Bioquímica e Biologia Molecular

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    Propriedades físico-químicas de polifenoloxidase de feijão (Phaseolus vulgaris L.)
    (Food Science and Technology, 2001-01) Gomes, Maria Regina Araújo; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; Carneiro, Geraldo Estevam Souza; Barros, Everaldo Gonçalves de; Moreira, Maurílio Alves
    As atividades de polifenoloxidases do feijão (Phaseolus vulgaris L.), cultivares: (Aruã, Aporé, A774, Carioca, Diamante Negro, Ouro Branco, Pérola, RAO 33 e Rudá) foram investigadas sob condições de cinética enzimática. O pH ótimo para o extrato bruto das nove cultivares foi em pH 7,2 utilizando catecol como substrato. Nenhuma atividade PPO foi observada na presença do ácido gálico ou D,L- DOPA.
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    Biochemical properties of soybean leaf lipoxygenases: Presence of soluble and membrane-bound forms
    (Plant Physiology and Biochemistry, 2001-02) Baracat-Pereira, Maria Cristina; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; Barros, Everaldo Gonçalves de; Moreira, Maurílio Alves; Santoro, Marcelo Matos
    Lipoxygenases (EC 1.13.11.12, LOX) extracted from soybean leaves (Glycine max [L.] Merrill cv. IAC-100) at pH 6.5 showed low stability. Given the importance of correlating the biochemical roles with the physiological characteristics of each LOX isoenzyme, this work evaluates biochemical characteristics and stability conditions of these enzymes in order to plan a purification procedure. LOX activity (A234 at pH 6.0) increased four to five times when 0.25 % (v/v) Triton X-100, 1 % (w/v) polyvinylpyrrolidone, and 1 mM phenylmethylsulfonyl fluoride were added to leaf macerates. Fe2+ (1 mM) stabilised LOX (70.3 % of activity recovered after 48 h storage). Ammonium sulphate fractionation (35–65 % saturation) increased specific LOX activity five times and stabilised the enzymes. Two optimum LOX activities were observed at pH 6.0–6.5 and 4.0–5.0, and the greater storage stability was at pH 6.5 (after 24–28 h storage at different pH values). The results suggest the presence of at least two different forms of the enzyme. The forms of LOX that are active at acidic pH are more stable than the ones that are active at neutral pH. These stable forms were extracted in absence of detergents (soluble forms), while the forms of LOX that are active at pH 6.0–6.5 are unstable forms specially extracted in presence of Triton X-100, and possibly correspond to membrane-bound proteins.
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    Lipoxygenases affect protease inhibitor levels in soybean seeds
    (Plant Physiology and Biochemistry, 1999-06) Oliveira, Maria Goreti de Almeida; Carvalho, Willam Lima de; Barros, Everaldo Gonçalves de; Moreira, Maurilio Alves
    No physiological role has been assigned to lipoxygenases (LOX) (linoleate:oxygen oxidoreductase, EC 1.13.11.12) present in soybean seeds. The development of LOX null lines has provided an ideal genetic material to determine possible physiological roles for seed LOX. Genetic elimination of seed LOX was followed by a corresponding decrease in the levels of protease inhibitors in soybean seeds. Participation of LOX in the biosynthetic pathway leading to jasmonates, which activate protease inhibitor genes, has been demonstrated in leaves of several plant species. It is conceivable that LOX has a similar role in the developing seed.
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    Resistência do feijoeiro-comum a quatro raças de Uromyces appendiculatus
    (Revista Ceres, 1999-01) Moreira, Maurílio Alves; Barros, Everaldo Gonçalves de; Paula Jr., Trazilbo José de; Ragagnin, Vilmar Antõnio; Vinhadelli, Wender Santos; Faleiro, Fábio Gelape
    Foram inoculadas 13 variedades de feijoeiro-comum recomendadas para plantio em Minas Gerais e quatro acessos (PI) utilizados no CIAT como fonte de resistência às raças 4, 8, 10 e 11 de Uromyces appendiculatus, fungo causador da ferrugem. Foi avaliada a frequência de infecção (FI) e estimado o tamanho médio das pústulas (TMP). A maioria das variedades recomendadas para Minas Gerais apresentou alta FI para todas as raças. A variedade Ouro Negro destacou-se como a mais resistente, sendo imune a três das quatro raças avaliadas. Com relação às PI, todas foram imunes a pelo menºs uma raça. A PI 181395 destacou-se como a melhor fonte de resistência à ferrugem, sendo imune a todas as raças testadas. A estimativa do TMP foi importante para confirmar e complementar os dados obtidos pela FI. Pôde-se observar que nas variedades que apresentaram maior FI o TMP foi superior a 300 μm de diâmetro.
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    Ligação gênica da resistência à ferrugem e à antracnose na variedade de feijão ouro negro
    (Revista Ceres, 2000-07) Moreira, Maurílio Alves; Ragagnin, Vilmar Antônio; Corrêa, Ronan Xavier; Vinhadelli, Wender Santos; Barros, Everaldo Gonçalves de; Faleiro, Fábio Gelape
    A variedade Ouro Negro tem sido utilizada no Programa de Melhoramento do Feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) da UFV/BIOAGRO/EPAMIG como fonte de genes de resistência à ferrugem e à antracnose. Para melhor entendimento da herança e da organização desses genes de resistência, foi analisada a segregação de 231 plantas RC3F2 com relação à resistência a essas duas doenças. As plantas RC3F2, com aproximadamente 10 dias, foram inoculadas com uma mistura de uredosporos de Uromyces appendiculatus var appendiculatus coletados em diferentes municípios de Minas Gerais Após a avaliação da resistência à ferrugem, as mesmas plantas RC3F2 foram inoculadas com a raça 89 de Colletotrichum lindemuthiamun. A análise dos sintomas evidenciou que tanto a resistência à ferrugem quanto à antracnose são controladas por fatores dominantes únicos. Foi também observado que os genes de resistência à ferrugem e à antracnose presentes Ouro Negro estão ligados entre si. Para melhor entendimento da organização genômica de tais genes, estão sendo realizados, nos laboratórios do BIOAGRO-UFV, trabalhos mais detalhados envolvendo marcadores moleculares e populações segregantes adequadas.
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    Biochemical composition and indigestible oligosaccharides in Phaseolus vulgaris L. seeds
    (Plant Foods for Human Nutrition, 2006-06-20) Fialho, Lílian da Silva; Guimarães, Valéria Monteze; Barros, Everaldo Gonçalves de; Moreira, Maurilio Alves; Dias, Luiz Antônio dos Santos; Oliveira, Maria Goreti de Almeida; José, Inês Chamel; Rezende, Sebastião Tavares de
    Common beans have a high nutritional value, but contain galactooligosaccharides (GO), which cause flatulence and intestinal discomfort in humans. The biochemical composition of ten bean cultivars was determined to select those of high protein and low GO contents. The cultivars varied in carbohydrate (47.02–60.17%), GO (3.12 – 5.71%), protein (22.17–33.50%), lipid (1.13–1.81%), moisture (11.42–12.93%) and ash contents (4.08–5.61%). ‘Mexico 222’ presented the highest α-galactosidase activity. Protein and GO contents were positively correlated. ‘Perry Marrow’ combined high protein and low GO concentrations, indicating it can be used in improvement programs aiming at high-quality cultivars for human consumption.