Andrade, Ana Paula de Souza2015-03-262011-03-252015-03-262009-02-19ANDRADE, Ana Paula de Souza. In vitro organogenesis in the pigeon pea (Cajanus cajan (L.) Millsp.). 2009. 84 f. Dissertação (Mestrado em Genética animal; Genética molecular e de microrganismos; Genética quantitativa; Genética vegetal; Me) - Universidade Federal de Viçosa, Viçosa, 2009.http://locus.ufv.br/handle/123456789/4709O presente estudo objetivou avaliar os efeitos dos reguladores de crescimento BAP e TDZ na indução de brotações adventícias de feijão guandu (cultivares "Anão" e "Fava Larga") a partir de embriões zigóticos e segmentos de epicótilo de plântulas germinadas in vitro. Na indução de brotações a partir de eixos embrionários, ao final de 30 dias de cultivo foram avaliados o percentual de calejamento, o número de raízes e brotações formadas em ambas as extremidades (proximal e distal) bem como a presença de contaminação e de explantes sem reposta. A formação de raízes se manteve restrita aos explantes cultivados em meio MSØ e na extremidade proximal. Nos explantes cultivados em meio MS acrescido de citocininas, de maneira geral, independente da concentração de BAP e, ou, TDZ testadas, observou-se intensa formação de calo na extremidade proximal. Em ambos os cultivares o meio de cultura suplementado com a combinação de BAP e TDZ nas concentrações de 4,44 μM e 2,27 μM respectivamente, possibilitou a formação de maior número de brotações por explante na extremidade distal, mas essas apresentaram tamanho reduzido. Apesar de haver formação de menor número de brotações nos explantes cultivados em meios acrescidos de apenas BAP (2,22 μM) ou TDZ (2,27 μM), essas apresentaram folhas mais expandidas e aspecto vigoroso. Na indução de brotações a partir de segmentos de epicótilo obtidos assepticamente de plântulas com 7 dias de idade, avaliou-se ao final de 32 dias de cultivo o número de raízes e de brotações formadas em ambas as extremidades. A intensidade, coloração e textura dos calos foram avaliadas visualmente e descritas de forma geral. Novamente, a formação de raízes foi observada no extremo basal dos explantes cultivados em meio MSØ sendo que, na presença de AgNO3, observou-se a formação de maior número de raízes por explante comparado ao meio controle sem AgNO3. Em ambos os cultivares e em ambas as extremidades dos explantes, o meio acrescido da combinação das duas citocininas (2,22 μM de BAP e 2,27 μM de TDZ) possibilitou a formação de calos visualmente maiores, sendo que na presença de AgNO3 a formação de calo foi menor. As brotações se restringiram ao extremo basal dos explantes cultivados em meio acrescido de citocininas e AgNO3, sendo que esta combinação possibilitou a formação de maior número de brotações. Seções histológicas revelaram a origem adventícia das brotações via organogênese direta nos explantes embrionários e via indireta nos explantes do epicótilo. Conclui-se que a utilização do eixo embrionário, segmentos de epicótilo e das citocininas BAP e TDZ na indução de brotações adventícias de feijão guandu cvs. "Anão" e "Fava Larga" é promissora; a utilização de AgNO3 se faz necessário para a indução de brotações a partir de segmentos de epicótilo; e embora a adição de precursores bem como a mensuração dos níveis de etileno não tenham sido realizados, as respostas obtidas no presente estudo podem estar relacionadas ao efeito deste hormônio. Os resultados obtidos neste trabalho fornecem subsídeos a estudos complementares, necessários para o aperfeiçoamento da eficiência de regeneração in vitro de feijão guandu, bem como das fases de alongamento e aclimatização ex vitro.The present study was carried out to evaluate the effects of the growth regulators BAP and TDZ on the induction of adventicious shoots of the pigeon pea (cultivars "Anão" and "Fava Larga"). So, zygotic embryos and epicotyledonary segments from in vitro-germinated plantlets were used. In the shoot induction from embryonic axes, the following variables were evaluated at the end of 30 days under culture: the percent callus, the number of roots and shoots formed at both ends (proximal and distal), as well as the presence of contamination and explants without response. The formation of roots were restricted to the explants cultured in the MSØ medium and at the proximal end. In the explants cultured in the MS medium added with cytokinins, an intensive callus formation was generally observed at the proximal end. In both cultivars, the culture medium supplemented with combination of BAP and TDZ at concentrations 4.44μM and 2.27μM respectively, made possible the formation of higher shoot numbers by explant at distal end, but they were reducedsized shoots. Although the lower number of shoots in the explants cultured in mediums added with only BAP (2.22μM) or TDZ (2.27μM), they showed more expanded leaves and vigorous aspect. In shoot induction from the epicotyl segments aseptically obtained from plantlets aged 7 days, the number of roots and shoots formed at both ends were evaluated on the 32o day. The intensity, coloration and texture of the callus were visually evaluated and generally described. Again, the root formations were observed at the basal end of the explants cultured in MSØ medium, whereas a higher number of root formation by explant were observed, compared to the control medium without AgNO3. In both cultivars and both ends of the explants, the medium added with combination of two cytokinins (2.22μM BAP and 2.27μM TDZ) made possible the formation of callus that were visually higher, but at the presence of AgNO3 occurred lower callus formation. The shoot were restricted to basal end of the explants cultured in the medium added with cytokinins and AgNO3, and this combination made possible the formation of higher shoot number. Histological sections revealed the adventicious origin of the shoots via direct organogenesis in the embryonic explants, as well as indirect via in the epicotyl explants. According to the results, the following conclusions were drawn: the use of the embryonic axis, epicotyl segments and both BAP and TDZ cytokinins in inducing the adventicious shoots of the pigeon pea (cultivars "Anão" and "Fava Larga") is promising; the use of AgNO3 is necessary to induce the shoots from the epicotyl segments; and although the addition of precursors and the measurement of the ethylene levels have not been accomplished, the responses obtained in this study may be related to the effect of this hormone. Those data will be useful as base for the accomplishment of complementary studies that are targeted to the improvement of the efficiency in the in vitro regeneration of the pigeon pea, as well as the ex vitro elongation and acclimatization phases.application/pdfAcesso AbertoOrganogêneseFeijão guanduOrganogenesisPigeon peaDissertaçãoCNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIA::FITOTECNIA::MELHORAMENTO VEGETAL