Bioquímica Aplicada
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Item Atividade antibacteriana de extratos brutos, frações e de formulação de Salvia officinalis L. sobre isolados de Staphylococcus aureus causadoras de mastite bovina(Universidade Federal de Viçosa, 2019-02-20) Purgato, Gislaine Aparecida; Pizziolo, Virgínia Ramos; Moreira, Maria Aparecida Escatanburgo; Muñoz, Gaspar Diaz; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/5192450654023095A mastite bovina é uma doença caracterizada pela inflamação do parênquima mamário. A enfermidade é causada principalmente por bactérias, sendo a Staphylococcus aureus a mais comum. Atualmente o protocolo de tratamento é a antibioticoterapia, mas o surgimento de estirpes resistentes faz necessário o emprego de novas estratégias terapêuticas. A Salvia officinalis L. é utilizada na medicina popular como anti-inflamatório, antifúngico, antibacteriano e antioxidante. Baseado na necessidade de um tratamento eficaz para mastite e o potencial farmacológico da sálvia, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antibacteriana dos extratos, frações e de uma formulação de S. officinalis sobre diferentes estirpes de S. aureus isoladas de animais acometidos com mastite bovina. Nesse trabalho, foram testados três extratos brutos de folhas de sálvia e seu óleo essencial sobre 18 cepas de S. aureus. Primeiramente, foi realizado o teste de concentração inibitória mínima (CIM). Em seguida, foi estabelecido o efeito do extrato ativo sobre a formação e a inibição do biofilme bacteriano já formado, assim como sua toxicidade sobre células epiteliais bovinas (MAC-T). Posteriormente, foi realizado um fracionamento biomonitorado do extrato por cromatografia em coluna. Através da cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas foram identificados os compostos responsáveis pela atividade antibacteriana. Os resultados de CIM mostraram o extrato hexânico como o mais ativo, este também foi eficaz para inibição do biofilme e não apresentou alta toxicidade para células MAC-T. O fracionamento biomonitorado demonstrou que os compostos ferruginol e sugiol são os responsáveis pela bioatividade do extrato. A formulação contendo o extrato hexânico de S. officinalis a 1,5 mg/mL foi efetiva para inviabilizar as cepas de S. aureus testadas. Os resultados sugerem que o extrato de S. officinalis seja considerado um promissor fitoterápico para a utilização como agente profilático ou tratamento da mastite bovina.Item Atividade antibacteriana e antibiofilme de óleos essenciais sobre estirpes de Staphylococcus aureus causadoras da mastite bovina(Universidade Federal de Viçosa, 2017-06-30) Albuquerque, Kamylla Rafaella Sena; Moreira, Maria Aparecida Scatamburlo; Pizziolo, Virgínia Ramos; Diaz, Gaspar; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/7509262220479201A mastite bovina é uma doença caracterizada pela inflamação mamária, causada principalmente pelo agente etiológico Staphylococcus aureus. O protocolo de tratamento é a antibioticoterapia, mas a liberação de resíduos no leite e o surgimento de estirpes resistentes tornaram necessário o emprego de novas estratégias. Desta forma, muitos óleos essenciais (OEs) derivados de plantas e seus compostos isolados podem apresentar atividade antibacteriana, tornando-se uma alternativa viável para o tratamento de infeções. O objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antibacteriana e antibiofilme de vinte óleos essenciais de plantas condimentares, puros e incorporados a soluções pós-dipping frente a diferentes estirpes de Staphylococcus aureus isoladas de mastite bovina. Os 20 OEs de plantas condimentares foram investigados quanto a sua atividade antibacteriana através do teste de microdiluição com valores fixos. Na triagem foram utilizadas oito estirpes de S. aureus isoladas de campo, nos demais testes apenas três estirpes. Para os OEs que apresentaram atividade antibacteriana determinou-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM). Foi avaliada a atividade antibacteriana pelo método de diluição em leite para mimetizar o ambiente do úbere. A seguir foram realizados testes de interação, pelo método de checkerboard entre os OEs e o antibiótico cefoperazona, e também a interação entre os OEs combinados. A produção de biofilme na presença dos OEs foi detectada por espectrofotometria. Posteriormente foi analisada a citotoxicidade dos OEs em células alveolares mamária bovinas (MAC-T). Apenas 5 OEs apresentaram atividade antibacteriana, OE de cravo, coentro, canela, tomilho e orégano. O OE mais ativo foi o coentro com CIM de 0,15mg/mL. Os OEs foram eficazes no teste de diluição em leite, com valores de inibição entre 10 mg/mL e 20 mg/mL. Os OEs não apresentaram sinergismo quando combinados ao cefoperazona, no entanto alguns demonstraram interação aditiva. Os OEs de orégano e tomilho apresentaram interação aditiva em todas as estirpes. Todos os óleos inibiram a formação de biofilme em doses inibitórias de CIM e 2CIM, porém em doses CIM/2 e CIM/4 o OE de canela aumentou a produção de biofilme. Nenhum dos OEs apresentou citotoxicidade as células MAC-T, no entanto aumentaram a proliferação destas células, indicando uma possível ação regeneradora tissular. A formulação de pós-dipping contendo coentro, orégano e canela a 1% cada foram efetivas tanto na inibição do biofilme quanto no teste de diluição por caldo. Os resultados sugerem que esses óleos essenciais sejam considerados promissores para o emprego como agentes profiláticos ou como tratamento de mastite bovina.Item Avaliação do efeito cicatrizante da pomada obtida do extrato hexânico de folhas de vanillosmopsis erythropappa schultz – Bip(Universidade Federal de Viçosa, 2019-08-09) Soares Júnior, Duilio Teixeira; Pizziolo, Virginia Ramos; Diaz, Marisa Alves Nogueira; http://lattes.cnpq.br/7154004679156975Este estudo teve como objetivo avaliar o potencial cicatrizante das folhas de do extrato hexânico das folhas de Vanillosmopsis erythropappa schultz – bip. e identificar os principais constituintes por CG/EM. Os extratos das folhas Vanillosmopsis erythropappa schultz – bip de foram testados frente teste de estimulação da proliferação celular in vitro, sendo que o extrato em hexânico apresentou resultado mais significativo comparado ao extrato etanólico. Pela análise do extrato ativo cromatografia gasosa-espectroscopia de massa (CG/EM) foi detectado a presença de compostos importantes para o processo de cicatrização celular, como Lupenona; Lupeol e Friedelan-3-one. A expressão do VEGF nos cinco grupos estudados e verificou que aqueles tratados com a pomada contendo o extrato de V. erythropappa Schultz – Bip apresentaram expressão aumentada em grupos tratados com as pomadas nas concentrações 1% e 3%, acelerando assim o processo de cicatrização. Pela análise do extrato ativo por cromatografia líquida acoplada a espectrômetro de massas (CG – MS) permitiu detectar a presença de dois flavonóides: Apigenina e Luteolina importantes no processo de síntese de colágeno tipo I e III. Ao final do tratamento os grupos controle (G4) e Fitoscar® (G5) tiveram maior quantidade de fibras do tipo III, consideradas imaturas, e os grupos tratados com as pomadas contendo extrato 1% e 5% (G1 e G3, respectivamente) tiveram maior quantidade de fibras do tipo I, consideradas maduras, indicando que tais formulações foram efetivas para a cicatrização das feridas, com G3 apresentando o melhor resultado.