Desenvolvimento de método para determinação de resíduos de pesticidas em folhas desidratadas e infusão de chá verde

Abstract

O chá verde (Camellia sinensis) é uma das bebidas tradicionais mais consumidas devido às suas propriedades medicinais, aroma e sabor. No entanto, sua cultura é frequentemente ameaçada por pragas, doenças e diversas espécies de ervas daninhas, tornando o uso de pesticidas uma necessidade para manter a produtividade. Com o objetivo de controlar a qualidade e proteger a saúde dos consumidores, a União Europeia estabeleceu Limite Máximos de Resíduos (LMR) para os pesticidas nas folhas de chá. No entanto, é importante destacar que o chá verde não é consumido diretamente, mas as suas folhas são submetidas à infusão em água quente. Assim, o objetivo deste estudo foi desenvolver métodos analíticos apropriados para determinar resíduos de pesticidas em folhas de chá verde e em sua infusão, bem como avaliar a transferência desses pesticidas para a infusão. Esse estudo foi dividido em dois capítulos. No primeiro capítulo, a técnica extração sólido-líquido com partição em baixa temperatura (SLE/LTP) foi otimizada e validada para a determinação de resíduos de pirimifós-metílico, flutriafol, ciproconazol e bifentrina em amostras de folhas desidratadas de chá verde, utilizando cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-MS). O método apresentou valores de recuperação de 81 a 111%, coeficiente de variação (CV) < 16% e limite de quantificação (LQ) de 0,050 mg kg-1 para todos os analitos. O método otimizado e validado foi aplicado em amostras de chá verde, sendo detectada a presença da bifentrina em duas amostras em concentrações inferiores ao LMR. O método foi testado também para avaliar a presença de resíduos de pesticidas em outros tipos de chás, sendo detectados resíduos dos pesticidas pirimifós-metílico e ciproconazol em concentrações superiores ao LMR em algumas amostras. No segundo capítulo o método extração líquido-líquido com partição em baixa temperatura (LLE/LTP) foi otimizado e validado para determinação dos pesticidas (pirimifós- metílico, flutriafol, ciproconazol e bifentrina) na infusão de chá verde. O método apresentou porcentagem de recuperação de 86,0 - 102 %, CV inferior a 17,8 e LQ de 0,0125 mg L-1. O método desenvolvido foi aplicado em amostras de infusões de folhas de chá verde não sendo detectados resíduos dos pesticidas investigados nessas amostras. Esse método foi então aplicado para avaliar a taxa de transferência dos pesticidas pirimifós-metílico, ciproconazol e bifentrina das folhas de chá verde para infusão preparada em diferentes temperaturas e tempos. Somente a temperatura foi significativa (p < 0,05). Nas temperaturas de infusão de 100 °C e 80 °C a translocação do ciproconazol para a infusão foi de 65,0% e 50,6%, a do pirimifós-metílico foi de 23,5% e 11,7% e a da bifentrina foi de 3,79% e inferior ao LQ respectivamente. Os métodos SLE/LTP e LLE/LTP otimizados e validados se mostraram adequados para determinação de resíduos de pesticidas em folhas de chá verde e em sua infusão. Os resultados obtidos neste trabalho mostram a importância de se monitorar a presença de resíduos de pesticidas em chás e de se ter no Brasil uma legislação mais específica para o seu consumo diário. Palavras-chave: Camellia sisensis; Preparo de amostra; Resíduos de pesticidas; Cromatografia gasosa; Espectrometria de massas.Green tea (Camellia sinensis) is one of the most traditionally consumed beverages due to its medicinal properties, aroma, and flavor. However, its cultivation is frequently threatened by pests, diseases, and various weed species, making pesticide use necessary to maintain productivity. To control quality and protect consumer health, the European Union has established Maximum Residue Limits (MRLs) for pesticides in tea leaves. It is important to note that green tea is not consumed directly, but its leaves are subjected to infusion in hot water. Therefore, the objective of this study was to develop appropriate analytical methods for determining pesticide residues in green tea leaves and their infusion, as well as to assess the transfer of these pesticides into the infusion. This study was divided into two chapters. In the first chapter, the low-temperature solid-liquid extraction with partitioning (SLE/LTP) technique was optimized and validated for the determination of residues of pirimiphos- methyl, flutriafol, cyproconazole, and bifenthrin in dehydrated green tea leaf samples using gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS). The method showed recovery values ranging from 81% to 111%, a coefficient of variation (CV) < 16%, and a quantification limit (LQ) of 0.050 mg kg⁻¹ for all analytes. The optimized and validated method was applied to green tea samples, detecting bifenthrin in two samples at concentrations below the MRL. The method was also tested to assess pesticide residue presence in other types of tea, where residues of pirimiphos-methyl and cyproconazole were detected at concentrations exceeding the MRL in some samples. In the second chapter, the low-temperature liquid-liquid extraction (LLE/LTP) method was optimized and validated for determining pesticides (pirimiphos- methyl, flutriafol, cyproconazole, and bifenthrin) in green tea infusions. The method demonstrated recovery percentages of 86.0% - 102%, a CV below 17.8, and an LQ of 0.0125 mg L⁻¹. The developed method was applied to green tea infusion samples, and no residues of the investigated pesticides were detected in these samples. This method was then used to evaluate the transfer rate of pirimiphos-methyl, cyproconazole, and bifenthrin from green tea leaves to infusions prepared at different temperatures and times. Only temperature was significant (p < 0.05). At infusion temperatures of 100 °C and 80 °C, the translocation of cyproconazole to the infusion was 65.0% and 50.6%, pirimiphos-methyl was 23.5% and 11.7%, and bifenthrin was 3.79% and below the LQ, respectively. The optimized and validated SLE/LTP and LLE/LTP methods were suitable for determining pesticide residues in green tea leaves and their infusion. The results obtained in this work highlight the importance of monitoring pesticide residues in teas and the need for more specific legislation in Brazil for daily consumption. Keywords: Camellia sisensis; Sample preparation; Pesticide residues; Gas chromatography; Mass spectrometry.