Medicina Veterinária
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Item Tratamentos alternativos para endometrite em fêmeas bovinas leiteiras(Universidade Federal de Viçosa, 2023-08-01) Pereira, Danilsy Cornélio; Guimarães, José Domingos; http://lattes.cnpq.br/7050144075248777Os estudos na utilização do plasma rico em plaquetas (PRP) mostraram que as plaquetas atuam no processo de hemostasia, cicatrização de feridas e reepitelização, liberando diversos fatores de crescimentos que estimulam a angiogênese, a mitose celular, a quimiotaxia dos neutrófilos, macrófagos e fibroblastos. O presente estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do tratamento com plasma rico em plaquetas associado ou não a antibióticos e solução fisiológica, todos via intrauterina, em fêmeas bovinas positivas para endometrites pós-parto. A partir dos 21 dias pós-parto foram selecionadas 32 vacas, por meio de exame ultrassonográfico, com presença ou não de liquido no útero, sendo realizado as mensurações do diâmetro uterino e diâmetro dos 1o e 2o maiores folículos e contagem da população folicular do ovário direito e esquerdo. Foi feito lavado uterino de baixo volume com 100 mL de solução fisiológica a 0,9 % de NaCl, e amostras do lavado encaminhado para análises de laboratoriais. Posteriormente foram selecionadas 24 vacas positivas para endometrite pós-parto e oito vacas negativas para endometrite pós-parto, sendo distribuídas em 4 grupos com 8 animais cada, grupo 1: Tratamento com infusão intrauterina com plasma rico em plaquetas e antibiótico (n=8; PRP + ATB); grupo 2: Tratamento com infusão intrauterina com plasma rico em plaquetas (n=8; PRP); grupo 3: Tratamento com lavado intrauterino com solução fisiológica a 0,9 % de NaCl (n=8; controle positivo) e grupo 4: sem tratamento (n=8; controle negativo). O preparo do PRP foi de forma autóloga, por punção da veia jugular. Após a infusão dos tratamentos, de acordo com os respectivos grupos, foi aguardado nove dias e realizado novamente as avaliações ginecológicas e coletas de amostras para análises laboratoriais. Houve diferença (p<0,05), no grupo 3 e 4 observando a idade da categoria pluripara e primípara. Após o tratamento se observou na avaliação macroscópica do fluido uterino, melhora nos grupos 1 e 3 de 87,5 % e no grupo 2, melhora de 75 %. Na primeira avaliação da contagem do percentual de polimorfonucleares (% PMN) houve diferença (p<0,05) entre os grupos com e sem endometrite, e após o tratamento, na segunda avaliação, não houve diferença (p>0,05) entre os grupos, constatando a eficiência nos tratamentos. Comparando o % PMN nos animais com e sem infecção uterina nos parâmetros de idade, ordem de parto, escore de condição corporal, produção de leite e diâmetro uterino, não foi verificado diferença (p>0,05) entre os valores obtidos nos diferentes grupos de tratamento. No exame microbiológico, as bactérias mais frequentes foram Escherichia coli, Trueperella pyogenes e Klebsiella pneumoniae, não havendo diferença (p>0,05) entre os grupos estudados. Na atividade folicular se notou que na primeira e segunda avalição não houve diferença entre os diâmetros do 1° e 2° maiores folículos, totais de folículos, tanto no ovário direito como no ovário esquerdo (p>0,05). Diante do exposto, o plasma rico em plaquetas (PRP) se mostra uma excelente alternativa para tratamento em vacas com endometrite pós-parto, em detrimento aos tratamentos convencionais. Palavras-chave: Bovinos, infecção uterina e plasma rico em plaquetas.Item Padronização de ensaios imunoenzimáticos (ELISA) para detecção de anticorpos anti-eCG em ratas(Universidade Federal de Viçosa, 2022-08-08) Ferraz Junior, Osmar Dias; Freitas, Bruna Waddington de; http://lattes.cnpq.br/9685624929535085A potência biológica da gonadotrofina coriônica equina (eCG) é estimada, sob condições controladas, a partir do seu efeito sobre a massa dos ovários de ratas imaturas mediante a comparação com o efeito de um agente padrão e com um grupo controle. O aumento de massa ovariana mediante uso da eCG ocorre devido à superovulação induzida em função do efeito agonista da molécula, já que essa apresenta reconhecida capacidade de se ligar aos receptores de hormônio luteinizante (LH) e hormônio folículo estimulante (FSH). O objetivo do presente estudo foi a padronização de uma concentração ótima do formulado de eCG (Padrão internacional PMSG – NZY02) em diferentes concentrações do teste de imunodiagnóstico ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) para a detecção da produção de anticorpos anti-eCG em ratas imaturas submetidas a protocolos de superovulação. Foram utilizadas 80 ratas (Rattus norvegicus), com diferença de peso entre os animais de no máximo 10 g, que foram distribuídos de forma aleatória em 4 tipos de tratamento (inoculação do formulado padrão internacional PMSG 11,57 UI/mL, 17,34 UI/mL, 26 UI/mL e solução salina. O sangue dos animais foi colhido nos momentos D5, D21 e D28 após a primeira inoculação (D0) e os ovários foram coletados para pesagem nos momentos D5 e D28. O ensaio experimental foi conduzido no Biotério da empresa Ourofino, localizado no Centro Pesquisa Veterinária (CPV), na cidade de Guatapará – SP. Como resultado, os ensaios de padronização do teste ELISA apresentaram elevada sensibilidade na diluição do antígeno em 1/100000 e nas diluições de soro dos animais em 1/100, 1/200 e 1/400. Além disso, foi detectada elevada concentração de anticorpos anti- eCG nos momentos D21 e D28 nas concentrações 11,57 UI/mL, 17,34 UI/mL e 26 UI/mL. A análise realizada no momento D5 não apresentou diferença significativa quando comparado ao grupo controle nas concentrações 11,57 UI/mL, 17,34 UI/mL e 26 UI/mL, nas diluições do soro entre 1/100 e 1/6400. Por fim, os animais tratados com o padrão PMSG tanto no momento D5 quanto no momento D28, apresentaram aumento de peso de ovário de forma significativa quando comparado ao grupo controle. Palavras-chave: Gonadotrofina. eCG. ELISA.Item Efeito do Bovine alphaherpesvirus 1 no desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro naturalmente e artificialmente infectados(Universidade Federal de Viçosa, 2023-02-10) Alves, Saullo Vinícius Pereira; Guimarães, José Domingos; http://lattes.cnpq.br/6967681112024627O bovine alphaherpesvirus 1 (BHV1]) é um agente que encontra-se amplamente disseminado nos rebanhos bovinos de corte e leite no Brasil e no mundo. Sua reconhecida capacidade de transmissão por meio das biotécnicas reprodutivas de manipulação das células germinativas masculinas e femininas, como a produção in vitro de embriões, atrai atenção especial tendo em vista a vasta e crescente difusão dessa técnica na bovinocultura. Essa infecção viral é responsável por prejuízos à pecuária mundial que estão relacionados principalmente aos aspectos reprodutivos. Esse estudo, dividido em dois capítulos, teve por objetivo avaliar os efeitos do BHVI sobre o desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro em modelo de infecção natural e artificial. Além disso, analisou-se também a expressão de transcritos relacionados à apoptose celular, estresse oxidativo, remodelamento gênico e desenvolvimento embrionário, bem como investigou-se a presença e localização viral nos embriões produzidos. Para os procedimentos experimentais, foram coletados sangue e ovários de fêmeas bovinas provindas de rebanhos sabidamente sem histórico de vacinação contra o BHV1. O capítulo I abrangeu o estudo de ovócitos de doadoras não vacinadas mas naturalmente infectadas. Já no capítulo II, ovócitos de animais soronegativos para o BHV1 foram artificialmente expostos ao vírus em diferentes etapas: (1) durante a etapa de maturação (2) fecundação e (3) cultivo, além do (4) grupo controle. No capítulo I, menor taxa de produção de embriões viáveis (13,66 %) foi observado no grupo de doadoras soropositivas (P<0,05) quando comparado com a obtida em doadoras soronegativas (21,27 %). Embriões oriundos de animais soropositivos, anda que considerados viáveis, tiveram maior expressão da caspase 2, gene envolvido no processo de apoptose. Diferença significante também foi observada para taxa de produção de embriões inviáveis, sendo menor no grupo de doadoras soronegativas (9,52 %). No teste de imunofluorescência, não foram identificadas partículas de BHVI em embriões de doadoras soronegativas, mas em 7/31 (22,58 Y%) dos embriões de doadoras soropositivas foi identificado o BHVI. No capítulo II, verificou-se redução (P<0,05) na taxa de clivagem do grupo 1 quando comparado ao grupo controle. O grupo de infecção durante o cultivo (3) foi o mais afetado quanto as taxas de produção de embriões viáveis e inviáveis (9,84 e 45,35 %) comparado ao grupo controle (57,14 e 9,30 %). A infecção artificial pelo BHV1 ocasionou também efeitos (P<0,05) no aumento da expressão dos genes APAFI e CASP2, envolvidos no processo de apoptose celular, e dos genes DNMT3B, GJAI E FGF9 relacionados ao remodelamento gênico e desenvolvimento embrionário. Diante disso, conclui-se que o BHV1 foi capaz de afetar negativamente o desenvolvimento in vitro de ovócitos e embriões tanto nas condições de infecção in vitro e especialmente em condições naturais de infecção, elucidando o menor desempenho reprodutivo observado desses animais. Palavras-chave: Apoptose. Blastocisto. Cultivo in vitro. Imunofluorescência. Vírus.Item Tratamentos alternativos aos convencionais com solução fisiológica ozonizada em fêmeas bovinas lactantes com endometrite clínica puerperal(Universidade Federal de Viçosa, 2023-02-27) Campos Júnior, Leonardo José; Guimarães, José Domingos; http://lattes.cnpq.br/3664572930500798A ozonioterapia é uma técnica que se baseia na utilização do ozônio como agente terapêutico, para infecções fúngicas, bacterianas e virais. Levando em consideração animais de produção, a terapêutica enfrenta dois grandes desafios: a resistência a antimicrobianos e o elevado período de carência para os resíduos desses fármacos nos produtos de origem animal. Buscam-se, diante desses obstáculos, tratamentos alternativos, sendo um deles a solução fisiológica ozonizada. No presente estudo, foram randomizados 67 animais, de 3 fazendas distintas, positivos para endometrite, em 5 grupos: Tratados com lavado uterino com solução fisiológica a 0,9 % NaCl (SF; n=15), tratados com lavado uterino com solução fisiológica ozonizada (SFOz; n=13), tratados com lavado uterino com solução fisiológica ozonizada e infusão uterina de cloridrato de oxitetraciclina (SFOz+ATBi; n=13), tratados com lavado uterino com solução fisiológica e infusão uterina de cloridrato de oxitetraciclina (SF+ATBi; n=13) e, por fim, tratados exclusivamente infusão uterina de cloridrato de oxitetraciclina (ATBi; n=13). Imediatamente após o tratamento, as vacas foram submetidas ao protocolo de inseminação artificial em tempo fixo (IATF). O tratamento com SFOz e SFOz+ATBi não apresentou diferenças (P>0,05) em relação à taxa de concepção e a taxa de animais curados, quando comparados com os outros tratamentos convencionais; já a SF se mostrou menos eficaz em relação a taxa de animais recuperados, quando comparado com o ATBi (P<0,05). Já a taxa de concepção ao final das 3 inseminações consecutivas ao tratamento foi diferente (P<0,05), onde a fazenda B foi mais eficiente que a fazenda A e C. Já na cura clínica final, foi mais eficiente na fazenda A e B em relação a fazenda C. Houve correlação quanto à classificação ultrassonográfica em cruzes com o padrão ouro de diagnóstico, a percentagem de polimorfonucleares no exame citológico do útero (r=0,50). Em conclusão, o tratamento com solução fisiológica ozonizada se apresentou como uma boa alternativa ao tratamento para endometrite, mostrando eficácia semelhante aos tratamentos convencionais, podendo ser empregado em substituição aos antibióticos. Entretanto, o uso da solução fisiológica não associada ao uso de antibióticos ou soluções oxidativas pode apresentar baixa eficácia no tratamento de endometrite. Além disso, o manejo no qual os rebanhos são submetidos influência de forma significante na resposta ao tratamento. Palavras-chave: Bovinocultura de leite. Metrite. Ozonioterapia.Item Uso de antioxidantes na produção in vitro de embriões bovinos: taxa de conversão e sobrevivência embrionária(Universidade Federal de Viçosa, 2023-02-28) Quintão, Maria Angélica Valente; Guimarães, José DomingosAdição de antioxidantes ao meio de maturação e de cultivo de embriões indica que os mesmos contribuem de forma benéfica nas taxas de produção de embriões e sobrevivência dos mesmos aos métodos convencionais de criopreservação. Na tentativa de melhorar as taxas de produção e sobrevivência à criopreservação, vitrificação e congelamento lento, os antioxidantes Vitamina C e o Ácido Hialurônico foram adicionados ao meio de maturação e de cultivo in vitro de embriões individualmente ou associados. No Experimento 1: avaliação do efeito da adição de vitamina C, de ácido hialurônico e de vitamina C associada ao ácido hialurônico sobre a produção e qualidade de embriões (taxa de conversão) produzidos in vitro. Não houve diferença na taxa de conversão ou total de embriões produzidos do grupo controle (meio sem adição de antioxidante) com os grupos de tratamentos (P>0,05). No Experimento 2: avaliar o efeito dos métodos de congelamento lento e da vitrificação sobre a viabilidade (taxa de sobrevivência) de embriões cultivados em meios de maturação e cultivo, suplementados com antioxidantes nos diferentes grupos experimentais. Houve diferença na sobrevivência dos embriões vitrificados após aquecimento dos embriões por 48 horas de incubação em estufa com 5 % de CO2 a 38,5 0 C, mas até 24 horas após o aquecimento, a taxa de sobrevivência embrionária não se mostrou diferente entre os valores obtidos nos diferentes tratamentos (P>0,05). que a adição dos antioxidantes ácido hialurônico (0,5 mg/mL) e vitamina C (50 μg/mL), individualmente ou associados não influencia a produção in vitro total de embriões, porém, se mostram relacionados a maior quantidade de embriões nos estádios de desenvolvimento de blastocistos expandidos, blastocistos em eclosão e blastocistos eclodidos; De acordo com a metodologias empregadas para criopreservação de embriões, a vitrificação apresenta vantagens ao congelamento lento; A taxa de sobrevivência dos embriões pós- descongelamento não é influenciada pela adição de antioxidantes no meio de maturação e de cultivo de embriões submetidos ao método de congelamento lento; Houve diferença significativa no grupo de embriões produzidos em meios de maturação e cultivo com adição de ácido hialurônico, na taxa de sobrevivência dos embriões criopreservados pelo método de vitrificação. Palavras-chave: PIVE. Criopreservação. Antioxidantes. ROS. Viabilidade embrionária.Item Efeitos da hCG administrada por diferentes vias e dias do ciclo estral sobre a eficiência reprodutiva de cabras leiteiras(Universidade Federal de Viçosa, 2022-12-12) Rodrigues, Juliana Nascimento Duarte; Fonseca, Jeferson Ferreira da; http://lattes.cnpq.br/6039440427012004A Gonadotrofina Coriônica humana (hCG) pode ser utilizada em diversos momentos do ciclo estral de caprinos, com finalidade de melhorar parâmetros reprodutivos. Este estudo objetivou avaliar os efeitos da hCG administrada em diferentes momentos do ciclo e por diferentes vias sobre parâmetros reprodutivos de cabras leiteiras. O primeiro capítulo objetivou avaliar os efeitos da hCG administrada 7 dias após o início do estro sincronizado nos corpos lúteos (CL) originais (oCL) e nos CL acessórios (aCL), bem como nas concentrações plasmáticas de P4 e na fertilidade em cabras leiteiras inseminadas artificialmente durante a estação não reprodutiva. O tratamento resultou na formação de aCL e teve um efeito hipertrófico no CL existente (ovulatório), além de elevar (P<0,05) as concentrações plasmáticas de P4 e a taxa de gestação em 22.5%. O segundo capítulo objetivou avaliar se a hCG administrada por via intramuscular (hCG i.m.) ou intravaginal (hCG i.vag.) pode ser detectada por um teste rápido de β- hCG em amostras de plasma sanguíneo, e documentar os efeitos ovarianos da hCG administrada por ambas as vias no momento da inseminação artificial (IA) em cabras. A hCG pode ser consistentemente detectada em amostras de sangue usando o teste rápido de β-hCG apenas no grupo hCGi.m. e não houve diferenças (P>0,05) na taxa média de prenhez, concentrações circulantes de P4 e vários parâmetros lúteos estudados entre Controle, hCG i.m. e hCG i.vag . O terceiro capítulo objetivou foi avaliar os efeitos da administração de hCG nos dias 5 ou 7 após a observação do estro sobre os oCL e aCL, além da concentração plasmática de P4 e taxa de prenhez de cabras leiteiras na estação não reprodutiva. A hCG promoveu o crescimento dos oCL (P<0,05), induziu a formação de aCL, aumentou a concentração de P4 (P<0,05) e apresentou resultados semelhantes entre os grupos que receberam hCG, sendo o uso no sétimo dia mais eficaz na indução de aCL que no quinto dia. O quarto capítulo avaliou o efeito da hCG i.vag. administrada no momento da IA sobre parâmetros ovulatórios, dinâmica e vascularização luteal, concentrações circulantes de P4 e taxa de gestação de cabras na estação reprodutiva. O tratamento não alterou os parâmetros ovulatórios, não impediu a regressão luteal precoce, não aumentou a concentração P4, mas foi capaz de aumentar a área e vascularização luteal (P<0,05) e elevar a taxa de concepção em 13.1% (P<0,05). O quinto capítulo avaliou o efeito da hCG i.m. ou i.vag. no sétimo dia após a observação do estro oCL e aCL e a concentração de P4 em cabras leiteiras induzidas ao estro pelo protocolo de luz artificial. A hCG administrada por via intravaginal no sétimo dia após a observação do estro teve um efeito luteotrófico limitado e não aumentou a concentração de P4 em cabras leiteiras induzidas ao estro pelo protocolo de luz artificial. Palavras-chave: hCG. Corpo lúteo original. Corpo lúteo acessório. Progesterona.Item Association of sperm oxidative stress, proteomics and fatty acid profiles in nellore bulls at sexual rest(Universidade Federal de Viçosa, 2023-03-31) Ramírez López, Camilo José; Guimarães, Simone Eliza Facioni; http://lattes.cnpq.br/2019925307607771Association of sperm oxidative stress, proteomics and fatty acid profiles in nellore bulls at sexual rest. Adviser: Simone Eliza Facioni Guimarães. This study was carried out with the objective of determining the effect of sexual rest on the oxidative status of spermatozoa from adult Nellore bulls and its effect on the fatty acid composition and protein profile. Six bulls were used, which were submitted to Breeding Soundness Evaluation and consecutive semen collection by the electroejaculation method. For each semen collection, the physical and morphological characteristics of the ejaculates were evaluated using conventional optical microscopy and phase contrast microscopy. After analyzing the semen qualitative parameters, the first and last ejaculate of each were centrifuged to separate the spermatozoa from the seminal plasma. From sperm aliquots, the enzymatic activity of Super Oxido Dismutase, Catalase and Glutathione S-Transferase was determined by colorimetric methods. The markers of lipid peroxidation, malondialdehyde and nitric oxide were also determined. Using gas chromatography, the fatty acids of sperm from the first and last ejaculate were identified. For proteomic analysis, total sperm proteins were extracted and precipitated in a 4% CHAPS solution, then quantified by the Bradford method and subsequently analyzed by monodimensional short-run electrophoresis and mass spectrometry (LC-MS/MS). Proteins were identified using PEAKS software version 7.0. Proteins were functionally classified by the RPSBLAST tool of BLAST version 2.13.0 into categories from the KOG database. For the label-free quantitative proteomics analysis, proteins identified in at least three technical replicates of each group with a fold-change greater than 1.5 times were included. Data were analyzed using GraphPad Prisma software version 9.1. Four semen collections were necessary so that the bulls at sexual rest presented sperm parameters compatible with reproductive fitness. Differences (p<0.05) were observed between all physical and morphological characteristics of the first and last ejaculate. A total of 974 proteins were identified, of which 735 were common between the two groups and 123 and 116 proteins were unique to spermatozoa from the first and last ejaculate, respectively. Functional classification analysis revealed that KOG categories with the highest number of classified proteins were Posttranslational modification, protein turnover, chaperones and Cytoskeleton and Signal transduction mechanisms. The protein abundance profile showed that 6 proteins were differentially abundant in spermatozoa from the first ejaculate and 30 proteins weredifferentially abundant in spermatozoa from the last ejaculate. In addition, gas chromatography analysis allowed the identification of 19 fatty acids, 47.3% of the saturated type and 52.7% of the unsaturated type. The C12:0 and C18:0 fatty acids showed difference between the two groups, being more abundant in the spermatozoa of the last ejaculate. The results indicate that oxidative stress may be related to sperm characteristics displayed by bulls at sexual rest, since the accumulation of by-products of lipid peroxidation can cause alterations in the metabolic pathways used by spermatozoa to generate energy used for motility and alter fluidity. of the membrane causing sperm abnormalities. Keywords: Bovine. Semen. Antioxidants. Lipids. Proteins.Item Predictors of success in the breeding soundness evaluation and infertility in bulls(Universidade Federal de Viçosa, 2022-08-26) Diaz Miranda, Edgar Andres; Guimarães, Jose Domingos; http://lattes.cnpq.br/5205157254175928Bull fertility is critical for the profitability and sustainability of the cattle industry. To date, the Breeding soundness evaluation (BSE) is the best methodology to estimate the reproductive potential of future bulls. However, the guidelines for the BSE differ between practitioners and societies, perhaps due to a lack in research in this area. Therefore, our first study hypothesized that by the implementation and use of strict BSE guidelines the number of approved Nellore bulls and their reproductive quality would increase overtime. Furthermore, our second study hypothesized that bulls born early in the calving season are more likely to be approved in their first BSE when compared to males calved later. To evaluate these two hypotheses, records of 20 years and 46,566 BSE were used in two separate analyses including a multivariate logistic regression to measure the effect of the year and farm, and to predict the probability of approval in Nellore young bulls at their first BSE according to their dams calving date. Bulls were classified as approved (satisfactory potential breeders and qualified for natural breeding service) and not approved (deferred and unsatisfactory potential breeders). Overall, there was no improvement in the percentage of approved bulls. However, there was an increase in the number of bulls approved in the first BSE and an increase in the percentage of bulls classified as satisfactory potential breeders (P-value <0.05), which means that the quality of the bulls improved over time. On the other hand, it was demonstrated that the calving date affected the probability of approval at the first BSE. Hence, bulls born on day 0 of the calving season had 1.26 more chances to be approved at the first BSE than bulls born 21 days later. In our studies, 53% of the bulls were not approved due to poor sperm quality, specifically abnormal sperm morphology. Bull ejaculates with the aplastic midpiece defect (AMD) have poor motility and fertility and it’s related to have a putative genetic origin. Therefore, our third study aimed to understand the origin and factors contributing to the abnormal sperm production of the AMD in Dairy Gyr bulls. Six Dairy Gyr Bulls (three control bulls and three bulls with AMD) obtained from the same farm and management were castrated to conduct a sperm morphofunctional and proteomic study and evaluate the redox state of reproductive tissues. The morphological analysis demonstrated that the AMD is a consequence of defective spermiogenesis. Control bulls also produced a high percentage of AMD but have an effective mechanism of removal of the defective sperm prior to epididymal transit. This mechanism generates mild oxidative stress in the testis and caput of the epididymis (measured as MDA and CAT; P-value <0.05); however, the redox state was reestablished in the corpus and cauda of the epididymis. Furthermore, qualitative and quantitative proteomic analysis showed that the sperm maturation of the bulls with the AMD should be deficient once they had differences in protein expression and a poor enrichment of critical pathways for sperm fertility. Finally, our last study hypothesized that binder of sperm (BSP) proteins could be used as a potential biomarker of defective sperm. Therefore, we characterized the binding properties and abundance of the BSP proteins after discontinuous gradient centrifugation and found that; in the supernatant fractions, there was an increase of BSP proteins abundance when compared to the sperm pellet fractions (P- value <0.05). In the sperm pellet fractions, BSP1 and BSP3 bound predominately to the acrosomal region of the sperm head, whereas BSP5 had a high affinity for the midpiece. Furthermore, high BSP proteins abundance was found to be correlated with acrosome and membrane damage induced by permeabilization. Therefore, the abundance of BSP proteins could be used as biomarker of defective sperm or sperm with compromise function. Our results allowed us to complement the knowledge on bull fertility, from the basic but functionally BSE to biomarkers for defective sperm specially on Bos indicus cattle. Keywords: Bull fertility. Sperm morphology. BSPs. Biomarkers.Item Impact of age and FSH treatment on follicular environment, folliculogenesis and endometrial histomorphometry in prepubertal gilts(Universidade Federal de Viçosa, 2022-08-01) Alfradique, Vivian Angélico Pereira; Guimarães, Simone Eliza Facioni; http://lattes.cnpq.br/5154906147409490This study investigated the effect of age and FSH treatment on plasma levels of IGF-1 and E2, folliculogenesis, endometrial histomorphometry, biochemical composition of follicular fluid (FF), and on nuclear maturation, gene expression and quality of cumulus-oocytes complexes (COCs) of prepubertal gilts. For this, thirty-five prepubertal gilts were separated according to the age (140 or 160 days), and within each age, gilts were allotted to receive 100 mg of FSH [treated; G140+FSH (n = 10) and G160+FSH (n = 7)] or saline solution [control; G140+control (n = 10) and G160+control (n = 8)]. Before and after FSH treatment, blood was collected for IGF1 and E2 assay (radioimmunoassay), and reproductive tract ultrasound were performed. After 24 h of the last FSH injection, animals were slaughtered and their ovaries and uterus were collected for biometrical and histomorphometrical analysis. The biochemical profile of FF was analyzed in automatic biochemistry analyzer . COCs recovered were morphologically classified and submitted to brilliant cresyl blue (BCB) staining, gene expression (RT-qPCR) and in vitro maturation for subsequent evaluation of nuclear oocyte maturation. The percentage of medium follicles increased (P<0.05) as the same proportion that the percentage of small follicles reduced (P<0.05) in FSH-treated and younger gilts. In addition, the concentration of glucose in FF increased (P<0.05) in FSH-treated and older gilts; in contrast, the concentration of triglycerides decreased (P<0.05) in these same groups of gilts. Increasing of age and FSH stimulation improved (P<0.05) the metaphase II and BCB+ COCs rates and decreased (P<0.05) number of early atretic follicles. Also, changes (P<0.05) on endometrial histomorphometric are caused by FSH treatment and age. However, age and FSH treatment had no impact (P>0.05) on most transcripts’ abundance of selected target genes in COCs. Regarding the effect of age, biometrical data of uterus, plasma levels of IGF-1 and E2 increased (P<0.05) and changes (P<0.05) in uterine and ovaries ultrasound images occurs from 140 to 160 days of age. In conclusion, the increasing of the age and FSH treatment improved oocyte nuclear maturation and stimulated the endometrium epithelium in prepubertal gilts. Also, uterine growth still occurs during 140 and 160 days of age in prepubertal gilts. Keywords: Follicular development. Oocyte. Ovarian stimulation. PigItem Avaliação da produção in vitro de embriões em um programa comercial e morfometria de órgãos genitais de doadoras Gir leiteiro(Universidade Federal de Viçosa, 2021-07-26) Villela, Glauco Barra; Guimarães, José Domingos; http://lattes.cnpq.br/1267446204614160Avaliou-se a eficiência da produção in vitro de embriões Girolando F1(Bos primogenitus taurus x Bos primogenitus indicus) e o número de oócitos aspirados de fêmeas Gir Leiteiro (Bos primogenitus indicus) classificadas como baixa, intermediária ou alta doadora de oócitos. Total de 473 registros de aspirações foliculares guiadas por ultrassom para produção in vitro de embriões de 255 doadoras. Analisou-se a probabilidade de clivagem e a probabilidade de obtenção de embrião de acordo com o número de oócitos recuperados por doadora, o número de embriões obtidos quando as fêmeas foram divididas em quartis de baixo (<15, B- MTOA), intermediário (entre 15 e 33, sendo agrupados os dois quartis intermediários, I-MTOA) ou alto (>34, A-MTOA) número de oócitos aspirados. As variáveis quantitativas foram submetidas aos testes de Kolmogorov-Smirnov e de Bartlett para verificação de normalidade dos erros e homogeneidade de variâncias, respectivamente. O total de oócitos recuperados foi 11.815 em 468 procedimentos de OPU analisados, sendo a média do número de oócitos recuperados por doadora de 25,1±13,4. As médias do número oócitos recuperados para os animais foram 10,86±0,30, 23,47±0,32 e 44,84±1,03 para os grupos B-MTOA, I-MTOA e A-MTOA, respectivamente. A análise de regressão logística mostrou aumento na probabilidade de se obter embriões de acordo com o aumento do número de oócitos recuperados. Na segunda etapa foram coletados órgãos genitais de 26 fêmeas para avaliação morfométrica de ovários, tuba uterina e útero. Os animais foram divididos em classes de idades (<56, de 56 a 90 e >91 meses), status (anestro, ciclando, gestante), contagem de folículos antrais (CFA; <15, de 15 a 33 folículos e >34 folículos) e total de oócitos aspirados (TOA; <15, de 15 a 33 ócitos e >34 oócitos). As classes foram analisadas considerando as seguintes variáveis: idade, largura do ovário direito, espessura do ovário direito, comprimento do ovário direito, volume do ovário direito, peso do ovário direito, número de folículos contados no ovário direito, largura do ovário esquerdo, espessura do ovário esquerdo, comprimento do ovário esquerdo, volume do ovário esquerdo, número de folículos contados no ovárioesquerdo, total de folículos contados nos dois ovários, comprimento e peso da tuba uterina direita, comprimento e peso da tuba uterina esquerda, comprimento dos cornos uterinos direito e esquerdo, número de aspirações, média do total de oócitos aspirados, média do total de oócitos viáveis, média do número de embriões produzidos, total de embriões viáveis/OPU, total de embriões transferidos/OPU, número total de embriões obtidos\doadora, número total de prenhez obtida após transferência dos embriões. Para os parâmetros quantitativos, os valores obtidos foram testados quanto a normalidade dos dados pelo teste de Lilliefors e a homocedasticidade das variâncias pelos testes de Cochran e Bartlett. Foi realizada correlação simples de Pearson para as varíaveis quantitativas. O comprimento do ovário direito foi maior para animais com idade superior, enquanto o comprimento do ovário esquerdo foi significativamente maior apenas para animais com maior idade com relação a animais de idade intermediária. Houve moderada correlação negativa entre o número de folículos presentes nos ovários e a idades dos animais. Palavras-chave: Oócito. Vacas. Reprodução. Fecundidade.