Chemical sterilization in in vitro propagation of Arundina bambusifolia Lindl. and Epidendrum ibaguense Kunth

Abstract

There is a great demand for simpler and less costly laboratory techniques and for more accessible procedures for orchid breeders who do not have the necessary theoretical basis to use the traditional seed and clone production methods of orchids in vitro. The aim of this study was to assess the use of sodium hypochlorite (NaClO) as a decontaminant in the process of inoculating adult orchid explants of Arundina bambusifolia and Epidendrum ibaguenses. Solutions of NaClO (1.200, 2.400, 3.600, 4.800 and 6.000 mg L^-1 - equivalent to 50, 100, 150, 200 and 250 mL L^-1 of commercial bleach - CB) were sprayed on the explants (1.0 mL) and the culture medium (GB5), in the presence or absence of activated charcoal (2 g L^-1). The explants used were nodal segments of field-grown adult plants. The procedures for inoculating the explants were conducted outside the laminar flow chamber (LFC), except for the control treatment (autoclaved medium and explant inoculation inside the LFC). The best results for fresh weight yield, height and number of shoots were obtained using NaClO in solution at 1.200 mg L^-1 (equivalent to 50 mL L^-1 commercial bleach) with activated charcoal in the culture medium. Fresh weight figures were 1.10 g/jar for Arundina bambusifolia and 0.16 g/jar for Epidendrum ibaguenses. Spraying the NaClO solutions controls the contamination of the culture medium already inoculated with the explants.

Há uma grande demanda por técnicas de laboratório mais simples, e de menor custo, e por procedimentos mais acessíveis, por parte de orquidófilos que não têm o embasamento teórico necessário à utilização de métodos usuais de produção, seminífera e clonal, de orquídeas, in vitro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da aplicação de hipoclorito de sódio (NaClO), para a descontaminação, no processo de inoculação de explantes de orquídeas das espécies Arundina bambusifolia e Epidendrum ibaguenses. As soluções de NaClO (1.200; 2.400; 3.600; 4.800 e 6.000 mg L^-1 - equivalentes a 50; 100; 150; 200 e 250 mL L^-1 de água sanitária comercial - ASC) foram borrifadas (1,0 mL) sobre explantes e meio de cultura (GB5), na ausência ou na presença de carvão ativado (2 g L^-1). Os explantes utilizados foram segmentos nodais de plantas adultas, cultivadas a campo. Os procedimentos para inoculação dos explantes foram realizados fora da câmara de fluxo laminar (CFL), exceto no tratamento controle (meio autoclavado e inoculação dos explantes em condições de CFL). Máxima produção de matéria fresca, altura e número de brotações foi obtida com 1.200 mg L^-1 de NaClO (equivalente a 50 mL L^-1 de ASC), na presença de carvão ativado no meio de cultura, correspondente à matéria fresca de 1,10 e 0,16 g/frasco, para Arundina bambusifolia e Epidendrum ibaguenses, respectivamente. A pulverização de soluções de NaClO controla a contaminação de meio de cultura já inoculado com o explante.