Isolamento e seleção massal de rizobactérias indutoras de resistência sistêmica à mancha-bacteriana-pequena do tomateiro

Abstract

Quinhentas rizobactérias foram isoladas de amostras de solo de rizosfera e rizoplano de tomateiro, provenientes de cinco localidades, pelo método de diluição em placas. Na primeira fase do trabalho, foram preparadas suspensões bacterianas dos antagonistas e utilizadas, individualmente, para a microbiolização de sementes de tomateiro (Santa Cruz Kada) por embebição durante 24 horas, seguindo-se o plantio em copos plásticos contendo solo não-esterilizado, em casa de vegetação. Para cada tratamento foram utilizadas três repetições. Trinta dias após a semeadura, as plantas foram inoculadas com Pseudomonas syringae pv. tomato; sete dias após a inoculação, procedeu-se à contagem de lesões. Vinte e oito rizobactérias exibiram aparente atividade de indução de resistência sistêmica, dada a separação espacial entre os antagonistas (rizosfera) e o patógeno (filoplano). Na segunda fase, o experimento foi refeito com as 28 rizobactérias que se destacaram no ensaio anterior para confirmação de resultados, porém com maior número de repetições e em dois ensaios. Adicionalmente, foi verificada a capacidade dos isolados em colonizar o sistema radicular de plântulas de tomateiro in vitro, por meio de um bioensaio. Os 28 antagonistas mostraram-se colonizadores do sistema radicular e protegeram as plantas de tomate contra o patógeno desafiante. Destacou-se a rizobactéria BlOlR, que apresentou resultados consistentes em todos os testes.

Five hundred rhizobacteria were isolated from tomato rhizosphere and rhizoplane soil samples collected from five Brazilian regions. Soil sespensions were prepared in serially diluted saline and placed on & general-purpose culture medium. After incubation, individualized colonies were transferred to slants, performing a set of 500 isolates that were stored at 4ºC for further work. In a mass selection protocol, tomato seeds (Santa Cruz Kada) were microbiolized with & cell suspension of every isolate and individually seeded in regular soil in & greenhouse. Thirty days after seeding, seedlings were inoculated with the chosen challenging pathogen Pseudomonas syringae pv. tomato and seven days later the average number of lesions per leaflet was estimated. It was observed that 28 rhizobacteria apparently induced systemic resistance, i. e., the spatial eompartrnentalization of the microbial components of the interaction. The assay was repeated with a larger number of replicates as results were conãrmed. Also, a root colonization bioassay was run with all the isolates. All 28 rhizobacteria showed to be root colonizers according to the chosen bioassay and isolate BlOlR seemed to be the most efficient in protecting tomato plants against the challenging pathogen.