Proteinograma sérico de tartarugas verdes (Chelonia mydas) sadias e acometidas por fibropapilomatose

Abstract

A tartaruga verde é uma entre as cinco espécies de tartarugas marinhas, que ocorrem no litoral brasileiro, sendo categorizada como “ameaçado” dentro da divisão geral de classificação da International Union for the Conservation of Nature – IUCN. Várias são as causas que contribuem para tal classificação. Com o avanço da conscientização os impactos diretos foram mitigados, porém novos desafios surgiram, dentre eles está a fibropapilomatose. O objetivo deste estudo foi identificar e quantificar o proteinograma sérico de tartarugas verdes (Chelonia mydas) juvenis, de vida livre, sem a presença visível de fibropapilomas e naturalmente acometidas por fibropapilomatose (FP) por meio da eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecilsulfato de sódio (SDS-PAGE). Os animais foram capturados em dois locais distintos, quais sejam, Santa Cruz (Espírito Santo) e na ilha de Coroa Vermelha (Bahia). Para facilitar o entendimento, as comparações foram estratificadas em 7 etapas, a saber: Etapa1 (E1) – Animais sem FP x animais com FP; Etapa 2 (E2) - Animais de CV x animais de SC; Etapa 3 (E3) - Animais com FP em CV x animais com FP em SC; Etapa 4 (E4) - Animais com FP em CV x animais sem FP em CV; Etapa 5 (E5) - Animais com FP em SC x animais sem FP em SC; Etapa 6 (E6) - Animais com diferentes graduações de FP: leve x moderado x grave; Etapa 7 (E7) - Animais com FP x animais doentes sem FP x animais hígidos. Ao analisar a (E2), foram identificadas diferenças estatísticas significativas em 13 das 16 bandas avaliadas (bandas: 2-12;14;16). Quando comparados os animais com FP de CV com os de SC (E3), observou-se que os animais de SC apresentaram diferenças estatísticas significativas em 5 das 16 bandas (7;9;10;13;14). Já, ao comparar animais dentro do mesmo local geográfico (E4 e E5), constatou-se que, das 16 bandas investigadas, os animais com FP de CV exibiram diferenças estatísticas significativas em 5 bandas (1;3;6;7;11), com médias maiores em todas, quando comparado com os animais também de CV, porém sem FP, tal diferença não foi observada em SC (E5). Ao estratificar os animais de acordo com as distintas graduações de FP (E6), foram identificadas diferenças estaticamente significativas em 4 das 16 bandas investigadas (5;6;9;16). Os animais foram ainda comparados quanto ao seu status de saúde (E7), revelando diferenças estatisticamente significativas em 6 bandas. Destas, todas apresentaram médias mais altas no subgrupo “animais doentes com FP”, exceto a banda 14 (Ig Kappa), a qual apresentou maior valor de média no subgrupo “não doente”. A partir do estudo realizado foi possível o fracionamento, a quantificação e a caracterização do proteinograma de tartarugas verdes através da técnica proposta. Foram observadas significativas diferenças entre CV e SC, assim como entre os animais com e sem FP. Não houve uma correlação direta de alguma proteína específica caracterizada no estudo com a ocorrência ou ausência da FP, o que não diminui a importância e o potencial promissor das proteínas estudadas como ferramentas complementares para o estadiamento e a monitoração desta e de outras relações ecológicas. Palavras-chaves: Eletroforese. Proteína de fase aguda. Proteinograma. Inflamação.The green turtle is one of the five species of sea turtles that occur in the Brazilian coast, being categorized as “threatened” within the general classification division of the International Union for the Conservation of Nature – IUCN. Several reasons contribute to this classification. Some direct impacts were alleviated due to the ecological awareness in society. However, new challenges emerged, such as the occurrence of fibropapillomatosis. The objective of this study was to identify and quantify the serum proteinogram of free-living juvenile green turtles (Chelonia mydas) without the visible presence of fibropapillomas and green turtles naturally affected by fibropapillomatosis (FP), using electrophoresis in a polyacrylamide gel containing sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). The animals were captured in two different locations: Santa Cruz (Espírito Santo) and Coroa Vermelha Island (Bahia). To facilitate understanding, the comparisons were divided in 7 stages, namely: Stage 1 (S1) – Animals without FP x animals with FP; Stage 2 (S2) - CV animals x SC animals; Stage 3 (S3) - Animals with FP in CV x animals with FP in SC; Stage 4 (S4) - Animals with FP in CV x animals without FP in CV; Stage 5 (S5) - Animals with FP in SC x animals without FP in SC; Stage 6 (S6) - Animals with different degrees of FP: mild x moderate x severe; Stage 7 (S7) - Animals with FP x sick animals without FP x healthy animals. When analyzing (S2), significant statistical differences were identified in 13 of the 16 bands evaluated (bands: 2-12;14;16). On S3 comparison, it was observed that SC animals showed statistically significant differences in 5 of the 16 bands (7;9;10;13;14). However, when comparing animals within the same geographic location (S4 and S5), it was found that animals with FP in CV exhibited significant statistical differences in 5 bands (1;3;6;7;11) out of 16 bands investigated with higher averages in all, compared to animals without FP in CV. No significant difference was observed in S5. When classifying the animals according to different FP grades (S6), significant differences were identified in 4 of the 16 bands investigated (5;6;9;16). The animals were also compared regarding their health status (S7), revealing significant differences in 6 bands. All of them presented higher mean values in the “sick animals with FP” subgroup, except band 14 (Ig Kappa), which presented a higher mean value in the “non-diseased” subgroup. In this study, it was possible to fractionate, quantify, and characterize the proteinogram of green turtles using the proposed technique. Significant differences were observed between CV and SC, as well as between animals with and without FP. There was no direct correlation between any specific protein characterized in the study with the occurrence of FP or not. This finding does not diminish the importance and promising potential of the studied proteins as complementary tools for staging and monitoring the occurrence of FP and other ecological relationships. Keywords: Electrophoresis. Acute phase protein. Proteinogram. Inflammation.