Determinação da atividade citotóxica do extrato vegetal de Croton urucurana Baill em linhagens de células tumorais

Abstract

O câncer é uma doença caracterizada pelo aumento descontrolado da proliferação celular. Em geral ocorrem paralelamente ao aumento do crescimento e perda da diferenciação celular. Assim as células cancerígenas perdem suas características originais de diferenciação e se tornam atípicas. As leucemias são neoplasias malignas que acometem as células do sangue e tem origem na medula óssea. São cânceres de grande incidência e de difícil tratamento, havendo, portanto, uma constante procura por terapias mais eficientes. O presente trabalho investigou a ação citotóxica do extrato hidroalcóolico de Croton urucurana em células leucêmicas humanas U937 e THP-1. As linhagens de células U937, THP-1 foram plaqueadas em volume de 100 μL/poço (1x10 6 cels/mL) em placas de 96 poços, tratadas com extrato nas concentrações finais de 50 μM, 100 μM, 200 μM e 400 μM e 800 μM para os testes de viabilidade celular com MTT (-3-(4,5-dimetil-2-tiazol) 2,5-difenil-2-H-brometo de tetrazom). Após 48h a viabilidade foi avaliada pelo MTT e o sobrenadante utilizado para dosagem da enzima Lactato Desidrogenase (LDH). Microscopia de fluorescência foi usada para avaliar a apoptose. O extrato foi capaz de induzir apoptose em ambas as linhagens de células testadas nas concentrações 400 e 800 μg/mL (p≤0,05). O aumento percentual da morte celular por apoptose foi associado a alterações no potencial de membrana mitocondrial sugerindo o envolvimento da via intrínseca de ativação da apoptose.

Cancer is a disease characterized by the uncontrolled rise of in the cellular proliferation. In general, it occurs in parallel to the increased growth and loss of cellular differentiation. Thus, the cancer cells lose their original properties of this cellular differentiation and become atypical. The leukaemia is a malign bone neoplasia, which affects the blood cells and have its source in the bone marrow. They are called cancers with great incidence and tough treatment, being, therefore a constant search for more efficient therapies.Thepresent study investigated the toxic action of the hydro alcoholic extract of the Croton urucuranain leukaemic cells U937, THP-1 which were plated in volume of 100 μL/pool (1x106 cels/mL) in plaques of 96 pools, treated in extracts in the final concentrations of 50 μM, 100 μM, 200 μM, 400 μM and 800 μM for the tests of cellular viability with MTT (-3- (4,5-dimethyl-2-thyazole) 2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide). After 48h the viability was tested by the MTT and the supernatant used to dosage the lactate dehydrogenase (LDH). The fluorescent microscopy was used to evaluate the apoptosis. The extract was capable to induce the apoptosis in both lineages of the tested cells, in the concentrations of 400 and 800 μg/mL (p≤0,05). The percentage increase of the cellular death by apoptosis was associated with alterations in the mitochondrial membrane potential, which suggests an involvement in the intrinsic activation path of the apoptosis.