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Análise do órgão articulação na doença articular degenerativa em modelo experimental por ruptura do ligamento cruzado cranial em cães
(Universidade Federal de Viçosa, 2017-07-19) Sepúlveda, Rodrigo Viana; Borges, Andréa Pacheco Batista; http://lattes.cnpq.br/4201407168845064
A doença articular degenerativa (DAD) é uma doença crônica da cartilagem articular. Até hoje, nenhuma terapia é capaz de regenerar a cartilagem articular danificada e nem impedir totalmente a sua progressão. Posto isso, é necessário o conhecimento de seus vários aspectos patológicos. Portanto, o presente trabalho tem por objetivo avaliar macro e microscopicamente as alterações ocorridas no modelo de indução cirúrgica da DAD após a ruptura do ligamento cruzado cranial em cães. Foram utilizados seis cães, adultos, pesando entre 15 e 30 Kg. Os animais foram anestesiados e tiveram o ligamento cruzado cranial do joelho direito rompido. Após 60 dias, foi realizada a eutanásia. Foi feita a análise anatomopatológica dos tecidos articulares e após essa análise, amostras foram coletadas para a análise histológica. A análise anatomopatológica revelou fibrilações superficiais e focais de espessura parcial na cartilagem articular dos côndilos femorais e platô tibial. A membrana sinovial apresentou-se descolorada, espessada e com aumento da vascularização. Nenhuma lesão macroscópica visível foi percebida nos meniscos. Na análise histológica, todos os tecidos articulares apresentaram algum grau de lesão. A superfície articular apresentou fissuras restritas à zona superficial e ondulações na superfície cartilaginosa, perda celular na zona superficial com eventuais agrupamentos. Também foi visto a presença de lacunas vazias na zona superficial. Ocorreu perda global do conteúdo de proteoglicanos e colágeno até a zona média da cartilagem articular. Houve perda da continuidade ou duplicação da tidemark da cartilagem articular de forma multifocal e aumento da espessura da placa óssea subcondral. A membrana sinovial apresentou pequenas vilosidades de distribuição multifocal, aumento da espessura do revestimento e moderado infiltrado inflamatório. Os meniscos apresentaram perda moderada do arranjo tecidual com discreta perda tecidual, perda moderada do conteúdo de proteoglicanos e colágeno em ambos os meniscos. Portanto, foi possível observar que aos 60 dias pós-ruptura do ligamento cruzado cranial, um grau leve de DAD, sendo as lesões uniformes. Por fim, o modelo não é útil para que o estudo de lesões macroscópicas seja feito, porém, permite avaliar a ocorrência de lesões microscópicas nos componentes articulares utilizando a abordagem da articulação como um órgão.
Células-tronco mesenquimais perivasculares do cordão umbilical de cães: obtenção, cultivo e caracterização
(Universidade Federal de Viçosa, 2014-07-24) Sepúlveda, Rodrigo Viana; Borges, Andréa Pacheco Batista; http://lattes.cnpq.br/4201407168845064
A popularidade das células-tronco mesenquimais (MSCs) vem desde a descoberta de células aderentes, com formato fibroblastoide e capazes de se auto-renovar, formar colônias, além de originar diferentes tecidos como cartilagem, osso, gordura e músculos, sendo então objeto de estudos principalmente na medicina regenerativa. Diante disso, há uma busca constante por fontes de MSCs, sendo a medula óssea a principal fonte dentro da terapia celular, no entanto, rejeição, co-morbidades associadas a coleta e número limitado de doadores estimularam a busca por novas fontes deste tipo celular. O objetivo desse trabalho é descrever a obtenção, o cultivo e a caracterização de células obtidas a partir da digestão enzimática do tecido perivascular do cordão umbilical (UC) de cães, na esperança de estabelecer uma nova fonte deste tipo celular para as espécies canina e humana, através do modelo animal. Para isso, UCs obtidos a partir de cesarianas terapêuticas foram submetidos ao protocolo de digestão enzimática com colagenase e hialuronidase. As células obtidas a partir desse procedimento foram submetidas a três diferentes protocolos de cultivo a fim de estabelecer o melhor meio para esse tipo celular. Estabelecido o melhor meio, através da curva de crescimento e do tempo de duplicação, as células foram submetidas a ensaios de diferenciação para comprovação de sua multipotência. Foram obtidas culturas aderentes e com morfologia fibroblastoide a partir de todos os UCs utilizados, com um número inicial de células de 4,8x105 por UC. A curva de crescimento mostrou uma fase estacionária (lag) de 0 a 24 horas, seguida por uma fase de crescimento de 24 a 168 horas e, então, uma fase de decaimento celular. O tempo de duplicação foi mantido em torno de 15 horas até a sexta passagem, a partir do qual houveram indícios de senescência celular. O ensaio de diferenciação demonstrou a capacidade das células em diferenciar-se em osteoblastos, condrócitos e adipócitos quando submetidos aos meios de indução. Diante dos resultados, acredita-se que as células obtidas a partir do tecido perivascular dos vasos sanguíneos do cordão umbilical de cães após sua digestão enzimática sejam células-tronco, com potencial de uso na terapia celular, necessitando da comprovação de linhagem mesenquimal.
Composite synthetic hydroxyapatite 30%, in two physical states, as dermal filler
(Revista Ceres, 2013-04-09) Sepúlveda, Rodrigo Viana; Borges, Andréa Pacheco Batista; Conceição, Lissandro Gonçalves; Valente, Fabrício Luciani; Reis, Emily Correna Carlo; Bohnenberger, Ingrid Bitencourt
The aim of this study was to evaluate the response to the implantation of synthetic hydroxyapatite 30% (HAP-91®) in different physical states as dermal filler. Eighteen New Zealand rabbits were used, distributed randomly into two equal groups and then divided into three groups according to the postoperative period at 8, 21 and 49 days. One mL of HAP-91®, fluid and viscous, was implanted in the subcutaneous tissue, 1 cm proximal to the cranial crest of the right scapula. The thickness of the skin was measured before and after implantation and for the following 15 days. Pain sensitivity assessment was conducted, assigning the following scores: 0 - when the animal allowed the touch of the implant area and expressed no signs of pain; 1 - when the animal allowed the touch, but pain reaction occurred, like increase of the respiratory rate or attempt to escape; 2 - when the animal did not allow the touch to the implanted area. At 8, 21 and 49 days, biopsy of the implanted area was performed. No difference was observed between the thickness of the skin (p>0.05) and all animals received a score 0 for soreness. Histological analysis did not reveal any obvious inflammatory process, showing a predominance of mononuclear cells in samples of eight days and tissue organization around the biomaterial with a tendency to encapsulation. The results indicate that HAP-91®, both viscous and fluid, is biocompatible and suitable for dermal filling.
Hydroxyapatite-lignin composite as a metallic implant-bone tissue osseointegration improver: experimental study in dogs
(Ciência Rural, 2016-02) Valente, Fabrício Luciani; Santos, Letícia Corrêa; Sepúlveda, Rodrigo Viana; Gonçalves, Gustavo Pereira; Eleotério, Renato Barros; Reis, Emily Correna Carlo; Borges, Andréa Pacheco Batista
The study aimed to evaluate biocompatibility, osteoconduction and osseointegration of a pasty composite of hydroxyapatite (20%) and lignin (80%) as a promoter of metal implant and bone tissue integration. An intramedullary Schanz pin was implanted in both tibias of fifteen bitches. In the left tibia, the pin was coated with the biomaterial at the time of surgery. Marrow cavity was also filled with the biomaterial. Right limb did not receive the biomaterial, then constituting the control group. Tibias were harvested from five animals at 8, 60 and 150 days after surgery; three of them were analyzed by histological and biomechanical assessment and the two remaining tibias by X-ray diffraction. Results showed that the biomaterial is biocompatible, with osteoconductivity and osseointegration properties. Histological analysis and diffractograms showed the presence of hydroxyapatite in samples in all periods, although the presence of organic material of low crystallinity was variable. There was no statistical difference in the forces required for removal of the biocompatibility, osteoconductivity and osseointegration, it was not able to promote a better intramedullary pin anchorage.
Microbiological viability of bovine amniotic membrane stored in glycerin 99% at room temperature for 48 months
(Revista Ceres, 2017-12-19) Pontes, Kelly Cristine de Sousa; Ramalho, Camila Almeida; Borges, Andrea Pacheco Batista; Sepúlveda, Rodrigo Viana; Eleotério, Renato Barros
The medium for storing biological tissues is of great importance for their optimal use in surgery. Glycerin has been proven efficient for storing diverse tissues for prolonged time, but the preservation of the bovine amniotic membrane in glycerin 99% at room temperature has never been evaluated to be used safely in surgical procedures. This study evaluated the preservation of 80 bovine amniotic membrane samples stored in glycerin 99% at room temperature. The samples were randomly divided evenly into four groups. Samples were microbiologically tested after 1, 6, 12 and 48 months of storage. The presence of bacteria and fungi in the samples was evaluated by inoculation on blood agar and incubation at 37 oC for 48 hours and on Sabouraud agar at 25 oC for 5 to 10 days. No fungal or bacterial growth was detected in any of the samples. It was concluded that glycerin is an efficient medium, regarding microbiology, for preserving pre-prepared bovine amniotic membrane, keeping the tissue free of microorganisms that grow in the media up to 48 months at room temperature.
Prevalence of periodontal disease in dogs and owners’ level of awareness - a prospective clinical trial
(Revista Ceres, 2012-06-12) Fernandes, Natalia Alves; Borges, Andréa Pacheco Batista; Reis, Emily Correna Carlo; Sepúlveda, Rodrigo Viana; Pontes, Kelly Cristine de Sousa
Periodontal disease (PD) is widely known among veterinarians for its high prevalence and serious consequences to the dogs. The objective of this study was to assess the occurrence of PD in dogs that live in the micro-region of Viçosa, treated at the Veterinary Hospital of the Federal University of Viçosa (HVT - Hospital Veterinário da Universidade Federal de Viçosa), as well as to assess how aware of this disease dog owners are. In order to do so, all dogs treated at the HVT from March 10th, 2009 to November 30th, 2009, on alternate days, had their oral cavities examined. Medical history data, such as age, type of food, main complaint and owner consent, halitosis, presence of dental calculus, inflammation and gingival recession and tooth loss, were collected. A prevalence of 88.67% was found for PD in dogs referred to the HVT, and 2.67% were referred due to this disease. Of all the owners who participated in the study, 43.83% knew about periodontal disease and of these 17.46% made use of some type of prevention or treatment. Therefore, periodontal disease is highly prevalent and the owners are not aware of the disease. Thus, a dog owner clarification program on periodontal disease is needed in the area where HVT-UFV operates.