Microbiologia Agrícola
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Item Desenvolvimento de teste rápido imunocromatográfico de fluxo lateral para neosporose bovina(Universidade Federal de Viçosa, 2023-07-17) Pinto, Maria Eduarda Almeida; Mendes, Tiago Antônio de Oliveira; http://lattes.cnpq.br/9379279240915140Item Otimização da produção de lipopeptídeos por Bacillus velezensis visando ao controle de fungos fitopatogênicos(Universidade Federal de Viçosa, 2023-09-13) Félix, Jéssica da Silva; Tótola, Marcos RogérioO gênero Bacillus destaca-se como um dos mais empregados no biocontrole de doenças de plantas. Esses microrganismos são encontrados em diversos ambientes, sendo reconhecidos por sua capacidade de produzir lipopeptídeos. Essas moléculas são caracterizadas como biossurfactantes de baixo peso molecular e exibem atividade antibacteriana, antifúngica, antiviral, cicatrizante e antitumoral. Os lipopeptídeos se dividem em três famílias principais: surfactina, iturina e fengicina, sendo que as duas últimas apresentam elevada atividade antifúngica. Este trabalho teve como objetivo definir condições de cultivo adequadas para a produção de lipopeptídeos com atividade antifúngica por três isolados de Bacillus velezensis (LBBMA TR59II, LBBMA TR47II e LBBMA AP01), a fim de promover o controle de fungos fitopatogênicos. Para isso, realizou-se a otimização da produção de lipopeptídeos dos isolados em três diferentes meios de cultura (Meio Farelo de Soja adicionado de açúcar cristal, Meio 523 e Meio Mineral). Posteriormente, diferentes combinações de pH e temperatura foram investigadas. O fungo fitopatogênico modelo adotado no trabalho foi o Colletotrichum truncatum isolado UCBV258. Os estudos de otimização foram conduzidos utilizando-se o método de Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR). O meio de cultura Meio 523 propiciou as maiores produções de lipopeptídeos para B. velezensis LBBMA TR59ll e LBBMA TR47ll; para B. velezensis LBBMA AP01, as maiores produções de lipopeptídeos foram obtidas em Meio Mineral. Ao se considerar o custo dos ingredientes para a produção dos meios de cultivo, o Meio Farelo de Soja se mostrou o mais indicado para a produção de lipopeptídeos com ação fungicida para todos os isolados de B. velezensis estudados. As combinações das variáveis concentração de farelo de soja, de açúcar cristal, pH e temperatura propiciaram ganhos de eficiência de produção de lipopeptídeos (medida pela razão entre a produção de extrato bruto de lipopeptídeos liofilizado – EBEL - e a concentração inibitória mínima dos extratos brutos obtidos em cada condição) de até 59 vezes para o isolado B. velezensis LBBMA TR59ll, 17 vezes para B. velezensis LBBMA TR47ll 16 vezes para B. velezensis LBBMA AP01. Os ganhos de eficiência reportados, juntamente com o baixo custo dos ingredientes empregados no preparo dos meios de cultivo, têm o potencial de reduzir significativamente os custos deprodução de bioinsumos à base de Bacillus spp. visando ao controle de patógenos agrícolas. Palavras-chave: Bacillus velezensis. Lipopeptídeos. Surfactina. Fengicina. Iturina. Colletotrichum truncatum. Controle biológico.Item Exploring RNA virus diversity in Metarhizium spp(Universidade Federal de Viçosa, 2023-07-26) Oliveira, Cauê Neves; Zerbini, Poliane Alfenas; http://lattes.cnpq.br/8002246970195948Viruses are ubiquitous acellular organisms since there is evidence of them hosting any living cell in all kingdoms. Mycoviruses are characterized by infecting fungi. The International Committee on Taxonomy of Virus (ICTV) recently recognized 29 families with representatives of mycoviruses. Most of these families have an RNA genome, and only one has a circular ssDNA genome. The non-retroviral RNA viruses are sorted into three Baltimore groups. Group III is characterized by having a dsRNA genome, while groups IV and V correspond to a ssRNA positive and negative sense, respectively. The unique hallmark gene in these three groups is RNA-dependent RNA polymerase (RdRp). This protein is responsible for viral genome replication and is conserved in all groups. Moreover, mycovirus infection can change the host phenotype. Most of the time, these changes are related to modification of their host pathogenic trait. For example, hypovirulent-associated mycoviruses are characterized by reducing the aggressiveness of phytopathogenic fungi by slowing down their mycelial growth and sporulation rate, as well as downregulating pathogenic genes. On the other hand, hypervirulent-associated mycoviruses are characterized by promoting mycelial growth and sporulation rate and upregulating host pathogenic genes. Therefore, mycoviruses are a more eco-friendly alternative to pest-management strategies than the use of chemical compounds related to ecosystem harm. Hypovirulent-associated mycovirus can be used to control the incidence of phytopathogenic fungi, and hypervirulent-associated mycovirus can increase the efficacy of mycopesticides. Studies already demonstrate that hypervirulent-associated mycoviruses hosting entomopathogenic fungi (EPF) can increase their potential to control insect pests. This work used two approaches to identify novel mycoviruses infecting the EPF in the genus Metarhizium. The first strategy was carried out by the total nucleic acid extraction of a Metarhizium robertsii isolate SCJAN-21.11 followed by identifying and sequencing the dsRNA viral genome. As we know, we report the first case of a polymycovirus hosting a Metarhizium in Brazil. This polymycovirus has at least three dsRNA genome segments. Each segment encodes only one ORF representing the RdRp, a hypothetical protein, and a methyltransferase. The RdRp aminoacid phylogenetic analyses revealed that this mycovirus represents a new species, and we attempted to call it Polymycovirus mineiro. In the second strategy, we used a database with 77 viral family-level profile Hidden Markov Models (pHMM) to look for RdRp-like sequences in the public RNAseq data available on NCBI tagged as “Metarhizium.” The pHMM is a statistical model to identify sequence patterns. As a result, we could identify 42 virus-like sequences in approximately 20% of the analyzed data. In conclusion, this study helps elucidate the virosphere in Metarhizium genera and investigate the possibility of using mycovirus as a biocontrol agent. Keywords: Mycovirus; Biocontrol; Entomopathogenic fungi; MetarhiziumItem Tales from a genome heavily affected by RIP: unraveling Tc1/mariner and MITE transposable elements in Colletotrichum lindemuthianum(Universidade Federal de Viçosa, 2023-07-21) Ferst, Lara Mattana; Queiroz, Marisa Vieira de; http://lattes.cnpq.br/4408827815801006The Colletotrichum genus comprises fungal pathogens that inflict severe diseases on a wide range of hosts, including economically important plants. Colletotrichum lindemuthianum is the causative agent of anthracnose in common beans (Phaseolus vulgaris), leading to significant production and quality losses in this essential legume crop. Transposable elements are mobile genetic units found across all life domains that play a significant role in genomic plasticity, which is particularly relevant for phytopathogenic fungi such as C. lindemuthianum. These elements are classified into two distinct classes based on their transposition mode: Class I transposons rely on an RNA intermediate to transpose, while Class II transposons transpose directly as DNA. Additionally, transposons can be divided as autonomous and non- autonomous elements, with the latter depending on other transposable elements for their mobility due to the absence of essential functional components. The Tc1/mariner is a widely distributed Class II transposon superfamily. Miniature- inverted repeat elements (MITEs) are non-autonomous elements derived from Class II elements like the Tc1/mariner family. Considering the crucial role of transposons in generating genetic variability, this study aimed to identify and characterize Tc1/mariner and MITE transposable elements within the genome of C. lindemuthianum, using an in-silico approach. A total of 615 sequences related to Tc1/mariner elements were identified, which represented 0.78% of the genome. Among them, 536 copies were considered degenerated due to nearly unrecognizable terminal inverted repeats. Only one family of complete elements was found, and a derived MITE family was identified. Both the parental and derived families displayed a strong tendency to be found inserted within gene promoter regions. Moreover, two other MITE families were characterized, but the elements that originated them could not be identified. The elements from both families were primarily located within transposon-enriched regions. All complete elements showed putative transposase ORFs interrupted with multiple stop codons, suggesting that there are no active Tc1/mariner elements in C. lindemuthianum. Our analysis revealed that these elements were heavily affected by repeat-induced point mutations (RIP). Furthermore, we identified copies of both methyltransferases involved in RIP, which further supports that this mechanism or a RIP-like mechanism is active in C. lindemuthianum. The insights gained from this study contribute to a better understanding of the Tc1/mariner and MITE landscape as well as defense mechanisms against transposon proliferation of C. lindemuthianum, providing a foundation for further investigations into the genetic variability and transposable element exaptation of this economically important plant pathogen. Keywords: Class II transposons. Non-autonomous transposons. Repetitive DNA. Genome defense.Item Isolation and characterization of yeasts from brazilian coffee beans for brewing application(Universidade Federal de Viçosa, 2023-11-11) Siqueira, Tatiane de Paula; Tótola, Marcos Rogério; http://lattes.cnpq.br/1740176026695532The use of new non-Saccharomyces yeasts is a strategy for obtaining beers with new sensory profiles. This makes it possible to attend to the expectations of consumers who are increasingly looking for innovative beverages. In this study, we proposed the isolation of yeasts from coffee fruits, samples that have a wide range of microbial diversity. The study was conducted on samples obtained from the Alto da Mogiana region, a place in Minas Gerais known for its high-quality coffees. Twenty-seven isolates were obtained and of these, 52 % were able to use maltose as a carbon source and 87.5 % exhibited low hydrogen sulphide production. In addition, most of the isolates exhibited tolerance to factors such as alcohol content, low pH and temperature variation. Based on these results, two isolates (F702 and F605) were identified and selected for laboratory-scale fermentation characterization. Isolate F605 belongs to the Wickerhamomyces anomalus species, while F702 is a strain of Torulaspora delbrueckii. Laboratory fermentation trials have shown that these yeasts are unable to attenuate beer wort and, consequently, do not produce ethanol. In this context, the use of isolate F605 in co-fermentation with a conventional yeast was proposed. The F605 isolate was selected because of the better sensory profile observed throughout the experiments. The beer produced had an alcohol content of 5.6 %, indicating that the conventional yeast was able to grow and ferment in the presence of the isolate. An assay was also carried out to check consumer acceptance, which showed positive evaluations for criteria such as appearance and aroma. It can therefore be concluded that the coffee fruits evaluated were promising environments for isolating yeast with potential for application in the brewing industry. This reinforces the importance of sustainably exploiting Brazilian environments to obtain new national brewing strains, which can generate financial returns for the economy, as well as scientific and technological advances.Item Isolation and characterization of lytic bacteriophages for the composition of a phage cocktail capable of reducing bacterial biofilms in oil-related environments(Universidade Federal de Viçosa, 2023-07-06) Silva, Jéssica Duarte da; Paula, Sérgio Oliveira de; http://lattes.cnpq.br/0374413607226322Phages are viruses that infect bacteria and since their discovery in the early 20th century, they have been used to control bacterial growth. This work was divided into three chapters. The first genomically and biologically characterizes the Enterobacter phage vB_EclM-UFV01, presenting general characteristics of its genus, the Karamviruses. Chapter 2, examines the capacity of a phage cocktail (composed by enterobacteria-isolated phages) to reduce the biofilm of sulfate-reducing bacteria. The formulation of the cocktail, named Petro01, was performed by selecting phages from the collection of the Laboratory of Molecular Immunovirology at UFV and ended up being composed of three phages of the Tequatrovirus genus (briefly characterized genomically in this chapter) and one of the Karamvirus genus (described in Chapter 1). The stability of Petro01 under conditions similar to those found in petroleum-related environments, its shelf life at high storage temperatures, the supernatant composition (LB enriched with conservative compounds), as well as the propagation capacity of the phages that make up the cocktail in bench and a 12 L bioreactor, was also evaluated. Petro01 showed significant biotechnological potential and positive capacity for the composition of a phage-based product. Chapter 3 moves away from the environmental application of bacteriophages and characterizes, biologically and genomically, the Proteus mirabilis phages BigMira UFV01 and MidiMira UFV02, providing an overview of the common features of their genus, the Acadeviruses. It also presents the genomic evaluation of 10 strains of P. mirabilis, isolated in clinical environments, focusing on the LPS locus and the antimicrobial resistance profile. All phages described in this study have good potential as antibacterial agents. Keywords: Bacteriophages. Industrial microbiology. Sulfate-reducing bacteria. Bioproducing.Item Desenvolvimento de um meio de cultura para a levedura oleaginosa Papiliotrema laurentii combinando análise de balanço de fluxo e experimento fatorial(Universidade Federal de Viçosa, 2023-10-27) Barbosa, Samuel Lessa; Silveira, Wendel Batista da; http://lattes.cnpq.br/0051855316524917A demanda global por oleoquímicos vem aumentando ao longo dos últimos anos. Atualmente, a maioria desses compostos é produzida a partir de óleos vegetais, no entanto, a obtenção de oleoquímicos a partir de biomassa vegetal enfrenta desafios ambientais e socioeconômicos, uma vez que compete com a produção de alimentos. Os óleos microbianos, surgem como uma alternativa sustentável aos óleos vegetais, uma vez que não competem com a produção de alimentos, não dependem de condições geográficas ou sazonais específicas e apresentam maior rendimento lipídico. Nesse sentido, as leveduras oleaginosas são consideradas plataformas promissoras pois conseguem sintetizar lipídios a partir de matérias-primas abundantes e de baixo custo. A levedura oleaginosa Papiliotrema laurentii demonstrou a capacidade de assimilar diversas fontes de carbono, contudo o seu crescimento é limitado em meios de cultura comumente utilizados para o cultivo de leveduras oleaginosas. Portanto, é necessário desenvolver um meio de cultura que promova seu crescimento e, consequentemente, uma maior produtividade de lipídios. A análise de balanço de fluxo (do inglês Flux Balance Analysis ou FBA), aplicada a modelos metabólicos em escala genômica (do inglês Genomic-scale Metabolic Models ou GEMs), tem sido empregada com sucesso para obter informações fisiológicas e explorar o potencial genético de microrganismos. Neste trabalho, a FBA foi empregada utilizando o GEM de P. laurentii (papla-GEM) para direcionar experimentos fatoriais com o objetivo de desenvolver um meio de cultura que favoreça o crescimento de P. laurentii. Com base na FBA, foram selecionadas quatro fontes de carbono (glicose, xilose, sacarose e lactose) e duas fontes de nitrogênio (sulfato de amônio e ureia). Foi então delineado um experimento fatorial 4x3x2, avaliando combinações entre as quatro fontes de carbono em três concentrações e as duas fontes de nitrogênio. A combinação de lactose e ureia resultou em uma maior produção de biomassa e título lipídico. Posteriormente, foi avaliado o efeito do aumento da concentração do extrato de levedura e da concentração de carbono em um experimento fatorial 4x3. A condição de cultivo baseada na combinação de 28,56 g L-1 de lactose, 0,234 g L-1 de ureia e 0,5 g L-1 de extrato de levedura, com uma razão C:N de 75:1, resultou em um aumento de 500% tanto na produção de biomassa, quanto no título lipídico em comparação com a condição padrão, representada pelo meio de cultivo SS2 contendo 30 g L-1 de glicose, 0,523 g L-1 de sulfato de amônio e 0,1 g L-1 de extrato de levedura. Esses resultados demonstram que a estratégia proposta foi eficaz para aumentar a produção de biomassa por P. laurentii e, consequentemente, de lipídios com potencial para produção de oleoquímicos. Palavras-chave: Levedura Oleaginosa. Biomassa. Título lipídico. Lactose. Ureia.Item Monitoramento da atividade microbiana em área impactada pelo rompimento da barragem de rejeitos em Brumadinho-MG(Universidade Federal de Viçosa, 2023-10-02) Carvalho, Karen Braathen de; Silva, Cynthia Canêdo da; http://lattes.cnpq.br/9087210350153284O rompimento da barragem B1 em Brumadinho desencadeou um desastre ambiental de grande proporção no Brasil. A barragem que continha rejeitos oriundos da mineração espalhou mais de 12 milhões de metros cúbicos de lama, resultando em perdas ambientais e humanas. Para reabilitar a área impactada foi lançado em 2020 um projeto piloto de recuperação ambiental, na área denominada Marco Zero, com o intuito de reabilitar a área e utilizá-la de modelo para a recuperação das demais áreas afetadas. Sabendo que a microbiota do solo é responsável por inúmeros processos indispensáveis para a manutenção da vida e saúde no solo, sendo indicadores de qualidade frequentemente empregados em estudos pedológicos, este estudo se baseou em sua avalição. Assim objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de reabilitação da área atingida por rejeitos de mineração utilizando indicadores microbiológicos de saúde do solo. A Respiração Basal do Solo (RBS), Carbono da Biomassa Microbiana (CBM), quociente metabólico (qCO2) e enzimas foram avaliados. As amostras de solo foram coletadas nas estações chuvosa e seca, em seis transectos. Uma área de borda de rio, próxima, mas não afetada pela lama, foi selecionada como área de referência. Os resultados evidenciaram que as amostras coletadas na área afetada de forma geral tiveram valores de RBS e qCO 2 maiores e CBM menores que as amostras de referência, entretanto, não foi possível observar diferenças significativas entre os valores, sugerindo que os processos de reabilitação realizados na área estão tendo resultados satisfatórios. Entretanto, deve-se salientar que as atividades das enzimas beta-glicosidase, urease e arilsulfatase das amostras do solo na área afetada se mostraram inferiores ao esperado ou menores que das áreas de referência, mostrando que as atividades relacionadas com a ciclagem dos nutrientes ainda não foram totalmente recuperadas. As amostras localizadas a montante da área avaliada obtiveram resultados melhores as amostras coletadas a jusante. Por meio da análise multivariada foi possível verificar que as variáveis beta- glicosidase, urease, arilsulfatase e qCO2 se mostraram mais sensíveis às alterações da área afetada. Nossos resultados mostraram que apesar da reabilitação dos serviços ecossistêmicos da microbiota do solo no período avaliado ter progredido, as atividades de monitoramento devem ser continuadas por mais tempo para que atividades de intervenção, caso necessárias, possam ser realizadas para não haver mais impactos. Palavras-chave: Qualidade do solo, Atividade enzimática, Rejeito, Respiração Basal do Solo, Carbono da Biomassa.Item Spoilage potential, biofilm formation and blue pigment production by Pseudomonas paracarnis(Universidade Federal de Viçosa, 2023-02-16) Falqueto, Andressa; Machado, Solimar Gonçalves; http://lattes.cnpq.br/3028459900207953Dairy product contamination with psychrotrophic microorganisms is a concern for the dairy industry. Pseudomonas spp. have been frequently associated with blue pigmentation on the surface of fresh cheeses in recent years, but the structure of this pigment has not yet been elucidated. Furthermore, the production of lipase and protease by the Pseudomonas genus has been studied for many years due to the importance of these enzymatic activities in food spoilage. In addition to the production of hydrolytic enzymes and pigments, this genus is also recognized for its capability of biofilm formation, which represents a great risk for the permanence of Pseudomonas in the industrial environment. The main goal of this work was to evaluate the spoilage potential, biofilm formation capacity, and blue pigment production of Pseudomonas isolated from spoiled cheese. The production of blue pigment by strains belonging to Pseudomonas carnis, Pseudomonas paracarnis, and Pseudomonas fluorescens species was screened in an in vitro approach. Metabolites produced by P. paracarnis A006 were identified using gas chromatography followed by mass spectrometry (GC- MS) after its solubilization and extraction. The influence of different cheese manufacturing parameters on the production of pigments in a cheese-mimicking matrix (mini-cheese) was assessed using Response Surface Methodology (RSM) for Box- Behnken design (BBD). The colorimetric analyses of mini-cheese were carried out to obtain color variations and validation of the RSM approach. The deteriorating potential of the pigmented (P. paracarnis - A006) and non-pigmented (P. fluorescens ATCC 13525) strains was evaluated in vitro and in situ (mini-cheese). Proteolytic and lipolytic activities were quantified using azocasein and p-nitrophenyl palmitate, respectively, as substrates. Its ability of biofilm formation was assessed by applying the crystal violet method. P. paracarnis A006 was selected as the best producer of blue pigment among the evaluated strains, but it was not possible to identify its pigment chemical structure using the GC-MS approach. However, another 114 metabolites were identified. RSM highlighted the use of starter culture containing Lactococcus lactis subsp. cremoris, Lactococcus lactis subsp. lactis and Streptococcus thermophilus, in the cheese-making process, inhibits the multiplication of Pseudomonas. The inoculation of these lactic acid bacteria led to the inhibition of Pseudomonas growth, as well as the acidification of the cheeses reduced the production of blue pigment. The mathematical model defined by RSM determines that the absence of salt, a pH of 6.28 and an inoculum of 1.2 % of starter culture minimize the blue pigment production. The availability of nutrients, time and temperature of incubation interfere with proteolytic and lipolytic activity. P. paracarnis A006 and P. fluorescens ATCC 13525 showed proteolytic above 2.0 ∆A/mL.h, which demonstrate that both strains have a high proteolytic potential. Lipolytic activity of tested strains, like its proteolytic activity, is a strain-dependent characteristic and strongly affected by temperature and incubation time. The results of this work also revealed lower biofilm formation capacity over time at 25°C in both nutritional conditions, except for P. paracarnis A006 cultured in MMP. Eight out of nine genes located in the aprX-lipA operon, which encode genes related to the proteolytic and lipolytic activity, were identified in the genome of P. paracarnis A006 and P. fluorescens ATCC 13525. Therefore, defining cheese-making parameters is an interesting strategy to minimize the technological problems caused by Pseudomonas spp. Regarding this context, the RSM approach proved to be efficient. However, the chemical structure of the blue pigment produced by Pseudomonas spp. must be elucidated to have more information about the factors that can be controlled to minimize its production. Keywords: Response surface methodology. Mini-cheeses. Hydrolytic activity.Item Controle biológico e promoção de crescimento vegetal por Streptomyces spp.(Universidade Federal de Viçosa, 2023-04-11) Lizana Flores, Giuliana Shely; Queiroz, Marisa Vieira de; http://lattes.cnpq.br/5834104190020306O feijoeiro é cultivado em diversos sistemas de produção e em todas as regiões brasileiras, tanto por pequenos como por grandes produtores. No entanto, as reduções causadas na produtividade das lavouras pelos fitopatógenos são significativas. O uso de agrotóxicos para o controle de doenças, como os fertilizantes químicos, pode ocasionar problemas ambientais a médio e longo prazo. Nesse contexto, a busca por novas alternativas para o controle de doenças e melhoria das condições do solo tem crescido nos últimos anos. Assim, neste estudo, dois isolados de Streptomyces spp. (4L e 6O) coletados do solo foram caracterizados de acordo com a sua morfologia e fisiologia, e avaliados quanto a sua a capacidade de controlar fitopatógenos por meio de ensaios in vitro e in vivo. A capacidade de promoção de crescimento vegetal dos isolados de Streptomyces spp. foi avaliada por meio da detecção de fixação biológica de nitrogênio, da produção de ácido 3-indol-acético (AIA), de amônia e de sideróforos e da solubilização de fósforo. Foram também avaliadas a capacidade de produção de enzimas lignocelulolíticas (quitinase, xilanase, celulase e pectinase), assim como β-1,3-glucanase. Além disso, foi demostrada a presença de megaplasmídeo nessas bactérias mediante o método de eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Os resultados dos testes in vitro mostraram a capacidade antagônica dos isolados frente aos fungos Colletotrichum lindemuthianum (agente causal da antracnose), Sclerotinia sclerotiorum (agente causal da podridão ou mofo branco), e Rhizoctonia solani (agente causal da podridão radicular). A maior porcentagem de inibição de C. lindemuthianum foi obtida pelo isolado 6O que foi de 68,47%; para S. sclerotiorum foi de 51,22% pelo isolado 4L; e para R. solani, os dois isolados de Streptomyces spp. inibiram o crescimento do fungo com a mesma eficiência (38,47%). Experimentos realizados in vivo confirmaram esses resultados, em que os isolados de Streptomyces spp. reduziram a severidade da antracnose nas folhas em 25% para o isolado 6O e em 30% para o 4L; do mofo branco em 90% e da podridão radicular em 10% em relação ao controle positivo. Ambos os isolados foram capazes de incrementar a biomassa radicular e aérea em 20%, assim como o comprimento da raiz e da parte aérea em 25%. Observou-se ainda que ambos os isolados apresentam megaplasmídeo com tamanho aproximado de 97 kb. Concluiu- se que esses microrganismos possuem potencial como biocontroladores de doenças e promotores de crescimento para a cultura do feijão, além de apresentar um megaplasmídeo que pode ser importante para a produção de novos metabólitos secundários. Assim, esses isolados de Streptomyces spp. podem ser alternativa viável para a agricultura sustentável. Palavras-chave: Fungo fitopatogênico. Actinobactéria. Megaplasmídeo. Enzimas lignocelulolíticas.