Promoção de enraizamento e indução de resistência sistêmica à ferrugem e à mancha-de-cylindrocladium, mediadas por rizobactérias em clones de Eucalyptus spp. (Patente PI0101400-5)

Abstract

A propagação vegetativa de eucalipto por meio da técnica de miniestaquia vem sendo amplamente empregada nas principais empresas florestais do país. No entanto, ainda se verifica heterogeneidade quanto ao enraizamento entre os genótipos, principalmente na fase inicial de adaptação dos clones. Deste modo, técnicas alternativas que otimizem o enraizamento de estacas e miniestacas de eucalipto são fundamentais para melhorar a qualidade das mudas e reduzir o custo de produção. Além de potencialmente poderem atuar como promotoras de enraizamento, a utilização de rizobactérias na multiplicação clonal de eucalipto, pode propiciar a obtenção de mudas com maior resistência às doenças associadas a viveiros de propagação. Testaram- se 107 isolados de bactérias, obtidos da rizosfera de mudas de diferentes clones de eucalipto, quanto ao seu potencial como promotores de enraizamento de estacas e miniestacas de Eucalyptus spp. Para tanto, amostras de substrato à base de composto de casca de arroz carbonizada:vermiculita (1:1) foram tratados com 10 ml de uma suspensão de cada isolado (OD 540 = 0,2A)/tubete, correspondendo à cerca de 10 8 ufc/ml. Utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado (DIC) com cinco repetições por tratamento, cada uma delas constituídas por 10 estacas. Aos 30 dias, avaliou-se o enraizamento médio (porcentagem média de estacas enraizadas) e o peso médio do sistema radicular seco. Dez isolados destacaram-se como excelentes indutores de enraizamento, propiciando ganhos de até 110% no enraizamento médio e de até 250% no peso de raiz. Esses isolados também foram eficientes no enraizamento de miniestacas, cujos ganhos variaram de acordo com o clone e isolado testados. Também se avaliou o efeito dos 10 isolados como promotores de enraizamento em três diferentes substratos: vermiculita pura; moinha de carvão:composto de casca de eucalipto:vermiculita (5:3:2) e composto de casca de arroz carbonizada:vermiculita (1:1). Não se observou interação isolado-substrato, sendo que o substrato à base de composto de casca de arroz carbonizada foi muito superior, quanto à porcentagem de miniestacas enraizadas e ao peso médio de raiz seca. Mudas com cerca de 80 dias de idade, previamente enraizadas em substrato tratado com as rizobactérias, foram testadas quanto à resistência à ferrugem do eucalipto e à mancha de Cylindrocladium candelabrum, em câmaras de crescimento (22 o C/ fotoperíodo = 12 h). Utilizou- se um DIC com quatro repetições, cada uma com três plantas, para ferrugem, e quatro tratamentos com cinco repetições para Cylindrocladium. Aos 13 dias da inoculação, avaliaram-se o número médio de pústulas/ folha, número de soros/ amostra e o número médio de esporos/ soro. Na avaliação da mancha de Cylindrocladium candelabrum, mediu-se apenas o tamanho da lesão ao oitavo dia após a inoculação, visto a mesma ter sido feita utilizando-se discos de micélio. Dois isolados foram bastante eficientes na redução da severidade da ferrugem, no entanto, o mesmo efeito não foi observado para Cylindrocladium. Com o tratamento das mudas com rizobactérias apenas uma semana antes da inoculação com Puccinia psidii, obteve-se redução na severidade da doença muito menor do que a observada nas mudas enraizadas em substrato tratado com bactérias. Os maiores ganhos obtidos no enraizamento de miniestacas (20-40%) são bem expressivos, visto que a técnica de miniestaquia propiciou um ganho de no máximo 40% de enraizamento em relação à estaquia convencional e, no caso do tratamento com rizobactérias, não seria necessário nenhum ajuste no manejo ou na infra-estrutura dos viveiros. Somando-se a esse ganho direto, pode-se ter um melhor aproveitamento da estrutura física desses viveiros, ao se diminuir o tempo que as miniestacas necessitem permanecer em casa-de-vegetação para um bom enraizamento. Os isolados selecionados foram eficientes em várias condições e em diferentes genótipos o que viabiliza a sua utilização em larga escala. Estudos de formulação ainda são necessários, de preferência empregando-se a própria fração orgânica utilizada no preparo dos substratos de enraizamento como veículo. Além disso, o conhecimento dos mecanismos de atuação podem ajudar a potencializar a promoção de crescimento, otimizando a aplicação prática dos isolados em condições de campo. Abre-se aqui um vasto campo de estudo visando aproveitar ao máximo o potencial de rizobactérias na eucaliptocultura.

The major afforestation companies of this country are increasingly using mini-cutting technique for vegetative propagation of eucalyptus. However, there is high heterogeneity in rooting among the genotypes, especially at the initial clone adaptation phase. Thus, alternative techniques, which can optimize the rooting of the cuttings and the mini-cuttings of eucalyptus, are essential for improving the seedling quality and reducing the production cost. Rhizobacteria potentially can act as rooting promoters for clonal multiplication of eucalyptus, and can also help obtain seedlings with greater resistance to nursery diseases. One hundred and seven bacteria obtained from the rhizosphere of seedlings of different eucalyptus eucalyptus clones, were tested for their potential as rooting- promoters of cuttings and mini-cuttings. Substrate based on the compost of carbonized rice hull: vermiculite (1:1) was treated with 10 ml of the bacterial suspension (OD 540 = 0.2 A=10 8 cfu/ml) / tube of either isolate. Completely randomized block design was used with five replications of 10 cuttings each, and mean rooting percentage dry root weight was determined 30 days after planting. Ten isolates were found to be excellent root inducers, increasing rooting percentage by about 110% and root dry weight by 250% relative to controls. These isolates were also efficient in promoting the rooting of mini- cuttings and the beneficial effect varied among the clones and the isolates. The root inducing effect of these isolates was further tested in three different substrates: pure vermiculite; ground charcoal; eucalyptus bark compost: vermiculite (5:3:2) and compost of carbonized rice hull: vermiculite (1:1). There was no isolate-substrate interaction, but the carbonized rice hull: vermiculite substrate was much superior for improving percentage rooting of mini-cuttings and dry root weight. Eighty days old seedlings previously rooted in the rhizobacteria treated substrate were tested for resistance to rust and leaf spot caused by Cylindrocladium candelabrum, in a growth room (22 o C/ 12 h photoperiod). Completely randomized block design with four replications of three plants each was used for rust, and four treatments with five replications were used for evaluating Cylindrocladium. Mean pustules number /leaf, number of sori/sample and the mean spore number /sorus was determined 13 days after inoculation. C. candelabrum leaf spot was evaluated by measuring mean lesion size eight days after inoculation with a mycelial disc. Two isolates were very efficient in reducing the rust severity, but not Cylindrocladium leaf spot. The disease severity reduction was much less in seedlings treated with the rhizobacteria only week before the inoculation with Puccinia psidii, compared to seedlings rooted in the treated substrate. The maximum benefit in the rooting of mini-cuttings (20 to 40%), is expressive, considering that the mini-cutting technique gave only 40% increase in rooting over traditional cuttings. Use of treatment with rhizobacteria, does not require management adjustment or the infrastructure changes of the nurseries. Adding to this direct advantage, there is better use of the physical space of the nursery, because the time required for mini-cuttings to stay in the greenhouse is drastically reduced. The selected isolates were efficient under different conditions and on different genotypes, which makes its large-scale use possible. Studies on the formulation are necessary, preferentially using the same organic fraction used for preparing the rooting substrate as vehicle. Besides this the knowledge of the mode of mechanism can help optimize growth promotion, by optimizing the application practice of the isolates in field conditions. A wide field of study is opened for using maximally the potential of rhizobacteria in eucalyptus cultivation.