Regeneração de plantas de maracujazeiro (Passiflora coccinea Aubl.) a partir de protoplastos derivados de mesófilo

Abstract

Folhas novas, recém-expandidas, de plantas de Passiflora coccinea Aubl., obtidas a partir da germinação de sementes e anteriores à emissão das gavinhas, foram utilizadas. como fonte de, explantes para o isolamento de protoplastos. O rendimento e a viabilidade dos , protoplastos variaram em função da mistura enzimática empregada na digestão dos tecidos. Foi observada baixa frequência de organogênese (25 ± 15%) de ramos em calos derivados de protoplastos. Regenerantes foram obtidos, ao final de 90 dias, pelo cultivo dos calos em alternância, a cada 30 dias, entre os meios MS suplementado com 0,001 mg.l-1 de ANA e 1,0 mg.l-1 BAP e MS suplementado com 1,0 mg.l-1 de zeatina, ambos adicionados de sacarose a 3% (p/v) e ágar a 0,7% (p/v). Os ramos regenerados foram alongados pela alternância, a cada 25 dias, entre os meios MS suplementado com 1,0 mg.l-1 de zeatina e MS na ausência de reguladores de crescimento. O enraizamento dos ramos deu-se pela transferência dos ramos alongados para o . meio MS suplementado com sacarose a 2% (p/v), metade da concentração dos sais e 1,0 mg.l-1 de AIB. Os ramos permaneceram nesse meio durante 12 dias, quando foram transferidos para a fase final , de alongamento das raízes em meio de composição similar, porém na ausência de reguladores de crescimento.

Newly expanded leaves of glasshouse-grown seedlings of Passiflora coccinea Aubl., prior to the development of tendrils were used as source of mesophyll protoplasts. Protoplast yield and viability were variable according to the enzyme mixture used. Following culture, protoplasts reached callusstage. A low regeneration frequency (25 ± 15%) was observed in protoplast derived calli. Plants were regenerated from dark-green compact callus, derived from MSG medium, after three subcultures, every 30 days, on MS medium supplemented with 1.0 mg.l-1 BAP, 0.001 mg.l-1 NAA, and MS medium supplemented with 1.0 mg.l-1 zeatin, both containing 3,0% (w/v) sucrose and solidified- with 0,7% (w/v) agar. Shoot regeneration occurred through organogenesis with. the development of adventitious buds on the surface of the calli. Regenerated shoots were elongated by subculturing every 25 days altemating between MS medium with 1.0 mg.l-1 zeatinand MS medium lacking growth regulators, and rooted on a half-strength MS based medium supplernented with 1.0 mg.l-1 IBA, for 12 days, followed by the transference to the same medium lacking growth regulators. Rooted plants were succesfully aclimatized under glasshouse conditions.