Bioquímica Aplicada
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Item Avaliação da relação funcional entre Serine arginine protein kinase 2 (SRPK2) e Thymosin beta 4 (Tβ4) em melanoma metastático murino(Universidade Federal de Viçosa, 2024-05-31) Souza, Juliana Regina Ribeiro de; Brassan, Gustavo Costa; http://lattes.cnpq.br/3985727354332184Melanoma é uma forma de câncer que emerge das células pigmentares da pele, conhecidas como melanócitos. Apresenta alto risco de desenvolver metástase e, com isso, altas taxas de mortalidade. O peptídeo Tβ4, sequestrador de actina endógeno de 4,9 kDa, atua na motilidade celular, transição epitelial-mesenquimal (EMT) e outras múltiplas atividades biológicas, incluindo metástase tumoral. Anteriormente, identificamos uma possível ligação funcional entre Tβ4 e Serine Arginine Protein Kinase 2 (SRPK2), uma proteína relacionada ao controle do splicing do pré-mRNA e que têm sido encontradas superexpressas em diversos tumores, incluindo o melanoma. O objetivo deste estudo foi investigar a relação funcional e a interação entre Tβ4 e SRPK2 no contexto do melanoma metastático. Ensaios fenotípicos in vitro de proliferação celular, migração e formação de colônias foram realizados em células B16F10 de tipo selvagem ou modificadas por CRISPR-Cas9. A dinâmica da actina foi investigada em ensaios de imunofluorescência. Ensaio de ELISA foi realizado para observar a interação. O melanoma metastático foi induzido em camundongos através da injeção de células B16F10. Podemos observar que a expressão de Tβ4 correlaciona-se com mau prognóstico em pacientes com melanoma metastático. Por meio dos ensaios in vitro, observamos que seu efeito na promoção da proliferação celular, migração e formação de colônias foi prejudicado pelo inibidor farmacológico de SRPK ou pela depleção genética de SRPK2. Assim, o Tβ4 promoveu a organização dos lamelipódios da actina, que também foi afetada negativamente pela depleção funcional do SRPK. Além disso, os tratamentos com um inibidor farmacológico de SRPK (SRPIN340) ou com a depleção impediram o crescimento induzido por tumor Tβ4 in vivo. Juntos, esses resultados sugerem que SRPK2 transduz o sinal de Tβ4 em células tumorais para afetar a organização da actina e possivelmente o splicing do pré-mRNA, o que deve ser melhor investigado no contexto do melanoma metastático. Palavras-chave: Melanoma, Tβ4, SRPK2, metástase.Item Relação funcional entre Serine Arginine Protein Kinase 2 (SRPK2) e Thymosin Beta 4 (Tβ4) em melanoma metastático murino(Universidade Federal de Viçosa, 2020-02-20) Souza, Juliana Regina Ribeiro de; Brassan, Gustavo Costa; http://lattes.cnpq.br/3985727354332184