Effect of somatotropin and thyroxine on the in vitro development of bovine preantral follicles

Abstract

The aim of the study was to evaluate the effect of recombinant bovine somatotropin (rbST) and thyroxine (T4) on survival and growth of bovine preantral ovarian follicles (PAOF) cultured in vitro. Ovarian fragments were collected in local abattoirs and immediately fixed for classical histology and transmission electron microscopy (non-cultured control). The other fragments were then cultured in situ for seven days in minimum essential medium alone (MEM+ - cultured control) or in the presence of 1,000 ng/mL rbST and 20 ng/mL T4, isolated or associated. After seven days, there was a reduction (P<0.05) in the percentage of normal follicles in MEM+ alone or with T4. In oocyte diameter, there was a reduction in MEM+ alone. There was no influence (P>0.01) of the medium used on the follicular diameter of the PAOF cultured for seven days. Ultrastructural analysis showed cell damage. In conclusion, the presence of rbST maintains the rate of morphologically normal follicles during the culture for seven days (observed by optical microscopy), but it does not exert beneficial effects on its ultrastructural integrity and oocyte and follicular growth.

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da somatotropina recombinante bovina (rbST) e da tiroxina (T4) sobre a sobrevivência e o crescimento de folículos ovarianos pré-antrais (FOPA) bovinos cultivados in vitro. Fragmentos ovarianos foram coletados em abatedouros locais e imediatamente fixados para histologia clássica e microscopia eletrônica de transmissão (controle não cultivado). Os demais fragmentos foram cultivados in situ por sete dias em meio essencial mínimo sozinho (MEM+ - controle cultivado), ou na presença de 1.000 ng/mL de rbST e 20 ng/mL de T4, isoladamente ou em associação. Após sete dias, houve redução (P<0,05) na percentagem de folículos normais no MEM+ sozinho ou quando adicionado T4. No diâmetro oocitário, houve redução no MEM+ sozinho. Não houve influência (P>0,01) do meio utilizado, no diâmetro folicular, dos FOPA cultivados por sete dias. A análise ultraestrutural demonstrou danos celulares. Conclui-se que, apesar da presença da rbST manter a taxa de folículos morfologicamente normais durante o cultivo por sete dias (observado por microscopia óptica), o uso de rbST e T4 em meio de cultivo in vitro de FOPA, nas concentrações utilizadas no presente experimento, não exerce efeitos benéficos quanto à integridade ultraestrutural e aos crescimentos oocitário e folicular.