Expressão de miogenes em longissimus dorsi durante o período pré-natal de suínos

Abstract

Este trabalho foi realizado com o objetivo de se avaliar a expressão de miogenes, usando-se a técnica de RNAseq e qRT-PCR, em embriões inteiros (21 dias de gestação ou dpc) e em longissimus dorsi de fetos (aos 40, 70 e 90 dpc) de dois grupos genéticos divergentes de suínos (linhas comercial e raça local Piau), de forma a entender as diferenças bioquímicas durante a miogênese que levam a diferenças de musculosidade entre estes suínos. O primeiro capítulo se baseou na análise de expressão diferencial pela técnica de RNAseq, comparando-se a biblioteca de transcritos identificados nos embriões e fetos de suínos comercial (tipo Landrace e Large-White) com Piau para cada idade pré-natal. Sugere-se que a 21 dpc, há um atraso na miogênese em comercial devido a uma menor expressão de miogenes nesta raça em relação a Piau. Isso pode refletir o retardo no início da diferenciação do miotoma, o que faz com que ocorra um maior período proliferativo das células do somito em comercial, sendo importante para um aumento das células miogênicas nos períodos subsequentes. Aos 40 e 70 dpc, a expressão dos miogenes é maior em fetos da linha comercial do que em Piau. Isso sugere que ocorre uma maior formação de fibras primárias aos 40 dpc e de fibras secundárias aos 70 dpc na linha comercial do que na raça Piau. A ausência de expressão diferencial de miogenes aos 90 dpc sugere que a formação das miofibras já esteja finalizada neste período em ambos os grupos genéticos. O segundo capítulo se baseou na análise da expressão de 13 miogenes por qRT-PCR nos grupos genéticos comercial (tipo Duroc, Large-White e Landrace) e Piau de suínos em cada idade pré-natal. No geral, os resultados sugerem que o gene LEF1 é candidato primário para se explicar a diferença de musculosidade entre essas raças, uma vez que sua expressão possivelmente leva a uma maior fusão de mioblastos em comercial em relação a Piau.

This work was conducted with the aim to evaluate the expression of myogenic genes, using RNAseq and qRT-PCR techniques, in whole embryos (at 21 days of gestation or dpc) and in longissimus dorsi of fetuses (at 40, 70 and 90 dpc) of two different genetic groups of pigs (commercial lines and local Piau breed), in order to understand biochemical differences during myogenesis that lead to different muscularity between them. The first chapter was based on the analysis of differential gene expression by RNAseq technique, comparing libraries with identified transcripts in embryos and fetuses of commercial pigs (Landrace and Large-White type) with Piau at each prenatal age. It is suggested that at 21 dpc there is a delay on myogenesis in commercial pigs due to a lower expression of myogenic genes in this breed in relation to Piau. This can reflect a delayed onset of myotome differentiation, which causes an increased proliferative period of somite cells in commercial pigs, which is important for increasing myogenic cells in subsequent periods. At 40 and 70 dpc, expression of myogenic genes is higher in fetuses of commercial than in Piau pigs. This suggests that there is an increased formation of primary fibers at 40 dpc and secondary fibers at 70 dpc in commercial in relation to Piau pigs. Non-differential expression of myogenic genes at 90 dpc suggests that formation of myofibers is already finished at this period in both genetic groups. The second chapter was based on the expression analysis of 13 myogenic genes by qRT-PCR in commercial (Duroc, Large-White and Landrace type) and local Piau pigs at each prenatal age. Overall, the results suggest that LEF1 gene is primary candidate to explain differences in muscularity between these breeds, since its expression could lead to a greater myoblast fusion in commercial in relation to Piau pigs.