baixou os níveis de triacilgliceróis. O melhor aumento dos níveis de colesterol-HDL foi conseguido com a rutina. O resultado conseguido com os outros constituintes foram analisados para se obter a toxicidade aguda destas substâncias nos organismos dos animais. Em termos gerais, não se observou nenhum efeito tóxico destas substâncias. Em outro experimento, procurou-se caracterizar o efeito das substâncias estudadas sobre a atividade da lipase, variando-se a concentração dos modificadores, sendo que todos eles aumentaram esta atividade. Concluiu-se que as substâncias extraídas do urucum foram eficientes no controle do metabolismo lipídico e que na dose aplicada não apresentaram nenhum teor de toxicidade aguda, sendo que um dos mecanismos para explicar os níveis reduzidos de triacilgliceróis é o aumento da atividade da lipase por essas substâncias.Item Avaliação da qualidade e digestibilidade in vivo da proteína de cultivares de feijão (Phaseolus vulgaris L.)(Universidade Federal de Viçosa, 2000-08-24) Cruz, Geralda Aldina Dias Rodrigues; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; http://lattes.cnpq.br/2804290069100939Vários trabalhos de melhoramento genético têm sido desenvolvidos, obtendo-se variedades com características agronômicas desejáveis. Dentre elas, algumas se destacam por possuirem algumas características desejáveis, merecendo, portanto, mais atenção e aprofundamento nos estudos bioquímicos e nutricionais. Assim, no intuito de avaliar a qualidade da proteína dos cultivares Aporé, Aruã, A774, Carioca, Diamante Negro, Ouro Branco, Ouro Negro, Pérola, RAO 33, Rudá e Vermelho Coimbra, fornecidos pelo Centro Nacional de Pesquisa de Arroz e Feijão da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA CNPAF), localizada em Goiânia-GO, procedeu-se à avaliação biológica em ratos machos recém-desmamados e determinou-se a digestibilidade verdadeira, Protein Efficciency Ratio, Net Protein Ratio e Net Protein Utilization. Determinou-se o teor de proteína, de fibra alimentar total, solúvel e insolúvel e inibidores de tripsina nas amostras. Para caracterização do inibidor de protease utilizou-se o método enzimático, onde foi medido o decréscimo da atividade de tripsina bovina na presença do inibidor. Os resultados obtidos mostram que a digestibilidade verdadeira variou de 84,89 a 93,62%, sendo o maior valor para o cultivar Ouro Branco, não diferindo do padrão (caseína). Os valores obtidos para PER situaram-se entre 1,2 a 2,36, inferiores aos obtidos para a caseína. O cultivar Ouro Branco apresentou valor de PER significativamente superior (P<0,05) aos cultivares analisados. Quanto ao NPR, os valores obtidos foram significativamente menores que o encontrado para a caseína e situaram-se entre 2,53 a 3,49, sendo os cultivares Ouro Branco e Carioca os que apresentaram os maiores valores. Os valores de NPU encontrados variaram de 42,6 a 54,27%, e verificou-se que os cultivares Carioca e Ouro Branco não diferiram da caseína. A presença de inibidores de tripsina não afetaram a digestibilidade protéica e não houve correlação entre as duas características. Os teores de fibra alimentar total, insolúvel e solúvel variaram de 21,04 a 38,21%; 15,83 a 34,65% e 1,85 a 7,06%, respectivamente, constituindo-se boas fontes de fibras. Não houve correlação entre os teores de fibra e a redução da digestibilidade protéica. Verifica-se pelos resultados obtidos que a variedade Ouro Branco apresentou a melhor qualidade nutricional dentre os cultivares analisados e as variedades de maior coloração como a Diamante Negro e Vermelho Coimbra tiveram a sua qualidade protéica reduzida.Item Mapeamento genético do cacaueiro e identificação de QTLs para resistência à vassoura-de-bruxa(Universidade Federal de Viçosa, 1999-10-18) Queiroz, Vagner Tebaldi de; Moreira, Maurilio Alves; http://lattes.cnpq.br/9963384168622230Uma progênie de 82 indivíduos F2, obtida do cruzamento entre Scavina-6 e ICS-1, foi analisada utilizando marcadores moleculares. Por meio das técnicas de RAPD e AFLP, foram amplificados 196 fragmentos polimórficos, que foram distribuídos em 26 grupos de ligação. Estes marcadores cobriram uma distância de recombinação de 1.733 cM, com distância média entre dois marcadores adjacentes de 8,84 cM. Análises de regressão simples e múltipla e mapeamento por intervalo foram utilizados para detectar e mapear regiões genômicas associadas com a resistência à vassoura-de-bruxa. A proporção da variância fenotípica explicada por marcador variou entre 8,4%, para o loco iacacac.261, e 12,7%, para o loco sacgcat.78. Dos seis marcadores associados à resistência à vassoura-de-bruxa a 1% de probabilidade, os marcadores iAE06.950, saggcat.108 e iAB09.464 foram mantidos no modelo de regressão múltipla, utilizando o método de eliminação stepwise. Os três marcadores explicaram juntos 27,8% da variação fenotípica. Através do mapeamento por intervalo, foram identificadas associações significativas a 5% de probabilidade, nos grupos de ligação 01 e 11. No grupo de ligação 01 foram identificados três QTLs, flanqueados pelos marcadores iaagctc.65 - iBB12.1100, iAH18.850 - iBG09.580 e iAC01.475 - iAS19.970. O grupo 11 apresentou dois QTLs altamente significativos (P < 0,01) entre os marcadores saggcat.108 - sAV14.940 e sAV18.590 - sZ04.500. Os marcadores identificados pela análise de regressão múltipla também o foram pelo mapeamento por intervalo, com exceção do marcador iAB09.464, que não se encontra ligado no mapa de ligação construído no presente trabalho.Item Estudos funcionais da proteína S-64 da soja (Glycine max) por meio da inibição anti-senso e superexpressão senso em tabaco (Nicotiana tabacum) transgênico(Universidade Federal de Viçosa, 2000-07-05) Pedra, João Helbert Ferreira; Fontes, Elizabeth Pacheco Batista; http://lattes.cnpq.br/6677568829491716Os processos que regulam a alocação de carbono para os órgãos vegetais e as sementes em desenvolvimento são muito importantes no desenvolvimento das plantas. Na maioria dos vegetais, o nutriente translocado mais importante é a sacarose, e a compreensão da biologia molecular, da bioquímica e da fisiologia de seu transporte é um problema central na biologia vegetal. Recentemente, foi isolado, em um laboratório da Universidade Federal de Viçosa, Viçosa-MG, um cDNA de uma biblioteca de expressão de sementes de soja que codifica um homólogo da proteína de ligação à sacarose (SBP), denominado S-64. Para analisar a função desse homólogo de SBP, tabacos transgênicos foram obtidos, introduzindo-se genes quiméricos que continham a região codificadora do gene s-64, ligado ao promotor 35S-CaMV, na orientação senso ou anti-senso via transformação mediada por Agrobacterium sp. O acúmulo do homólogo de SBP aumentou em tabacos que superexpressaram o gene s-64, assim como a expressão anti-senso do gene s-64 levou ao decréscimo nos níveis da proteína endógena. As plantas anti-senso desenvolveram sintomas característicos de uma inibição do transporte de sacarose à longa distância e apresentaram crescimento e desenvolvimento vegetal reduzidos. Em contraste, as plantas que continham a construção senso revelaram tendência de crescimento mais rápido e aceleração do desenvolvimento floral. O desempenho no desenvolvimento das plantas transgênicas foi correlacionado com a taxa fotossintética, sob condições normais de irradiância. Enquanto a taxa de fotossíntese nas linhagens anti-senso diminuiu, nas linhagens senso ela aumentou. Além disto, tanto a repressão anti-senso quanto a superexpressão senso do homólogo de SBP alteraram o particionamento de carboidratos em folhas maduras. Na geração seguinte, as plantas transgênicas senso e anti-senso revelaram diferentes padrões de expressão do gene s-64. Enquanto nas plantas senso não foi observado aumento no acúmulo da proteína, nas plantas anti-senso uma forte inibição de S-64/SBP persistiu. Além disto, as plantas transgênicas anti-senso R1 tiveram um reduzido crescimento vegetativo e radicular, acompanhado de um florescimento tardio. Seguindo esse padrão, a taxa fotossintética das folhas jovens e maduras diminuiu, o que evidencia uma possível diminuição no carregamento e, ou, descarregamento do floema. Um reduzido peso seco total e radicular, assim como experimentos de enxertia, forneceu evidências de que o gene s-64 está diretamente envolvido no descarregamento do floema. Coletivamente, esses resultados indicam que a proteína S-64 é funcionalmente análoga à proteína de ligação à sacarose e representa um importante componente da via de translocação de sacarose em plantas.